Питательная среда для выявления sтарнylососсus aureus

(19) С 1 0 1)5 АНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ МУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ ПИ АВТО Изобрете менно к мик ользовано дл сследуемом цгецз. ГОСУДАРСТВЕННЫИ КОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМПРИ ГКНТ СССР(71) Иркутский государственный медицинский институт и Иркутский институт органической химии СО АН СССР(54) ПИТАТЕЛЬНАЯ СРЕДА ДЛЯ ВЫЯВЛЕНИЯ ЯТАРНУ ОСОССОЯ АОВЕОЯ(57) Изобретение относится к области медицины, в частности к микробиологии, и касаие относится к медицине,обиологии, и может быть ися ускоренного выявленияматериале Я 1 арЬуососс 0 Широко применяется для выявления названных микроорганизмов питательная среда "кровяной агар", Она содержит двухпроцентный мясопептонный стерильный агар, в который добавлено 5-10% дефибринированной стерильно взятой крови лошади, кролика или барана -1).Однако при посеве материала от боль- наго на данную среду выделенные культуры стафилококков требуют проведения дополнительного исследования, чтобы их можно было отнести к виду 31 аруососсцз ацгеиз. ется выявления ЯтарЬуососсвз ацгеиз. Цель изобретения - ускорение выявления Ятар 1 уососс 11 з а 11 геоз в исследуемом материале. К 900 мл расплавленного мясопептонного агара (МПА) добавляют 0,001 - 0,0001 г ВМ - 3 - 86 и 70,0 - 75,0 г МаС, рН полученного солевого агара доводят до 7,2 - 7,4. Затем в солевой агар вносят водный раствор ДНК, для чего 0,25 - 0,5 г ДНК растворяют в 7 - 10 мл дсиированной воды. После стерилизации среды перед разливом в чашки Петри в среду добавляют 0,2 - 0,3 г СаС 2 и 50 - 100 г желточной взвеси. При посеве 31 ар)уососсоз а 1)гецз на среду видимый рост культуры отмечается через 6 ч в средах без препарата - через 9 ч; ДНК-ная и лецитовителазная активность - через 9 ч (в средах без препарата - 24-48 ч),Наиболее близкой в предлагаемой среде, позволяющей культивировать стафилококки, является питательная среда Чистовича, содержащая мясопептонный агар (рН 7,2 - 7,4), 10% поваренной соли и 20% стерильной желточной взвеси (1 желток куриного яйца на 150 - 200 мл стерильного физиологического раствора(2.Через 48 ч после посева исследуемого материала на данную среду отмечают наличие лецитовителлазной активности исследуемой культуры стафилококков (появление мутной зоны и радужных венчиков вокруг выросших колоний),К недостаткам известной среды относится медленный рост стафилококков и невозможность одновременного выявления других факторов патогенности. Так, послевыявления лецитовителлазной активности исследуемой культуры стафилококков на среде Чистовича необходима дальнейшая идентификация стафилококков, например определение ДНК-ной активности на среде, содержащей ДНК, Следовательно, удлиняется время проведения анализов, увеличивается расход питательных сред и трудоемкость исследования возрастает,Целью изобретения является ускорение выявления ЗтарЬу 1 ососсцз ацгецз в исследуемом материале,ИспользуеМая в качестве компонента диагностической среды 1,3-дигидро кси-(4-н ит рофе н ил) и ро и ил- аммониевая соль 4-хлор-фенилтиоуксусной кислоты (ВМ - 3 - 86) формулы 4- ССбН 4 БСН 2 СООЙНЗСН(СНОН)СН 20 НСбН 4 Й 02 (вещество ВМ - 3 - 86) - первые синтезированное соединение, водорастворимое, без запаха, слегка окрашенное, дешевое и доступное,Соединение получают взаимодействием соответствующей кислоты с алканоламином в среде низших спиртов (этанол, метанол, пропанол) при 70 - 85 С и соотношении реагентов 1;1 в течение 0,1 - 0,5 ч по схеме4-СС 6 Н 4 ЯСН 2 СООН+ .