Способ определения азота, окисленного в растении

)5 А 01 6 7/00 ОМИТЕТОТКР ЫТИ ГОСУДАРСТВЕННЫЙПО ИЗОБРЕТЕНИЯМПРИ ГКНТ СССР(72) (53) (56) нкоИ. В. В ного азота в (опыты Биологич зможв ткас 1 Ъ) ская",Т(57) Изобзяйству,зовано ирастении ельско быть и орм эз являет му хо- польота в ся поК АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВ. В, Верниченко631.811 1(088.8)Ягодин Б. А. и Верниченость окисления аммонийнях растений до нитратоИзвестия АН СССР. - Сер,1984 М 2, с. 268 - 272,СОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ НОГО В РАСТЕНИИ етение относится к с агрохимии и может ри определении ф Целью изобретения Изобретение относится к сельскому хозяйству, к агрохимии и может быть использовано при определении форм азота в растении.Целью изобретения является повышение точности определения.П р и м е р. Растения картофеля высаживают в стерильные пробирки с 5 см стандартной среды Мурасиге-Скуга, содержащей 4 мг азота в Форме аммония сернокислого с обогащением И 96,3 ат.ф, и культивируют в стерильных условиях в течение 2 мес. Затем отбирают пробу свежих листьев картофеля массой 0,5 г., растирают в фарфоровой ступке, переносят в стеклянный стакан емкостью 300 см с 40 см дистиллированной воды и выдерживают на 644812 А 1 вышение точности определения, Определение азота. окисленного в растении, осуществляют путем отбора пробы растения, культивируемого на питательной среде. соержащей восстановленный азот, меченый 1й, гомогенизации пробы, экстракции водорастворимых соединений, осаждения белка, фильтрации. После этого в растительную пробу вводят окись магния и сернокислый алюминий, содержащий М природного обогащения, пробу кипятят. Затем проводят восстановление окисленного в растении азота до аммиака путем введения в пробу окиси магния и сплава Деварда и последующей паровой дистилляции, после чего проводят масс-спектуометрический анализ на содержащие г 4. Способ позволяет повысить точность определения окисленного в растении азота более чем на 430,. 1 табл,паровой бане в течение 10 мин, после чего в стакан вводят раствор меди сернокислой и осторожно, при тщательном перемешивании - раствор гидроокиси натрия, образующий осадок, отфильтровывают. В полученном экстракте определяют содержание нитратов потенциометрическим методом с помощью ионоселективного электрода и ионометра.В фильтрат последовательно вводят 0,2 г окиси магния и 2,0 см 100 Д-ного раствора3аммония сернокислого. Растительную пробу осторожно перемешивают и оставляют нач, затем кипятят в течение 5 мин в конической колбе с воронкой и упаривают до 10 см на водяной бане. Обработанный экстракт переносят в реакционную колбу1644812 167,5 100; 292,4 3кварцевого аппарата, "полумикрокьельдаль", в которую последовательно вводят 0,2 г окиси магния и 0,2 г сплава Деварда и сразу проводят паровую уистилляцию со скоростью отгона 7,5 см /мин до обьема 30 смз. Конденсат упариаают до 2-3 см .зОпределяют изотопный состав полученного аммиака на масс-спектрометре, после чего расчетным путем с учетом ранее определенного содержания нитратов в растении определяют количество окисленного в растении азота.Результаты испытания способа определения окисленного азота в соответствии с изобретением представлены в таблице,Как видна из таблицы, определенное визвестном способе количество азота, окис. ленное в растениях картофеля, заметно выше данного показателя этой же пробы в предлагаемом способе, ято является следствием завышения обогащения М азота15нитратов в известном способе. А так как такое завышение могло произойти только за счет загрязнения азота нитратов азотом восстановленных форм (исходное обогащение 95,6 ат. в сотни раз превышает обогащение окисленных форм), то отсюда следует, что повышение точности определения количества азота, окисленного в растениях, в данном спосое произошло путем снижения количества И из других, помимо окисленного азота, источников.Для того, чтобы рассчитать точность определения окисленного азота в 16,1 г сухих листьев картофеля (т. е. на 1000 растений), использовали следующие данные: содержание нитратов - 1,72 ; избыток обогащенияй сернокислого аммония, введенного впитательную среду вначале ультивирования растений картофеля - 95,2 ат.; избыток обогащения М нитратного азота растений, определенного а конце вегетации способом по изобретению - 0,055 ат. иизвестным - 0,036 ат. , Далее рассчитывали следующее:общее количество нитратного азота 161 172 1000 - 230,0 (мг/1000 расте 100ний),где 1000 - коэффициент перевода граммов в миллиграммы;количество избыточного й, содержа 15щегося в нитратах согласно известному способу; 290,0 0,096 1000 10020 количество азота, окисленного в растениях согласно предлагаемому способу= 167,5 (мкг/1000 растений);25точность известного способа(принимаяточность предлагаемого способа за 100 Таким образом, способ по изобретениюповышает точность определения солее чем .на 43.35 Формула изоб ретени яСпособ определения азота, окисленного в растении, включающий отбор пробырастения, культивируемого в стерильных условиях на питательной среде, содержащей40 восстановленный азот, меченый Н, гомо 1генизацию пробы, экстракцию водорастворимых соединений, осаждение белка,фильтрацию, восстановление азота, окисленного в растении, и масс-спектрометриче 45 ский анализ аммиака на содержание й,15о т л и ч а ю щ и й с я тем, что, с цельюповышения точности определения, послефильтрации в растительную пробу вводятокись магния и сернокислый аммоний, со 50 держащий 15 И природного обогащения, кипятят, а восстановление азота, окисленногов растении, осуществляется путем паровойдистилляции после введения в пробу окисимагния и сплава Деварда,55Ф Ф СЗС= 03 3 СЧ Р С 3 о с С 3 З 2 Х 1 о Ф ф Е щаМу ЗЯо ХЯФ Ф3фоф.Я с 3 О Ф 3 Ю3Х С,3у Фоа Ь3 Р 3ОЙ хЖа З а с 1 3 О о З о Ю о С 3 о с о О. З Х Ф 4 Е Зь. щ Х 3- э о Я Сь 3Щ оМЪ О ф о Щ О. 3. 3 щ 3 Х ФйЗ ЗОО х, х е з л М Х С 3 аф Э 3 оф 3о оо а Ф З Х 3 ю о Ю е оС 3 ьЗс 3 ЗОЗ ХоЗФ ЗСС ю ь ЭХЩх сОаь. а СОО " л Г Э 3 С ф 2 3 3 о О Щ О. Щ 1 О о О. С" ооХФсооз ос О.ФЗ Хф ССо За ФаРХЗ.хф 2Е Х1С 3 ССо зС 3 ао Фо оХ фсо3оЗсООз ао3. СЕ ьЗО. О цХО1- Э СО СО СЧС 3 О 3 ооо СЧ Ф 3 СО С" Оеов о -о 60 СОСО С 3 33СО Сф 3 СьЪ ф Сь 3 О ю 00 со осо ооо Ф О 3 (О СЧ С СьС Ф 3 Ф ооо СЧ ь 3. 00 Ф