Способ определения состояния организма больных с почечным аллотрансплантатом

(53) 615.375 (56) Иммун (54)СПОСО ОРГАН ИЗ Л ТРАНСП ьективен. относ м оце логенн ится к медицине, а нки иммунного стаой почкой для дифгностики кризов нных осложнений.является повышесчет дифференциаотторжения и ий у больных с поИзо именно туса болретени способ ьных с а циально ния и ин ью изоб ости спо строго екцио етения оба за криза ложен планта ствляю отто рже Цел ние точн ции оинфекционных о чечным аллотранСпособ осущ ом. сле м абра ированной крагой из локтевой й 199 в соотномл наслаивают ной плотностью 4-5 мл гепариниз на 20 ЕД/мл), взя ь разводят среда и в количестве 3 ографина с удель ви (гепэривены, Крошении 1:2на 2 мл ве ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИПРИ ГКНТ СССР(088.8)ология, 1985, гв 6. с. 89 - 91.Б ОПРЕДЕЛЕНИЯ СОСТОЯНИЯМА БОЛЬНЫХ С ПОЧЕЧНЫМ АЛО ЛАНТАТОМ(57) Изобретение относится к медицине, а именно к способам оценки иммунного статуса больных с аллогенной почкой для дифференциальной диагностики кризов отторжения и инфекционных осложнений. Целью изобретения является повышение точности диагностики за счет дифференциации реакции отторжения и инфекционных осложнений у больных с почечным эллотрансплантатом. Сущность способа заключается в том, что у больных после аллотрансплантации в периферической крови определяют соотношение между Т-хелперами и Т-супрессорами (Т,:Тс) по чувствительности к теофиллину. При соотношении Тх/Тс 2,5 и выше диагностируют криз отторжения, а при соотношении 0,5 и ниже - инфекционные осложения. Необходимость и важность предлагаемого способа обоснована тем, что с его помощью можно добиться повышения точности диагностических мероприятий, проводимых у реципиентов с почечным аллотрансплантатом. Кроме того, предлагаемый способ может быть использован как отправная точка при выборе терапевтических мероприятий и одновременно служить критерием их эффективности. Приведенные исследования не требуют дорогостоящих реактивов, способ прост в выполнении и 1,077, Последний готовят, прибавляя 20 мл 76 Я,-ного верографина к 86,6 мл дистиллированной воды. Пробы центрифугируют в течение 15 мин при 1000 об/мин, Лимфоциты, находящиеся в интерфазе, отбирают, трижды отмывают в среде 199 и доводят до концентрации 2 х 10 кл./мл, К 0,1 мл суспензии лимфоцитов добавляют 0,1 мл раствора теофиллина (ЗмМ), приготовленного на подогретой среде 199 ех еероге. Контролем служат пробы, в которые вместо теофиллина добавлена среда 199, Клетки инкубируют 1 ч при 37 С, затем дважды отмывают средой 199, центрифугируя при 1000 об/мин в течение 5 мин. С осадком лимфоцитов ставят реакцию спонтанного розеткообразования: в равных количествах (0,25 мл) смешиваютпии 20 и прииеиеиие антибаетериааеипи терапии и Фуспенэию лимфоцитов и 0,5-ного раствора эритроцитов барана, затем производят центрифугирование в течение 5 мин при 1000 об/мин и инкубируют пробы в течение 1 ч при 4 С. Учет розеткообразующих клеток осуществляют микроскопированием путем ,подсчета количества розеток на 200 лимфо;цитов. Розеткой считается лимфоцит, присоединивший 3 и более эритроцитов .;барана. Лимфоциты, образовавшиеся в при,сутствии теофиллина, называют теофилли:;нустойчивыми. Разницу между общим ; количеством розеток и теофиллинустойчи,: выми клетками составляют теофиллинчувст. вительные лимфоциты.На основании полученных данных при , обследовании 48 больных с почечным :; трансплантатом разработаны критерии со,. отношения Т-хелперы: Т-супрессоры Тх.Т), ; позволяющие дифференциально оценивать , развитие реакции отторжения и инфекционных осложнений. Так, у больных при удовлетворительной функции почечного трансплантата соотношение Тх.Тс равно 1,6+ 0,2, В посттрансплантационный период повышение такового до 2,5 и выше указывает на развитие криза отторжения, снижение до 0,5 и ниже- на возникновение инфекционных осложнений.