Способ определения сенсибилизации организма

ОЮЗ СОВЕТСКИХОЦИАЛИСТИЧЕСКИХЕСПУБЛИК 9) ПМ 33 53 ИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ кии институт и рилова,алакин, Савтво СССР53, 1988,ЕНИЯ СЕНСИБИя к медицине, а может быть исГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМПРИ ГКНТ СССР АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛ ЬСТВУ(54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЛИЗАЦИИ ОРГАНИЗМА(57) Изобретение относиименно к иммунологии,Изобретение относится к медицине, аименно к иммунологии, и может быть использовано при обследовании различныхгрупп населения, в частности при массовыхпрофилактических осмотрах.Цель изобретения - повышение точности исследования,Способ осуществляют следующим образом,Готовят гелевые блоки из 1-20(,-ногораствора агара или агарозы с добавлениемсреды 199 и сыворотки крови крупного ро"гатого скота. Толщина слоя геля 1 - 3 мм, Внем проделывают лунки диаметром 2-5 мм.Сыворотку крови обследуемого человекапрогревают 30 - 40 мин при 56 - 58 С, послечего она может храниться в течение длительного времени. Из гепаринизированнойкрови морских свинок выделяют лейковзвесь, трижды отмывают клетки питательнойсредой, По 0,05-0,1 мл лейковэвеси морских свинок помещают в две пробирки. В пользовано при обследовании различных групп населения, в частности при массовых профилактических осмотрах. Целью изобретения является повышение точности исследования. Поставленная цель достигается тем, что сыворотку крови человека инкубируют с лейкоцитами морской свинки, определяют индекс миграции лейкоцитов в РТМЛ и при его значениях в пределах 0,8 - 1,0 диагносцируют отсутствие сенсибилизации, 0,5-0,79 - наличие умеренной сенсибилизации, менее 0,5 - наличие сильной сенсибилизации организма. одну добавляют исследуемую сыворотку крови человека, в другую (контроль) - равный объем среды 199. По 2 - 5 мкл из каждой пробирки помещают в лунки гелевого блока. Затем эти блоки во влажной камере инкубируют при 37 С в течение 18 - 24 ч, после чего лейкоциты фиксируют, удаляют гель, окрашивают зоны миграции лейкоцитов и определяют индекс миграции (ИМ) по формулеИМ=,Якгде Зс, - площадь зоны миграции лейкоцитов в опыте;Як - площадь зоны миграции лейкоцитов в контроле,При величине ИМ в пределах 0,8 - 1,0 констатируют отсутствие сенсибилизации, при величине ИМ в пределах 0,5 - 0,79 диагносцируют наличие умеренной сенсибилизации и при величине менее 0,5 - наличие сильной сенсибилизации,П р и м е р 1. Беременная Б 25 лет, история родов М. 243, поступила в клинику с диагнозом: беременность- 37 - 38 недель, сужение тазастепени, нефропатиястепени. В момент поступления АД=130/90, 140/80 (исходное АД до поступления беременности 1 10/70, 120/80), постозность нижних конечностей, белок в моче в виде следов, Результатыисследования в РТМЛ сенсибилизации к плэцентарному антигену - 0,88, почечному - 0,75, печеночному - 0,81.При исследовании сыворотки крови предлагаемым способом ИМ=0,70, что указывает на наличие умеренной сенсибилизации организма.П р и м е р 2. Беременная 3., 33-х лет, история родов М 126, поступила в клинику с диагнозом: беременность- 36-37 недель, нефропатиястепени, возрастная первородящая, В момент поступления АД=170/110, 180/100. Выраженные отеки нижних конечностей и передней брюшной стенки, белок в моче 1,15 г/л, Резульгаты исследования в РТМЛ сенсибилизации к плацентарному антигену - 0,65, почечному - 0,49, печеночному - 0,49.При исследовании сыворотки крови предлагаемым способом ИМ=0,27, что позволяет диагносцировать наличие сильной сенсибилизэции организма.П р и м е р 3. Обследование во время профилактического осмотра сотрудницы КБ завода "Красный химик" С-ой, 27 лет, хроническими заболеваниями не страдает, жалоб нет, диагноз; здорова.