Способ определения азота, окисленного в растении

(9) ( ) 505 А 01 б 7/О ТЕНИ ОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИПРИ ГКНТ СССР ПИСАНИЕ ИЗОБ АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВ(71) Московская сельскохозяйственная академия им, К, А. Тимирязева(56) Ягодин Б. А, и Верниченко И. В. Возможность окисления аммонийного азота в тканях растений до нитратов (опыты с Й).15 Известия АН СССР. Сер. "Биологическая", 1984, М 2, с. 268-272.(57) Изобретение относится к сельскому хозяйству, в частности к агрохимии, к способам определения форм азота в растениях. Изобретение относится к сельскому хозяйству, в частности к агрохимии, к способам определения форм азота в растениях.Целью изобретения является повышение точности определения.П р и м е р. Растения картофеля высаживают в стерильные пробирки с 5 см стандартной среды Мурас иге - Скуга, содержащей 4 мг азота в форме (Йн 4)304 с обогащением й 96,3 ат. и культивируют в стерильных условиях в течение 2 мес. Затем отбирают пробу свежих листьев картофеля массой 0,5 г, растирают в фарфоровой ступке, переносят в стеклянный стакан, емкостью 200 см с 40 см дистиллированной воды и выдерживают на паровой бане в течение 10 мин, после чего в стакан вводят раствор С)ЯО 4 и осторожно, при Целью изобретения является повышение точности определения. Определение окисленного азота осуществляют путем отбора пробы растения, культивируемого в стерильных условиях на питательной среде. соержащей восстановленный азот меченый 1ч, гомогениэации пробы, экстракции водорастворимых соединений, осаждения белка, фильтрации, после чего в пробу добавляют окись магния и кипятят. Далее пробу последовательно обрабатывают ионообменными смолами КУ - 2-4 и ДС-За и восстанавливают окисленный азот путем паровой дистилляции аммиака после введения окиси магния и сплава Деварда. Способ по изобретению позволяет повысить точность определения окисленного азота более чем на 3 0,: 1 табл. тщательном перемешивании - раствор йаОН, образовавшийся осадок отфильтровывают, В полученном экстракте определяют содержание нитратов потенциометрическим методом с помощью ионоселективного электрода и ономера. Затем в фильтрат вводят 0,2 г М 90 и кипятят в течение 5 мин, упаривают по 5 см, переносят в центрифужные пробирки емкостью 10 см и центрифугируют со скоростью 5000 об/мин в течение 5 мин. Центрифугат наносят на колонку, заполненную смолой КУ - 2 - 4, последовательно соединенной с колонкой с ДС - За и фильтруют со скоростью 0,5 см /мин до объема фильтрата 30 смз,Обработанный экстракт переносят в реакционную колбу кварцевого аппарата "полумикрокьельдаль", в которую после 1644811довательно вводят 0,2 г окиси магния и 0,2г сплава Деварда;и сразу проводят паровуюдистилляцию со скоростью отгоне 7,5 см,эОпределяют изотопный состав полученногоаммиака на масс-спектрометре, после чегорасчетным путем с учетом ранее определенного содержания нитратов в растении определяют количество окисленного в растенияхазота,Результаты испытаний способа по изобретению приведены е таблице,Для того, чтобы рассчитать точность определения окисленного азота в 16,1 г сухихлистьев картофеля (те. на 1000 растений),использовали слвдующив данные; содержание нитратов - ,72; избыток обогащения15 Й сернокислого аммония, введенного впитательную среду в начале культивирования растений картофеля - 95,2 ат.ф, избыток обогащеиия Н нитрвтного азотарастений, определенного в конце вегетациипредлагаемым способом - 0.661 ат.ф, и впрототипе - 0,096 ат, , Далее рассчитывали следующее;общее количество нитратного азота 5 количество азота, окисленного в растениях согласно предлагаемому способу95,2- 185,8 (мкг/1000 растений);10точность известного способа (принимаяточность предлагаемого способа за 100) 185,8 100 292,4Как видно из приведенного расчета, прииспользовании способа определения окисленного в растении азота согласно изобре тению повышается точность определенияболее чем на 37. 25 Способ определения азота, окисленного в растении, включающий отбор пробырастения, культивируемого в стерильных условиях на питательной среде, содержащейвосстановленный азот, меченый И, гомо 30 генизацию пробы, зкстракцию водорастворимых соединений, осаждение белке,фильтрацию, восстановление азота. окисленного в растении, и масс-спектрометрический анализ аммиака на содержение И,а35 о т л и ч а ю щ и й с я тем, что, с цельюповышения точности определения, послефильтрации в пробу вводят окись магния,кипятят пробу и обрабатывают последовательно ионообменными смолами КУ- и ДС 40 За, а восстановление азота, окисленного врастении; осуществляют путем введения впробу окиси магния и сплава Деварда и перовой дистилляции аммиака,16,1 1,72 10002 Е100где 1000 - коэффициент перевода граммов в милиграммы;количество избыточного 5 И; содержащегося в нитратах согласно изному способу290,0 0,096 1000100278,4 (мкг/1000 растений)количество азота, окисленного в растениях согласно известному способу- 292,4 (мкг(1000 растений);95,2количество избыточного И, содержащегося в нитратах согласно предлагаемому способу 290,0 0,061 1000 1001Оз аР СЩ Яа о,остЕ О хО аО,Ящ Х ФХРс 3 Ф вй . С Ч СО 00 СЯвовО О- ООО СМ фФэ о Фоа О -О О 3О .Сф, Ое- С аСО СЧ СЧ с ОС О СЧО ОО С Ф СООО ОСО В Ф 3 й Сб О О О а Бцр Х д х Р .- сЛ 1644811