+ Н 2 СН (СН 20 Н(СНОН (СбН 4 Й 02 4) 4-С 1 С 6 Н 4 ЯСН 2 СОО хх ЙНЗСН(СН 20 Н)СНОН (С 6 Н 4 Й 02 - 4) Питательную среду готовят следующим образом.К 900 мл расплавленного мясопептонного агара (МПА) добавляют 0,0001 г ВМ - 3 - 86 и 70 г йаС 1, учитывая, что при приготовлении МПА добавляют 5 г йаС на 1 л МПА, рН полученного солевого агара доводят до 7,2 - 7,4. Затем в солевой агар вносят водный раствор ДНК, Для этого 0,25 - 0,5 г ДНК растворяют в 7 - 10 мл дистиллированной воды, Для лучшего растворения ДНК в ее водный раствор добавляют раствор 3-5 капель 10 ойаОН, Стерилизацию среды, содержащей солевой агар и ДНК, проводят текучим паром в течение 30 мин. Перед розливом в чашки Петри в среду добавляют 0,2 - 0,3 г Са С 2 и 50-100 г желточной взвеси, Желточную взвесь готовят из свежего куриного яйца известным путем (в стерильных условиях отделяют желток и помещают в емкость с 150 - 200 мл физиологического раствора), Емкость энергично встряхивают в течение нескольких минут, П р и м е р 1, Готовят питательную средудля выявления стафилококков следующего состава, г/л:ДНК 0,25 5 Са С 2 0,2йаС 70,0 1,3-Ди гидро кси-(4-н итрофен)-пропил-аммониевая соль 4-хлор-фенил 10 тиоуксусной кислоты 0,0001Желточная взвесь 50 МПА До 1 л При посеве Ятарйуососсцз ацгецз наданный вариант среды видимый рост куль туры отмечается через 6 ч, ДНК-ная и лецитовителазная активность - через 9 ч.П р и м е р 2. Готовят питательную средудля выявления стафилококков следующего состава, г/л:20 ДНКСаС 2йаС1,3-Ди гидро кси-(4-н итрофенил)-пропил-аммоние 25 вая соль 4-хлор-фенилтиоуксусной кислоты 0,0015 Желточная взвесь 75 МПА До 1 л, При посеве Ятарбуососсцз ацгецз на 30 данный вариант среды видимый рост культуры отмечается через 6 ч, ДНК-ная и лецитовителазная активность - через 9 ч.П р и м е р 3, Готовят питательную средудля выявления стафилококка следующего 35. состава, г/л:ДНК 0,5 СаС 12 0,3 йаС 75,0 1,3-Дигидрокси-(4-нитро 40 фенил).пропил-аммониевая соль 4-хлор-фенилтиоуксусной кислоты 0,001 Желточная взвесь 100 МПА До 1 л 45 При посеве ЗсарЬуососсцз ацгецз наданный вариант среды видимый рост культуры отмечался через 6 ч, ДНК-ная и лецитовителазная активность - через 9 ч,0,40.2572,5 50 Из полученных данных следует, что среда предлагаемого состава для идентификации 31 арЬу 1 ососсцз ацгецз обладает значительным преимуществом перед известными средами - средой Чистовича и Мор двиновой, а именно обеспечивает быстрое(в течение 9 ч вместо 48 ч) выявление стафилококков в исследуемом материале и, следовательно, позволяет ускорить время проведения анализов при одновременном снижении материальных затрат.1693060 Формула изобретения Составитель А,Завадская Редактор О.Юрковецкая Техред М.Моргентал Корректор. Э.ЛончаковэЗаказ 4052 Тираж Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж, Раушская наб 4/5 Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул.Гагарина, 101 Питательная среда для выявления Бтарйу 1 ососсоз ацгецз содержащая мясопептонный агар, хлористый натрий, жел точную взвесь, отл и ч а ю ща я ся тем. что, с целью ускорения выявления БтарЬуососсаз аигеоз в исследуемом материале, она дополнительно содержит ДНК, хлористый кальций и 1,3-дигидрокси-(4- 10 нитрофенил)пропил-аммониевую соль 4- хлорфенилтиоуксусной кислоты при следующем соотношении ингредиентов, г/л.Хлористый натрий 70-75 Желточная взвесь 50-100 ДНК 0,25 - 0,50 Хлористый кальций 0,2 - 0,3 1,3-Дигидрокси-(4-нитрофенил)пропил-аммониевая соль 4-хлорфенилтиоуксуснойкислотыМясопептонный агар