Способ определения метакриловой кислоты в биологическом материале

,Ы 51)5 6 01 й 33/4 ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕН ВИДЕТЕЛЬСТВУ К АВТОРСКО исследователь- и профзаболеТихомировиена и санитаГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМПРИ ГКНТ СССР(71) Нижегородский научноский институт гигиены трудаваний(54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ МЕТАКРИЛОВОЙ КИСЛОТЫ В БИОЛОГИЧЕСКОМ МАТЕРИАЛЕ(57) Изобретение относится к.медицине, а именно к способам количественного опре- деления метакриловой кислоты в тканях животных при проведении токсикологических исследований, Целью изобретения является Изобретение относится к медицине, а:именно к способам количественного определения метакриловой кислоты в тканях животных при проведении токсикологическихисследований,Целью изобретения является повышение точности определения метакриловойкислоты в тканях животных и сокращение ,продолжительности анализа.Способ осуществляется следующим образом. Навеска анализируемой ткани, например, печени, легкого, мышечной ткани,гомогенизируется в присутствии 0,1 И раствора серной кислоты в соотношении 1:1,Такое соотношение пробы и раствора является оптимальным, так как при меньшемсоотношении консистенция пробы является повышение точности определения метакриловой кислоты в тканях животных и сокращение продолжительности анализа.Поставленная цель достигается тем, что метакриловую кислоту в тканях животных определяют путем газохраматографического анализа, причем предварительно навеску ткани.гомогенизируют в присутствии 0,1 й раствора серной кислоты в соотношении 1:1, после чего осуществляют ввод пробы в газовый хроматограф посредством металлической трубки, состоящей из двух частей, одна из которых служит для ввода пробы, а другая постоянно находится в испарителе.Изобретение может быть использовано для количественного определения метакриловой кислоты в тканях животных при прове дении токсикологического эксперимента. 2 . ил 2 табл. недостаточно подвижной и неудобной для дальнейшего анализа, при большем соотношении - увеличение чувствительности мето- Я да необходимо из-за увеличения ф разведения, что также является нежелательным, После гомогенизации проба вводится ф в газовый хроматограф при помощи устройства, состоящего из двух частей.На фиг. 1 представлена нижняя частьустройства - пята; на фиг, 2 - трубка,Пята имеет конусное отверстие 1, в которое вставляется трубка, заканчивающаяся корпусом 2. В верхней части трубка имеет небольшое отверстие 3 для ввода газа-носителя. Пята находится в испарителе.постоянно, а трубка с пробой анализируемой ткани вставляется в пяту во время анализа. Длина10 20 30 35 трубки с пятой в собранном виде равна длине испарителя храматографа. Обе части во время анализа соединчются герметично, В трубку помещают кусочек стекловолокна или обычной ваты, затем трубка прокаливается до выхода нулевой линии и взвешивается беэ навески и с навеской гомогената. По разности масс устанавливается точный вес анализируемой пробы ткани. Трубка вводится в испаритель хроматографа, где происходит термодесорбция летучих органических веществ, содеркащихся в пробе, в там числе и метакриловай кислоты.Количественное определение проводится методом абсолютной градуировки прибора по водным растворам метакриловой кислоты в пределах 0,01 - 1,00 мкг в 10 мл раствора, Чувствительность метода при навеске анализируемой ткани 10 мг - 0,001 мг/г. Расчет содержания МАК проводится по формуле С = ,мг/кг2где С - концентрация МАК;а - количество МАК, найденное по графику, мкг;в - навеска образца, введенного в испаритель,мг;2 - коэффициент, учитывающий степень разведения при гомогенизации,Сущность изобретения заключается в совокупности последовательных операций путем использования реактивов в определенном соотношении и конкретного приспособления. Все перечисленные признаки существенны; именно использование металлической трубки, состоящей иэ двух частей, дает возможность после минимальной обработки пробы ткани (гомогенизация в присутствии 0,1 И серной кислоты) вводить ее в газовый хроматограф, что повышает точность анализа и значительно сокращает его продолжительность.