Способ диагностики туберкулеза

(19) 1111 50 4 С 01 И 33/53 ТЕНИЯИДЕТЕЛЬСТВ н двторСном ЕЗАицио ССС 1 982 ционнои смесфосфатидный мл;гнос леза. Цель изо ности спосо Способ отраци фоцит тка с эа 2 в ко 2; взвесь лим ческая сыворПриме поступила с зо доз ре В ан 16 л гениталии ирована и ка с резцессом взом ранее т опе 1 яичн псомено едено по след рованно ариниэ ой отс таивают 1после че садку лвра ту ы. К ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМПРИ ГКНТ СССР ОПИСАНИЕ ИЗ.И.Фейгельман,И.П.Туманов88.8)свидетельств Р6 К 39/00,Изобретение относится к медицине,именно к иммунологии, и может бытьпользовано при диагностике туберкутения - повышение то ществляют следующим обДля диагностики туберкулеза в качестве действующего начала в реакции розеткообраэования используют фосфатидный антиген микобактерий туберокулеэа, иммобилизованный на эритроцитах, при этом в качестве диагностического признака учитывают концентрацию В-роэеткообразующих лимфоцитов (В-РОК), и при значении В-РОК не более 207. диагностируют туберкулез.При постановке реакции розеткообразования с фосфатидным эритроцитар(54) СПОСОБ ДИАПОСТИКИ ТУБЕРКУЛ(57) Изобретение относится к медне, а лченно к иммунологии, и мокетбыть использовано при диагностике туберкулеза. Цель изобретения - повышение точности способа. Проводят забор крови у больных, выделяют лимфоциты, Затем их смешивают с эритроцитарным фосфатидным туберкулезным диагностикумом, инкубируют и подсчитывают число розеткообраэуюших клеток,при количестве роэеткообраэующих клеток 207 и меньше диагностируют туберкулез. По сравнению с прототипом точ -ность диагностики возрастает на17, 57 ым диагностикумом используют следуюее соотношение ингредиентов реакэ ритро цитарныи тикум туберкуле,5 Е, комплемент в 0,1; гемолитититром 1/2000 2, Больная В 26 лет нием на туберкуамнезе бесплодие,поводу разрыва кис ко выраженным спаеч брюшной полости. Т не болела.Обследование пр щей схеме, 5 мл ге крови иэ вены боль при комнатной темп отсасывают лимфоцифоцитов приливают среду У 199 в количестве, равном 0,7 объема лейкоцитарного слоя. Взвесь перемешивают. Параллельно разводят комплемент добавлением к 0,2 мл сыворотки крови белой мьппи 1,8 мл физиологического раствора. Эритроцитарный фосфатидный диагностикум туберкулеза, представляющий собой эритроциты барана, сен сибилизированные фосфатидным антигеном микобактерий туберкулеза, разводят физиологическим раствором до 1,57-ной взвеси. 2 мл этой взвеси смешивают с 2 мл гемолитической кро личьей сыворотки в субагглютинирующей концентрации, выдерживают при 37 С в течение 30 мин, дважды отмывают физиологическим раствором и центрифугируют 5 мин при 1000 об/мин. 20 Осадок растворяют в 2 мл среды 199, смешивают с 2 мл комплемента белой мьппи, выдерживают в течение 30 мин при 37 С, дважды отмывают физиологическим раствором и центрифугируют в 25 том же режиме.Из осадка берут 0,1 мл эритроци-, тов сенсибилизированных фосфатидным антигеном), смешивают с 0,1 мл лимфоцитов обследуемой (в данной смеси со держится 100 сенсибилиэированных эритроцитов на 1 лимфоцит и инкубируют 30 мин при 37 С. Далее в смесь вносят 0,05 мл глютарового альдегида и 0,25 мл дистиплированной воды, пос ле чего центрифугируют в течение 5 мин при 1000 об/мин, сливают надосадочную жидкость, добавляют 0,5 мл среды Р 199 и готовят мазок для микроскопии с окраской по Романовскому. 40Под микроскопом просматривают розеткообразующие В-лимфоциты. Учитывают лимфоциты, присоединившие не менее 3 эритроцитов.При обследовании предварительно 45 устанавливают концентрацию лимфоцитов крови по клиническому анализу крови для определения абсолютного содержания розеткообразующих В-лимфоцитов по общеупотребительной методйке.В данном примере В-РОК = 137., что меньше граничного значения, равного 207 Поэтому у обслецуемой диагностируют туберкулез. Этот диагноз подтвержден клинико-рентгенологически. На рентгеновских снимках матки и при- датков - облитерация и множественные обызвествленные лимфоузлы, Проба Коха с положительной очаговой реакциейП р и м е р 2. Больная Б,22 лет,При поступлении диагноз - туберкулезный спондипит поясничного отделапозвоночника, туберкулез легких.Обследование проводят как в примере 1,В результате установлено В-РОК,Ф87., что меньше граничного значения(207) и позволяет диагностировать туберкулез.После курса химиоретапии и соответствующей подготовки больная прооперирована. Произведена абсцессотомия, удалейие диска. Диагноз подтвержден бактериологически и рентгенологически.П р и м е р 3. Донор С. 26 лет,был обследован на донорском пунктеЛПИИ, Обследование проведено как вприме реУ данного донора установленоВ-РОК = 297, что больше граничногозначения (207). Поэтому сделан выводо том, что донор здоров, что подтверждается данными его клиническогообследования на донорском:,пункте.Использование предлагаемого способа позволяет повысить точность способа, Так, вероятность правильного диагноза при обследовании 34 больныхтуберкулезом в предлагаемом способесоставляет 97,17, тогда как в известном способе эта вероятность составляет 80,67 Статистический анализподтверждает значимость отличий вточности сравниваемых способов приуровне значимости не более 57, т.е.точность при использовании предлагаемого способа возрастает на 17,57.Определенность диагностики в предлагаемом способе характеризуется вероятностью отнесения здорового лицак категории больных лишь 0,05, чтовполне соответствует требованиям длястатистически обоснованного применения предлагаемого диагностическогопризнака. формула изобретенияСпособ диагностики туберкулеза, включающий забор крови, выделение лимфоцитов, инкубацию их с эритроцитарным диагностикумом, подсчет розеткообразующих клеток, о т л и ч а ю - щ и й с я тем, что, с целью повьппения точности способа, используют5 1527593 6эритроцитарный диагностикум с иммо- барана и после подсчета розеткообрабипизацией фосфатидного антигена ми-зующих клеток диагностируют туберку. кобактерий туберкулеза на эритроцитах лез по снижению их от 203 и менее.Составитель В. Литовченко Редактор И.Горная Техред М.Дидык Корректор А.Обручар Заказ 7507/51 Тираж 789 ПодписноеВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР113035, Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5Производственно-издательский комбинат "Патент", г,ужгород, ул. Гагарина,101