При исследовании сыворотки крови предлагаемым способом ИМ=0,87, что указывает на отсутствие сенсибилизации организма.Точность результатов исследований в предлагаемом способе определяли в серии опытов. Объектом исследования были сыворотки крови женщин с нормальным течением беременности и беременных с токсикозом-степени второй половины беременности, поступивших в родильный дом М 1 г,Донецка, а также сыворотки кройи сотрудников Ленинградского завода "Красный химик", подвергавшихся воздействию профессиональных вредностей, в частности связанных с производством марганца и кобальта (стаж работы более 5 лет), и ИТР этого предприятияне связанных с производственными вредностями, не состоящих на диспансерном учете по поводу какого-либо заболевания и на момент обследования клинически здоровых (контрольная группа).При нормальном течении беременности (отсутствие клиники осложнений) у 11 женщин (73,3) с помощью предлагаемого спо 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 соба выявлялась умеренная сенсибилизация (ИМ=0,5-0,8) и только у четырех беременных (26,7 А) определялась сильная сенсибилизация(ИМ0,5). При исследовании специфической сенсибилизации у женщин с ИМ0,5 к антигенам плаценты, печени и почек в РТМЛ отмечалась сенсибилизация к исследуемым антигенам (ИМ0,8),Полученные результаты позволяют сделать вывод о возможности использования предлагаемого способа для диагностики осложнений беременности доклинической стадии. Умеренная сенсибилизация у женщин с нормальным течением беременности, выявляемая предлагаемым способом, объясняется тем, что беременность сопровождается сенсибилизацией организма женщины изоантигенами плода.У беременных с клиникой токсикоза сильная сенсибилизация определялась. в 72,7 случаев, а у остальных женщин - в пределах умеренной. При исследовании в РТМЛ сенсибилизация к антигенам плаценты, печени и почек у всех этих женщин отмечалась умеренная и сильная сенсибилизация к исследуемым антигенам,Обследование рабочих, связанных с профессиональными вредностями, позволило выявить сильную степень сенсибилизации организма у 56;4, и умеренную 44 о рабочих, связанных с производством марганца, среди рабочих, связанных с производством кобальта, сильная сенсибилизация организма выявлена в 3,7случаев, умеренная в 7,4 .При исследовании контрольной группы сенсибилизация не выявлялась ни в одном случае, что свидетельствует о специфичности метода (до 100;4) и его пригодности для определения сенсибилизации одновременно к нескольким антигенам или неизвестному (неизвестным) антигенам,При использовании предлагаемого способа по сравнению с прототипом повышается точность исследований, в частности если способ-прототип позволяет выявлять сенсибилизацию лишь в 85 случаев, то предлагаемый способ позволяет выявлять сенсибилизированных лиц с точностью до 100 , кроме того, предлагаемый способ позволяет не только выявлять сенсибилизацию организма, но и определять уровень сенсибилизации (умеренная, сильная), что значительно расширяет возможность его использования в практике.Формула изобретения Способ определения сенсибилизации организма, включающий забор крови, выделение сыворотки с последующей ее инкубацией, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что, с целью1723523 Составитель В,ЛитовченкоТехред М.Моргентал Корректор Н.Король Редактор Н,Шитев Заказ 1062 Тираж Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж, Раушская наб 4/5 Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул,Гагарина, 101 повышения точности способа, сыворотку ин кубируют с лейкоцитами морской свинки, ставят реакцию торможения миграции лейкоцитов, вычисляют индекс миграции и при его значении 0,5 - 0,79 определяют умеренную сенсибилизацию организма, при значении ниже 0,5 - выраженную сенсибилизацию.5