Способ определения клофелина

СОЮЗ СОВЕТСКИХСОЦИАЛИСТИЧЕСКИХРЕСПУБЛИК 1)5 0 01 М 33/48 ТЕН ОПИСАН МУ СВИДЕТЕЛЬСТ АВТ ФЕЛИЛЕНИ ударственныи меНаримановалиев и Р.Н,Мамепригондации и рственны СР, 1987,пас,21,тность исследуемого мг, в иссле 1 0 ГОСУДАР СТВ Е ННЫ Й КОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯПРИ ГКНТ СССР(71) Азербайджанский госдицинский институт им. Н(56) Методические рекометовлению и анализу лекаратов, - Баку, МЗ Азерб.С Изобретение относится к медицине, в частности к биохимии, и может быть применено при судебно-экспертных исследовэниЦель изобретения - возможность осуществления способа при определении кло-. фелина в биологической ткани.Способ осуществляют следующим образом.К 100 г измельченного биологического материала прибавляют О,б мг клофелина, . перемешивают и через 24 ч извлекают клофелин тРоекРатным настаиванием 707 п - ным этанолом по 100 мл. Этанольные извлечения объединяют, фильтруют, добавляют 2 мл 0,5 М раствора триродано-кобальтата аммония, реэкстрагируют продукт реакции 10 мл хлороформа или 10 мл ацетона и проводят фотоэлектроколориметрические определения,Расчет содержания клофелина определяют по формуле пв.Ы 2 по 1 689853 А 1(57) Изобретение относится к точнее к биохимии, может быть при судебно-экспертных исс Цель - воэможность осуществл ба при определении клофелин ческой ткани. Пробу обр этанолом, в качестве окрэшива катора используют раствор т бальтат аммония, а перед ф проводят реэкстрагирование хл или ацетоном. 3 табл. медицине, применено ледованиях, ения спосоа в биологиабатывают ющего инди- рироданокоотометрией ороформом где Ох - оптическая плораствора; С:00 - оптическая плотность стандартного раствора;э - содержание клофелина, мг, в стандартном растворе;Ь - навеска клофелина, дуе- О мом растворе,П р и м е р 1, Эксперименты 1 и чтго, О Использовались различные органы под- О опытных животных (печень, почки, желудок, ОО кишечник), Во время экспериментов приме-, (Я няют известный способ "добавок", т,е. берут (,) тщательно измельченные органы в количестве по 100 г, прибавляют 4 измельченных таблеток клофелина по 0,00015 (т.е. доза фф 0,6 мг клофелина), перемешивают и оставляювао ют при комнатной температуре (20 С) в течение 1 сут, Затем клофелин извлекают троекратным настаиванием 70-ным этаолом по 100 мл. Объединив этанольныеэвлечения, их центрифугируют, фильтруютупаривают до сухого остатка, прибавляют0 мл 96 пП-ного этанола и 2 0 мл 0 5 Мено кл на, мг чн 0 О 70,5 раствора триродано-кобальтата аммония (при наличии клофелина образуется изумрудно-синего цвета комплексное соединение, которое хорошо экстрагируется хлороформом или ацетоном), Окрашенные хлороформные или ацетоновые фракции подвергают фотоэлектроколориметрированию.Измеряют оптическую плотность при длине волны около 570 нм в кювете толщиной 3 мм. В качестве раствора сравнения используют 0,5;-ный стандартный раствор клофелина (т.е. точную навеску 0,5000 г клофелина (ФС-1776-83), растворяют в воде в мерной колбе с емкостью 100 мл, В 1 мл стандартного раствора содержится 0,005 г клофелина, Раствор устойчив в течение 1 мес при хранении склянок с . притертой пробкой в защищенном от света месте, Результаты определения клофелина в пече и приведены в табл.1.Описанный способ позволяет определить в среднем 60,25+0,22 ф клофелина при содержании 10 мг в 100 г печени.П р и м е р 2. Используя вышеописанный способ выделения клофелина иэ биоматериала, провели ряд экспериментов с различными объектами биологического происхождения, в частности желудок и кишечник с содержимыми, почки, а при извлечении из крови и мочи использовались иным способом (т.е, из них непосредственно выделяли клофелин 14 Н 4 СоСЙЯ)з). Результаты проведенных исследованийприведены в табл,2.П р и м е р 3. Зксперименты в опытах ичЬо,5 Берут подопытных животных (кроликивесом в 2,5-3 кг породы Шиншилла), которым парэнтерально вводят клофелин в различных дозировках, мг; О,б; 2; 5.5; 10. Послезатравки животных определяют кпофелин в10 различных биообьектах параллельно проводят контрольные опыты),Результаты опытов приведены в табл.3.Применение способа в медицинскойпрактике позволит определять содержание15 клофелина в различных объектах биологического происхождения как и чЫго, так и 3 пчЬо и облегчит обеспечить возможнас"ь применения способа при проведении судебномедицинских экспертиз.20 Формула изобретенияСпособ определения клофелина путемвзаимодействия пробы с окрашивающиминдикатором с последующей фотометрией25 продукта, о т л и ч а ю щ и й,с я тем, что, сцелью воэможности осуществления способа при определении клофелина в биологической ткани, пробу обрабатывают этанолом,в качестве окрашивающего индикатора ис 30 пользуют раствор трироданокобальтата аммония, а перед фотометрией проводятрезкстрагирование хлороформом или ацетоном,1689853 Таблица 3 Составитель Н,ВэлееваТехред М. Моргентал Корректор О, Кравцова Редактор Е.Папп Производственно-издательский комбинат "Патент", г, Ужгород, ул,Гагарина, 101 Заказ 3810 Тираж Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж, Раушская наб., 4/5