Способ вызывания полиовуляции у коров-доноров при трансплантации эмбрионов

)5 А 01 К 67/О ИСАНИЕ ИЗОБРЕТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ К АВ вызывания полиовуляции у коров, мых в качестве доноров эмбрио трансплантации. Целью изобретен ется снижение трудоемкости спасо вышение оплодотворяемости. заключается в том, что вводят преп дующего состава; фолликулостим щий гормон гипофиза 40 - 50 мг, ви 24;7 - 34,6 мг, витамин Дз 2,5 - витамин 1:50 - 70 мг. 10-ный эфир твор лецитина 0,5 - 1,0 мл или тв капли, вода дистиллированная 20 парат вводят внутримышечно на и нии 3 дней по одной инъекции в де день вводят 7 мл, во 2-й день - 7 день - 6 мл, 2 табл.(54) СПОСО ЦИИУ КО ПЛАНТАЦИ (57) Изобре ству, в частн мл,инъекций на протяжении 4 -инъекции ежедневно) фолликулющего гормона гипофиза.Недостатком данного способа являетсяего трудоемкость, связанная с многократными ежедневными обработками, что частовызывает стрессовые явления у высокопродуктивных коров-доноров,Цель изобретения - снижение трудоемкости существующего метода подготовкикоров-доноров и повышение оплодотворяющей способности животных,Поставленная цель достигается введением коровам гонадотропного препаратавнутримышечно на протяжении 3 дней поодной инъекции в день, 1- и 2-й день по 7 мл,3-й день - 6 мл. В качестве гонадотропногопрепарата используется фолликулостимулирующий гормон (ФСГ) в виде эмульсии, вводной фазе которой растворен ФСГ, в масляной фазе - витамины А, Дз, Е, эмульгиру 5 днеи, по 2 остимулируОСУДАРСТВЕННЪЙ. КОМИТЕТ0 ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТРИ ГКНТ СССР(71) Украинский научно-исследовательскийинститут физиологии и биохимии сельскохозяйственных животных(56) , ТНЕВ 06 ЕМО 1 ООУ, 1984, 22, р,97-99,ВЫЗЫВАНИЯ ПОЛИОВУЛЯОВ-ДОНОРОВ ПРИ ТРАНС- ЭМБРИОНОВение относится к животноводсти к способам искусственного Изобретение относится к животноводству, в частности к способам искусственного вызывания полиовуляции у коров, отбираемых в качестве доноров эмбрионов при трансплантации,Известен способ вызывания полиовуляции у коров посредством однократной обработки в лютеиновую фазу цикла гонадотропином сыворотки жеребых кобыл (ГСЖК).Недостатком метода применения ГСЖК является низкая предсказуемость метода, часто большой процент животных проявляет охоту преждевременно, кроме того, затруднена дозировка этого препарата, в результате его легко можно передозировать, что приводит к вызыванию фолликулярных кист яичника.Наиболее близким к предлагаемому является способ вызывания полиовуляции посредством многократных инъекций (8 - 10 отбираенов при ия являба и по- Способ арат слеулирую тамин А 35 мг, ный расин 1 - 2 мл. Пре- ротяжень, В 1-йющим агентом служит лецитин или твин. Витамины, вводимые в препарат и поступающие в организм, способствуют ускорению оогенеза, в результате чего усиливается полиовуляторное действие ФСГ, кроме того, эмульсия пролонгирует действие ФСГ, в результате чего удается более чем в два раза сократить количество инъекций препарата и длительность обработки.Способ изготовления. Эмульсию готовят из расчета на 10 коров-доноров. Для этого в 200-миллилитровый химически чис. тый стакан с делениями, вносят 50 мл тривитамина и 5 - 7 мл 10-ного эфирного раствора лецитина или 5 - 10 капель твина, доливают до отметки 150 - 170 мл дистиллированной водой, смешивают и диспергируют на ультразвуковом диспергаторе У ЗДНпри частоге 35 кГц, экспозиция 1 - 2 мин. ФСГ из расчета 40 - 50 мг на 1 дозу, 400 - 500 мг на 10 доз растворяют в 30 - 50 мл дистиллированной воды, переносят в стакан с эмульсией, смешивают механически и диспергируют дополнительно 10 - 20 с, В таком виде препарат готов к употреблению, хранить при 2 - 5 С на протяжении до Зм, .Способ применения. Предлагаемый препарат вводят внутримышечно для вызывания полиовуляции коровам-донорам в период лютеиновой фазы цикла (8 - 13-й день цикл) на протяжении 3 дней по одной инъекции в день; 1-й день - 7 мл, 2-й - 7 мл 3-й -6 мл,Через 48 ч после начала введения препарата для синхронизации охоты вводят простагландин Фальфа из расчета 500 мкг клопростенола, Для этой цели используются синтетические препараты эстрофан, энзапрост., динапрост, эструфалан и др. Эструс наступает обычно через 48 ч после введения простагландина Фйальфа, Осеменяют коров на протяжении всей охоты (2 - 3 раза) с интервалом 12 ч, Вымывание и пересадку эмбрионов производят на 7-8-й день после окончания охоты,Испытание разработанного препарата производили на пунктах трансплантации; В качестве прототипов использовали подготовку доноров чистым препаратом ФСГ по классической схеме: 5-дневное введение по 2 инъекции ежедневно или же обработку ГСЖК - фолл иго ном,.