Способ получения иммуностимулятора

(51)5 А 61 К 35/00 И Т АВ асти велученияЦель эффектом исиентов оту, ми- причем етеринары РСФСР(72) П.Е,Игн тов, Д,В.Бер и В.В,Сочне (56) Воробье ты. М.: Меди тов, А,И.Федо зин, Г И,Григо у антиты при путем эмуль- анием(54) СПОСО МУЛ ЛТОРА повышение эффектора,тся следующим обготовление препараГОСУДАРСТВЕННЫИ КОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯПРИ ГКНТ СССР ОПИСАНИЕ И КОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВ(71) Научно-исследовательскийный институт Нечерноземной э А.АВасильев Н. Н, Адьюванина, 1969, с, 17 - 19. ОЛУЧЕНИЯ ИММУНОСТИ Изобретение относится к области ветеринарной иммунологии, в частности к способам получения иммуномодулирующих препаратов.Цель изобретения -тивности иммуностимуляСпособ иллюстрируеразом.Прим ер 1. При Готовят водную фазу, при этом 2,5 мл антисептика АСД (фракция 2) разводят в 10 мл физиологического раствора, добавляют аскорбиновую кислоту до рН 6,0-7,5, стерилизуют фильтрованием, Затем готовят масляную Фазу - к 30 лл вазелинового масла добавляют 8 г ланолина, смесь автоклавируют при 0,5 атм в течение 30 мин. В масляную Фазу вводят водную фазу. сл 1 есь эмульгируют энергичным встряхиванием, Готовый препарат представляет собой стойкую светло-желтую эмульсию.(57) Использтеринарнойиммуностимизобретениятивности импользуютантисептик Анеральноепредварителсептика АСДрН 6,0-7,5,разогреванигатора с пообеих фаэ. 1 уют изобретение в облиммунологии. для поулирующего средствасостоит в повышениимуностимулятора. При эв качестве ингредСД, аскорбиновую кислмасло и эмульгатор,ьно готовят водную фази аскорбиновой кислоа затем масляную Фазуя минерального масласледующим эмульгиротабл. П р и м е р 2. Определение иммуностимулирующей активности препарата с рН 6,.5 водной фазы.Определяли уровень Т-лимфоцитов в крови 2-3-месячных телят до и после обработки их иммуностимулятором, получен- у ным по примеру 1, Лимфоциты выделяли в градиенте плотности фиколлверографина, отмывали, доводили до концентрации Р (2-3) х 10 на 1 мл затем к 0,2 мл взвеси ЬЗб лимфоцитов добавляли 0,2 мл 0,5-ной Дь взвеси эритроцитов барана, инкубировали, центрифугировали, для Фиксации образовавшихся розеток добавляли 0,1 мл 30/-ного раствора глютарового альдегида. Через 20 мин фиксацию прекращали добавлением 5 мл холодной и дистиллированной воды. Надосадочную жидкость удаляли. осадок ресуспендировали в 0,2 мл воды, наносили на предметное стекло, высушивали, фиксировали и окрашивали азур-П-зозином. В полученнол препарате подсчитываКолизанпо оличесто животных вгруппе оне онеч. АзрозольноеПодкожноеКонтроль,О. 4+5 2 9+7,2 10 21,3+5,7 20,8+ 12+ Составитель М. БелоусоваТехред М,Моргентал КорректорС; Пека дкэз 3133 ВНИИПИ Гос Тираж Подписноевенного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СС 113035, Москва, Ж, Раушская наб., 4/5 оизводственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул.Гагарина, 10 ли количество розеткообразующих лимфоцитов в процентах,Результаты исследований приведены вта ице.Для определения количества лизоцима 5в крови телят применяли турбидиметрический метод. В качестве субстрата использовали ацетоновый порошок. К 1,5 мл взвесисубстрата (10 мг в 20 мл) добавляли 1,5 млсыворотки крови, разведенной в 10 раз. 10Смесь инкубировали 30 мин при 37 С. Затем проводили спектрофотометрию суспензии при длине волны 540 нм, В качествеконтроля использовали такую же суспензию, но не инкубированную. Для определения содержания лизоцима находилиразницу экстинций опытной и контрольнойпроб, по которой на калибровочной кривойустанавливали количество лизоцима,Оценку функциональной активности 20нейтрофилов давали по реакции восстановления нитросинего тетразолия(НСТ-тест), Вдве лунки планшета вносили по 0,05 мл стабилизированной крови Затем в первую контрольную лунку добавляли 0,0025 мл 25 изотонического буфера, а во вторую, с исследуемой кровью, добавляли по 0,025 мл 0,1;6-ной взвеси зимозана. Затем в обе лупки добавляли по 0,025 мл раствора НСТ, перемешивали и инкубировали, готовили и окрашивали мазки, Учет реакции проводили на основании анализа нейтрофилов, содержащих темно-синие отложения формазана. Подсчитывали 100 нейтрофилов, результаты выражали в процентах,Формула изобретения Способ получения иммуностимулятора, включающий смешивание ингредиентов с различной гидрофобностью, о т л и ч э ющ и й с я тем. что, с целью повышения эффективности иммуностимулятора, в качестве ингредиентов используют антисептик АСД, аскорбиновую кислоту, минеральное масло и змульгатор, причем предварительно готовят водную фазу антисептика АСД и аскорбиновой кислоты при рН 6,0-7,5, а затем масляную фазу путем разогревания минерального масла и змульгатора с последующим змульгированием обсих фаз,