Способ иммунодиагностики посттравматического увеита

(19) 616 и ззйз ГОСУД АРСТНЕН 1.1 Ь 1ПО ИЗОБ ЕтЕНИЯМПРИ ПНт СССР ИТЕТРытиям Р 16ский инс .11.Сочне ту лителЦель аг покаго мееские етическматическ13. ици уве о за. тов е траываю мере Горяева ся средой 19 уют в 0 1 мл арозы Чикропо 0,002 мл н т гвк ция доводи ресуспенди раствора а раскапываю 10 / до 2 0,2 Е- прицо в лун о м смесь ки план пе нои темрации):(56) Клинико-иммунолозания к выбору натогетода лечения посттравита. М 1984, с, 11 Изобретение относится к медицине,в частности к ойтальмологии, и можетбыть. использовано при лечении воспалительных осложнений травм глаза.Целью изобретения является ранняядиагностика посттравматического увеита путем его доклинического выявленияна 2 - 6-й день после травмы,Способ осуществляется следующимобразом,Из вены в асептических условияхберут 5-6 мл крови в пробирку, добавляют 1,5 мл антикоагулянта и 0,60,7 мл желатины. Помещают в термоостат при 37 С на 2 ч. Надосадочнуюжидкость, содержащую лейкоциты, центриАугируют в течение 1 О мин при200 я., затем центрифугируют триждыпо 5 мин с раствором Хенкса такжепри 2008, Клетки лейкоцитов подсчи(54) СПОСОБ И 121 УНОДИАГНОСТИКИ ПОСТТРАВМАТИЧГС 1(ОГО УВКИТА(57) Способ относится к медицине,в частности к офтальмологии. и можебыть использован при лечении воспаьных осложнений травм глаза.способа - ранняя доклиническая костика посттравматического увеиЛЛя этого проводят реакцию инги- и миграции лейкоцитов с кровью ного в среде 0,2 Х-ной агарозы, качестве антигена используют очиый белок сосудистой оболочки глаПри соотношении 4 10 лейкоцина 10 мкг белка антигена и индекиграции лейкоцитов 48-867. диагируют посттравматический увеит,шеты. После затвердевания к в течение 3-5 мин при комна пературе добавляют по О,1 м 199, содержащей 107 сыворот АВ (1 Ч) и по 100 гД/мл пени и стрептомицина, и добавляю антигена, приготовленного и той оболочки, В контрольную вносится среда без антигена помещают в термостат при 37 18-20 ч. Площадь миграции р руют в проекционном аппарат ряют диаметры зон и результ вают по формуле (индекс инг л среды ки группы циллинат 0,01 мл з сосудислункуПланшет Г наегистрие, Измеаты считы- ибиции1561039 Средняя площадь миграции с антигеномСредняя площадь миграции без антигена При иммунологическом обследовании 45 104 больных с проникающими ранениямиглаз у 15 из них была выявлено снижение индекса РИАЛ. Своевременно проведенное противовоспалительное лечение посттравматического увеита в доклинической стадии позволило предупредить развитие его, а также тяжелыхосложнений и сократить достаточновысокую остроту зрения: у 7 больныхиз 15 острота зрения равнялась 0,41,0, у 4 больных " от 0,1 до 0,3,И только у 4 больных с посттравматическим гемофтальмом (2 чел.),и трав.матической катарактой (2 чел.) зрение было снижено от 0,005 до 0,03. где П, П, П , П,х - соответствующиедиаметры наружных эллипсов;с 1 Й х Йх Й, - соответствующиедиаметры внутренних эллипсов.Для проведения исследований антиг н сосудистой оболочки, используемыйв реакции ингибиции миграции лейкоцитов (РИИЛ), готовят следующим образ м: сосудистую оболочку выделяюти глаз погибщих недонощенных детей.П оизводят дезинтеграцию с кремниевымпеском (в присутствии трис-НС 1-буйе.