Способ определения антител к вирусу клещевого энцефалита в сыворотке крови

ности )ст цоротки . "Клех)с-мц)п 7 ни гтлюИССУЕ ТУЕС стя СЫНОГ) Г)ТКЯ Н тЯЦСЕ))СЕтт т) т) )в недецци (1/УЕО) Тт, кс)тттроль Т Т Т - котт-роньь тито 7 Г) Гес)Ссост)с т)ИТ)ус" г;НАИ- .)есктх ует)оте . к тетктт-;)к)и )тлюс к)те ттсц - эе)Аектот) кГ)ттт)оль Т У т(Г) цт",)оль с гетИАтцо. Тц лсзтся кус еок - мцшенец: гусис эрттротИТы, обряботянньте тяцицом путк)с клетки-эААекВсе пробы, опытные илц котттг)олт,цьеСтавят н рянньгх объемек. 0220 мл, Т)от 1 т)с 1 гх ц КГ)тсттс).)т.)ьтх Г 1 тобях соотн.п.Нце клеттси-э 1)тт)ектГ)рт т ". клетки-мцптг )и е),и)тат(о)со, Т Ряктцч уСит)т)ес)Г)ттзлтко н Г;лучяе цгтоксцчтост) исслед Рме) Й г ь)тет 111 к и т, 5 т( т) Р" )к - ттт цсд и РйстР)ИАческос Ьч кСтог)еЛение Сгн контроле Т Т це 6 олее, чем спотття)- тНГ)Р н 1 снсГ."уО)нте, .)Ет мекс)тмаутьцую яктюзттс)сть принципот активностьО ) 1 1 О мг сТ)Ру тз лунтсц ХОЕ:трс)яЯ Т.по. те тятельного перемешцняцця ес.с оутекимо го, .я сгтоцтя ) ЫЙ тс тход25рялт) он к тинное тц гц)инимя тат яктцв Иост ьСТ 10 мл суперцатяцтя из луцки контре) ля ТП р и и е. р, Нодгопогка клетокмт)ецеть Г .усиные зрит)отттты ) взят)Р.в ря гтнор Лутьс ееР)а ) дВукрятето отмывягют спосАятно-сГ)утетсьм буАером 1,Т)СТ 1)с рН 7, 2, .готовят 5%-цую взгнес ь зри тродц-,тов в этом буФере.К 1 мл 5%-тс"й нзнесиэрцтродитон добавляютМл рясттторяТаВта,. Тта;тнегеттнс)гс) 1; 2)00 и СТ) Нс рН 7,2, цнкубцруют 20 мин при тсом ЦатОй ГЕГЕРЯтУ ТЕ ЗЯТЕ)т ТРЕХКРЯтНО)тм Вака в ф Т г рЦ ) ) ггя)с и.б)ттуцзятттц эртсггрг.:тттстн цспс)лтезук)т10теоттме)алеет)ецио диягцостикум клепеногоэнтРАалитЯ т)роизнопстВЯ Томе:кого ТТИИвакцин и сттнороок для РТГ и РСК. гиагтсоститеумразноутят 1 мл О, 15 Т) ТТЯС 1, 1 млрязнедР)ного дня гностикума с.мешинаютс Ут мп ет)СБ с рН б,У), Смесь стабилизи 45руют ло)пядцным Гьтнороточцым яутьбумттном в конечной кондентряттцц 0,5% иинкубцруют 20 мин при комнятцой тем. пературе, отмывают 3 ра.тя в ГтСБ с5 ГрН 7,2 с 0,5% лотпадиного сьеторото)тне)- го ауьг)у) )и)ся,К ое. утку поуТучеттнте клстсук-т)иптееейтдобяВляю 1 му культу)альо) Средыс х,:гк)ятом натрия Г,;. до конечнойгКОН;,;Г.,сц)Т ИЗОтОПа В СуСЕТЕЕСЗИЕЕ КтЕ- ф 5ток г.ОО мЕС/ ел Кутс.ткц-му)в:ти метятн т:че;)ц, ГЕОЕ и; ц при 37 С, затемТРЕХКРЯГ)н Г т; Ят)т е Т НЕСНЯЗЯВШЕГОся 5 Сг боуьттцмтс обьемямн растпоря К)т;, у:Г)гсс.у"т к)уп:Рот)о клеток до 5 1 О 5 тт 1 мл куги,т у ральо г реды,ТТодготогс)ГЯ клг .е)к -эфАРст оров.сячсе тне ктгтик-зфАекторов ис - цол ьзуют тс).Г)тту)Г,ЕтертАерической кронц, )н:у)еуГ) ье цз гиптзрцнцзировянттс)тт кротс н, гряднен) Р плоттости фиколлипяк и, МР )ду Тей "и. Кутетки-эдхТ)Ркт орм .