Показатель, характеризующий соотношение между Т-хелперами и супрессорами, при дифференциальной диагностике реакции отторжения почечного трансплантата и инфекционных осложнений может служить прогностическим, критерием назначаемой терапии,П р и м е р 1. Больному Б-к 21,04.84 г,была осуществлена пересадка трупной почки, Через 3 сут после операции состояние больного ухудшилось. Наблюдалось снижение суточного диуреза, повышение температуры до 38 С. Содержание креатинина и мочевины составило 0,128 ммоль/л и 15,5 ммоль/л соответственно, Подозрение на острый криз отторжения. Соотношение Тх,Тс составляло 2,1. Больному был назначен курс массивной иммуносупрессивной терапии (метипред 0,5 г на 1 кг массы тела) в течение 3 дн. Состояние больного улучшилось. Через месяц после аллотрансплантации температура повысилась до 38 ОС, Уровни креатинина и мочевины 0,382 ммоль/л и 12,5 ммоль/л. В указанной ситуации возникла необходимость в дифференциальной диагностике криза отторжения и инфекционных осложнений, Показатель соотношения Тх;Тс соответствовал 0,4. В дальнейшем обнаружен пиелонефрит пересаженной почки. Снижение доз иммуносупрессантов 25 ЗО 35 40 45 50 55 привели к удовлетворительному самочувствию больного,Таким образом, предлагаемый способ позволяет определять развитие криза отторжения даже при наличии положительной динамики биохимических показателей, Учет соотношения Тх.Тс может быть критерием эффективности иммуносупрессивной тераП р и м е р 2, Больному Н-ий была осуществлена пересадка аллогенной почки 12:09.84 г, Состояние больного после операции было удовлетворительным. Соотношение Тх:Т составило 1,2. Через две недели после трансплантации снизился диуреэ, температура повысилась до 37,8 С, Уровень креатинина и мочевины 0,343 ммоль/л и 16,8 ммоль/л соответственно. Прослушивались хрипы в легких, Описанная клиническая картина могла быть вызвана либо кризом отторжения, либо инфекционным процессом. Уровень соотношения Тх:Т в этот период обследования составил 0,3, В дальнейшем обнаружена двусторонняя пневмония, кандидоз рта. Снижение приема иммуносупрессивных препаратов и назначение антибактериальной терапии привело к улучшению состояния больного, Соотношение Т,;Т, перед выпиской из стационара составило 1,4.Таким образом, по уровню соотношения Тх.Тс можно было диагностировать наличие инфекции до подтверждения ее микробиологическими методами исследования. Кроме того, показатель соотношения может свидетельствовать об эффективности проводимой терапии.П р и м е р 3. Больной Ос-к перенес пересадку почки 14.10.84 г, После операции состояние больного тяжелое, почка плотная, температура 38,4 С. Незначительное уменьшение диуреза, Уровень креатинина 0,222 ммоль/л, мочевины 14,6 ммоль/л. Подозрение на острый криз отторжения. Соотношение Тх,Тс в этот период обследования ооставил 0,47. В последующем открылся гнойный свищ в области послеоперационной раны,Таким образом; предлагаемый способ является аысокоинформативным и точным, поскольку позволяет по результатам соотношения Тх.Тс оценивать у больного развитие реакции отторжения либо инфекционных осложнений, а также свидетельствует о стабильной функции пересаженной почки.Способ является эффективным, универсальным и точным, поскольку позволяет характеризовать напряженность иммунных процессов по отношению к аллотрансплантату и инфекционным агентам независимо т динамики клинико-лабораторных показатеЗаказ 3269 Тираж 510 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж, Раушская наб., 4/5 Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул.Гагарина, 101 лей, может служить отправной точкой тактики лечения больных и одновременно критерием ее эффективности, позволяет дифференциально диагностировать кризы отторжения и инфекционные .осложнения у реципиентов с почечным аллотрансплантатом.Способ прост в выполнении, не требует специального оборудования, дорогостоящих реактивов, экономически выгоден.Формула изобретения Способ определения состояния организма больных с почечным аллотрансплантатом путем определения в крови Т-лимфоцитов хелперов и супрессоров, о т л и ч а ющ и й с я тем, что, с целью повышения точности способа эа счет дифференциации 5 острого криза отторжения и инфекционных осложнений, определяют количество Т-хелперов и Т-супрессоров по их чувствительности к теофиллину в реакции розеткообразования и при их соотношении, равном 10 2,5 и выше, определяют криз отторжения, апри соотношении 0,5 и ниже определяют инфекционные осложнения.