В табл.1 приведены данные по эффективности предлагаемого и известного способов.Как видно иэ данных табл,1 применение разработанного метода на 53 коровах-донорах в латеиновум фазу цикла способствовало вызыванию полиовуляции у 39(757 ь) коров, что несколько выше результата у животных в группе, получавшей чистый ФСГ.Заметно выше количество коров, от которых получены эмбрионы при обработке их по предлагаемому способу по сравнению с 5 прототипом, Введение препарата увеличивало также количество жизнеспособных эмбрионов (88 ). В группе коров, получавших ГСФК, этот показатель равен 79 и в группе, получавшей ФСГ, 60 ,10 Одна доза комплексного гонадотропного препарата содержит 40 - 50 мл фолликулостимулирующего гормона гипофиза (ФСГ) 24,7 - 34,6 витамина А; 2,5 - 3,5 мг витамина Дз; 50 - 70 мг витамина Е, 0,5 - 1,0 15 мл 104-ного эфирного раствора лецитинаили 1 - 2 капли твина.- . Препарат после диспергации на ультразвуковом диспергаторе УЗДНпри частоте 35 кГц в течение 1 - 2 мин представляет собой эмульсию белого цвета со слабым 20 эфирным запахом, срок хранения 3 мес при2 - 5 С.В табл,2 приведен состав гонадотропного препарата.Состав с минимальным содержанием,ингредиентов применяется телкам или же 25 коровам-первотелкам живой массой до 400кг, со средним - коровам живой массой 400 - 500 кг, с максимальным - 500 кг и больше.Предлагаемый препарат вводят внутри мышечно для вызывания полиовуляции коровам-донорам в период лютеиновой фазы цикла (8 - 13-й день цикла) на протяжении трех дней по одной инъекции в день; 1-й день 7 мл; 2-й - 7 мл и 3-й - 6 мл, Через 48 ч 35 после начала введения препарата для синхронизации охоты вводят простагландин Ф 2- альфа из .расчета 500 мкг синтетического препарата - клоп ростенола,,Характеристика ингредиентов. Фолли кулостимулирующий гормон гипофиза ФСГлиофильно высушенный белый без запаха порошок, хорошо растворим в 0.9-ном растворе МаС, Хранить при температуре О - 4 С на протяжении года.45 Витамин А кристаллы - белого или бледно-желтого цвета со слабым запахом, быстро разлагаются на воздухе; растворим в спирте, хлороформе, эфире и жирных маслах, нерастворим в воде, Можно приме нять раствор ацетата витамина А в масле:3,44; 6,88; 8,6-ный (прозрачная масляная жидкость без прогорклого запаха и вкуса).55 Раствор витамина Дз в масле - прозрачная маслянистая жидкость от светло-желто117 95 го до темно-желтого цвета без прогорклого 5запаха.Витамин Е - светло-желтая прозрачная вязкая жидкость со слабым запахом,На свету окисляется и темнеет. Практически нерастворима в воде, растворима вспирте, ацетоне, эфире и растительных 10маслах,В качестве витаминной части при приготовлении комплексного препарата можноприменять тривитамин или тривиат,Применение предлагаемого способа заметно повышает выход пригодных к пересадке эмбрионов в расчете на одногодонора: у коров, получавших ГСФК, эта ве- .личина равнялась 2,6 - 2,7. у группы, получавшей комплексный препарат - 4,03, Этосвидетельствует о том, что наряду со снижением кратности и продолжительности обработок заметно повышается выходоплодотворенных яйцеклеток, в результатечего повышается эффективность методатрансплантации эмбрионов крупного рогатого скота,Использовано доноров,голов Реагировало полиовуляцией, голов Количество доноров,от которых получены эмбрионы, голов(%) Извлечено эмбрионов, штф) в т.ч.жизнеспособных дегенерированных неоплодотворенных яйцеклеток Пригодных к пересадкеэмбрионов в расчете на одного донора Пересажено змб ионовФормула изобретения Способ вызывания полиовуляции у коров-доноров при трансплантации эмбрионов, включающий введение препарата на основе фолликулостимулирующего гормона гипофиза, о т л и ч.а ю щ и й с я тем, что, с целью снижения трудоемкости способа и повышения оплодотворяемости, препарат дополнительно содержит витамин А. витамин Дз, витамин Е,10-ный эфирный раствор лецитина или твин и дистиллированную воду при следующем соотношении ингредиентов:Фолликулостимулирующий гормон гипофиза, мг 40 - 50Витамин А, мл 24,7- 34,6 Витамин Дз мг 2,5 - 3,5 Витамин Е, мг 50 - 70 107 ь-ный эфирный раствор лецитина,0,5- 1,0или твин, капли 1 - 2 Дистиллированная вода 20 ил причем введение препарата осуществляют один раз в сутки в течение трех дней,1729352 Таблица 2 Составитель М.Прокофьев Редактор Л, Веселовская,Техред М.Моргентал Корректор С,Патрушева Производственно-издательский комбинат "Патент", г, Ужгород, ул,Гагарина, 101 Заказ 1449 Тираж ПодписноеВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР113035, Москва, Ж, Раушская наб 4/5С