отм няк)т тр;-ряттто растворомХЭСкся Н ДГ о 5 ,: ОЧЕНТРЯИИ10 " л ;). КультуральнойТт),: т:е);: .-)тонка пеякдии цспольз уютк ., -уг)е ,у) .;у Г едуют)его соста -Р 1- )О . 10% ццактцвцронанной Г",)ст.л,тей стНороткц т 2 МТТ Нерея.11 ссутеу) глух,:гс ротку (донора, бол,ногс: клс птентм ". тРАялитому цняктт-.нт.руют с) .к ц прц 5 У С, готовят ее учкра) ,.)с:)тонятельные разнеуте- )Р Кн еетктт -) )з т помеп)Я ют н лунки с) Ьс тту)о.Г й ,ят)- :- : для цммунолотц сео )х ре,кд: й н о;еме 0.1 мл (тто 5 10к)сток: я уутту), добавляют к .Чк: цс:ле;уемую с.:Гноротку в объеме 0 ) му Тук, что)ь конечная конце нтрЯв ): с,г орссг ц н у 5 с,т - . составила ,у О - 1, 5 0 ус);1)ук)т 1) ч при усС, чятг. з тс,-:ж,ую цз лунок, содер)та ГЕХ ое)с у; дева ТЕЛЬНЫЕ ра З НЕдЕНИя СЫ- ворс)гок от 1/,6 до 1 у 5120, вцосят по О,. 1 )л кутеток -зяекторон планшету пецстт)нТГ";гцг-кт 2 мин пои ЯООЕ), инкубц;)уют 12 : н ятмосг 1 ере 5%-ного СОт, ,.с)нуте о)с.)нянця ц) .) бя Пии из капсдоц угу нки отбирают с упер:,ата нт в объеме О,.10 му.т ц иссутеуус)т рядцояктин нос ть пробы на гяммя-счггчцке Гамма",Тропе нт с петИАцчгс.,ого высвобождения Сг гтодсчцттня-:т с использо 5вакиЯм АормулГТрц постановке реакции соотноше-. ние слетси-эАГ)етстор) т: клетки - милен. В лунке равно 5,".РРзльтяты опреуеленця показываютР )ггз титр антител н исследуемой сыноротке составляет 1:2560,Предутягяемый спосо 6 поньппает чувст- вительность определения антител по сравнению с прототипсьт н 32 разя, результат при этом о:,е)1 сг)яют по тИАроному мятерияугу. что пгг),ппает точность и искк)чает с) с);,гктцннс)гть опре - црлечття5 1597726 6 и з о б р е т е и ц я руют диагностикумом клещевого знг 1 еА- лита, метят хроматом натрия Сг,обрабатывают исследуемой сывороткой,добавляют мононуклеары периФерйческой крови в соотцогпеции 5:1, дополнительно инкубируют, определяют про"цент специг)ического высвобо)кдеийямеченого хрома из разруненньос клетокмгппеней и при его значении, больпгем12, делают вывод о присутствий всьворотке антител к вирусу клеевогоэнцеФалита. г) о р и у л а Гпособ оггределения ацтцтел к вирусу клегевого эццеАял 1 гта в сыворотке крови путем приготовления последо 5 цателггцх раэведеццй исследуемыми сыворотки ц ццкубировация с ацтигеном с использованием гусиньгх эритроцитов, о г л и ч а ю щ и й с я тем, что, с целью повыюеция чувствительцости и точности с пос оба у гусггне э 1)ит роци - ты обрабатывают тацицом, сецсибилиэиСг)ст,".витель Р. ГуменюкТехред мгГнд.1 к Корректор И,Иуска Редактор А,1 ацдор Заказ 3049 . Тираж 530 ПодписноеВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР113035, Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5 Произнодствецно-издательский комбинат "Патент", г,У)кгород, ул. Гагарина,01