ра РН,2) в Аарйоровой ступке в те- чение 1-2 мин. Затем гомогенат подвергают ультразвуковой обработке при40-60 Вт в течение 30-40 мин и центАугируют в течение 20 мин при 1520 тыс. 8. Проводят осаждение белковв надосадочной жидкости с помощьюраствора сульЪата аммония (конечнаяо,концентрация 50 ) при 4 С, центриАуФируютв течение,30-40 мин при 15- 0 тыс. я, осадок разводят в растворе трис-НС 1-буАера РН,2 до концентрации 0,5-0,7 мг/мл белка, ПроводятроматограАию методом гельфильтрации.обирают фракции, контролируя в ниходержание белка с помощью спектрофотометра при максимуме поглощения оптической плотности - 280. Содержимоефракций 1 пика при ОПсоставляетполученный антиген сосудистой оболочки глаза.При выявлении индекса ингибициимиграции лейкоцита в пределах 45-86 ставят диагноз посттравматическогоувеита.П р и м е р 1. Больной Л.,27 лет, поступил в глазное отделениес проникающим ранением роговицы,.Ьнутриглазным инородным телом, травматической катарактой. Острота зрения справа 0,05 коррекции нет, слева - 1,0. ВГД справа - Т . В тотВе день сделана микрохирургическаяобработка раны роговицы с наложением.1 пвов. Внутриглазное инородное телоудалено диасклерально магнитом. Навторой день сделана РИИЛ. При подго 10 15 20 25 30 35 40 товке антигена гомогенизация со стерильным песком осуществлялась в ступке в течение 1 мин, а ультразвуковаяобработка при 60 Вт в течение 30 мин,Индекс миграции 78,2 , Поставлен диагноз доклинической стадии ПУ и начатапротивовоспалительная терапия, Несмотря на лечение через неделю приповторном определении РИИЛ выявленыеще более низкие данные индекса миграции - 72,6 ., а через неделю - 70,1 .Выписан на 32-й день с остротой зрения правогоглаза 0,005 эксцентрично.Пример 2, Больной О., 30лет, поступил в глазное отделениес проникающим роговично-склеральнымранением правого глаза и выпадениемрадужки. Острота зрения справа 0,1коррекции нет, слева - 1 х 0. ВГД справа Т. В тот же день сделана микрохирургическая обработка раны с вправлением радужки, На второй день сделано определение РИИЛ, результат -отрицательный. На 5-й день иммунологическое исследование повторено, отмечено торможение реакции лейкоцитовдо 82,3 , на -й день - до 72 . Приподготовке антигена в данном случаегомогенизация со стерильным пескомосуществлялась в ступке в течение2 мин, ультразвуковая обработка при40 Вт в течение 40 мин. Поставлендиагноз доклинической стадии ПУ, Начато активное противовоспалительноелечение. Выписан на 20-й день с остротой зрения в правом глазу 0,6-0,7,ВГД - 22 мм рт.ст,5 1561039 6 Формула изобретения Составитель И.Башкаев Техред М.Дипык Корректор С.Ыевкун Редактор М,Бандура Тираж, 507 Заказ 976 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по,изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж, Раушская наб., д, 4/5Цроизводственно-издательский комбинат "Патент", г.ужгород, ул. Гагарина,01 Но ни в одном глазу не развился посттравматический увеит.Способ позволяет диагностировать посттравматический увеит в доклинической стадии на 2 - 6-й день после травмы. Способ иммунодиагностики посттравматического увеита путем добавления к лейкоцитам больного антигенов ткани глаза и последующей оценки индекса миграции лейкоцитов, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что, с целью ранней доклинической диагностики, в качестве антигена используют очищенный белок сосудистой оболочки глаза, реакцию ингибиции миграции лейкоцитов проводят на второй - шестой день после травмы глаза в среде 0,2 Б-ной 10 агарозы, причем реакцию ведут присоотношении 4 10 лейкоцитов на 110 мкг белка антигена и при индексе миграции в пределах 48-867 диагностируют посттравматический увеит.