П р и м е р 1. Иавеску печени контрольной крысы 1,6 г гамогенизировали в присутствии 1,6 мл 0,1 Й серной кислоты, затем в гамогенат вводили 160 .мкг метакрилавой кислоты в аиде водного раствора, концентрация кислоты в ткани 0,05 мкг/мг. Определение метакриловой кислоты в гомогенате проводилось па предлагаемому способу, Проанализированы навески гомогената 10,5 мг, 11,4 мг и 13,0 мг - найдено соответственна 0,47 мкг, 0,52 мкг и 0,65 мкг кислоты, Таким образом обнаружена 93,5 ф от введенного количества кислоты,П р и м е р 2. В ходе эксперимента крысы подвергались воздействию метилметакрилата, который подавался в эатравочные камеры непрерывно в течение 5 ч в концентрациях 360-450 мг/мз, При попадании в организм метилметакрилат разлагается на метанол и метакриловую кислоту, После затравки одна из крыс забивалась и в ее печени определялось содержание метакриловой кислоты по укаэанному способу, С этой целью 2,4 г печени гомогенизируют с 2,4 мл 0,1 И серной кислоты, вводят пробу в газовый хроматограф при помощи описанного устройства и проводят десорбцию в испарителе хроматаграфа, Условия анализа: Прибор - хроматограф Цветс пламенна-ион изационным детектором, колонка стеклянная 1 м; заполнена насадкой 100 ПЭГА на целите, Тисп. 200 О, Ткол.= 120, Чг-н=35 мл/мин, Чн 2= 40 мл/мин,Чвозд=400 мл/мин, Дляпредотвращения адсорбции МАК в поток газа-носителя вводйли пары муравьиной кислоты. Время удерживания МАК 3 мин. По градуировочному графику найдено, чта в пробе содержится 0,022 мкг МАК следовательно, содержание МАК в печени 0,0046 мг/г,Параллельно проводят определение метакрилавай кислоты в печени по прототипу, 2,4 г печени растирают, заливают 10 мл серного эфира, выдерживают 20 мин, перемешивая, операцию. повторяют трижды, Серный эфир отделяют от печени фильтрованием, экстракты объединяют, выпаривают эфир, к сухому остатку добавляют 05 мл дистиллированной воды и анализируют 10 мкл полученного раствора в тех же условиях, при этом метакриловая кислота была определена лишь качественно.Таким образом, преимущества предлагаемого изобретения заключаются в там, чта данный способ позволяет определять количественное содержание ММА в тканях животных, что является более точным методом, Использование данного способа сокращает время исследований.Сравнение проводили в моделируемых условиях. В извлеченную печень контрольной крысы вводили метакриловую кислоту в количестве 5 мкг/мг. Далее проводили определение по заявляемому способу и прототипу. Результаты анализов представлены в табл. 1. Из представленных результатов видно, что точность заявляемого способа намного выше точности способа, взятога в качестве прототипа. Время выполнения одного анализа в заявляемом способе, включая время обработки пробы, 15 мин. Время выполнения одного анализа по способу, взятому з качестве прототипа. более 1 ч,Формул а и зоб рете н и я Способ определения метакриловой кислоты в биологическом материале путем хро1712874 Таблица 1 Т а 2 ствительность, мг/ Точност Соотношение вес ткани.вес 0,1 0,001 0,002 0,003:1 ;2 5,03 1.3 Составитель В;МитюшТехред М.Морге нтал Редактор В.Трубчен оррект орол Заказ 533 Тираж Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СС 113035, Москва, Ж, Раушская наб;, 4/5 Производственно-издательский комбинат "Патент", г, Ужгород, ул.Гагарина, 10 матографического анализа, о т л и ч а ющ и й с я тем, что, с целью повышения точности и ускорения способа за счет исключения предварительной обработки пробы, пробу гомогенизируют в присутствии 5 0,1 Й раствора серной кислоты в соотношении 1:1, а ввод пробы в газовый хроматограф осуществляют с помощью разъемного устройства, состоящего из 2 металлических трубок, одна из которых постоянно находится в испарителе хроматографа, а другая служит для ввода пробы.