Способ диагностики туберкулеза

(54)(57) СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ ТУБЕРКУЛЕЗА .путем обработки фиксированногона стекле туберкулезного антигенаравным объемом исследуемой сыворотки с последующим нанесением меченойантиглобулиновой сыворотки и выявлением специфических антител в люминесцентном микроскопе, о т л и ч аю щ и й с я тем, что, с целью упрощения способа и повышения точности,на стекле, фиксируют 0,053-ную взвесьэритроцитов, сенсибилизированныхтуберкулезным антигеном, а исследуемую сыворотку берут в разведении1 4 ОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССРПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТЮ ОПИСАНИЕ ИЗК АВТОРСКОМУ СВИДЕ(71) Лейинградский научно-исследовательский институт вакцин и сывороток,Ленинградский ордена Трудового Красного Знамени педиатрический медицинский институт и 1-й Ленинградскиймедицинский институтим. акад. И.П.Павлова(56) Степанова Э.А. и др. Иммунофлуоресцентный метод при диагностикетуберкулеза. " Пробл. туберкулеза,1973, У 11, с. 23-25. 39/00 А 61 В 10/001Изобретение отнрсится к медицине и может быть использовано для серологической диагностики туберкулеза.Цель изобретения - упрощение способа и повышение его точности за счет фиксирования на стекле 0,05 Ж- ной взвеси эритроцитов, сенсибили эированных туберкулезным антигеном.Способ осуществляется следующим образом.Для проведения реакции непрямой иммунофлуоресценции эритроцитарный антигенный туберкулезный диагностикум разводят физиологическим раствором до получения 0,053-ной взвеси. Для каждой пробы на стекло наносят по О, 1 мл этой взвеси, которую высушивают и фиксируют в сухожаровом шкафу при 60 С в течение 50 минаНа фиксированный диагностикум наносят по 0,1 мл сыворотки крови обследуемых в разведении 1:4 и инкубируют в течение 30 мин при 37 С и4 относительной влажности 80-1003Полученные препараты отмьвают от непрореагировавшей сыворотки сначала Физраствором, а затем водо" проводной водой по 10-15 мин, после чего их высушивают при комнатной температуре.П р и м е р 1. Больной Б., 45 лет. В детстве перенес туберкулез ннутригрудных лимфатических узлов. В течение месяца отмечал общую слабость, сухой кашель, боли н левой половине грудной клетки. При Флюорографическом обследовании обнаружены изменения н легких.Госпитализирован с диагнозом: диссеминированный туберкулез легких, леносторонняя пневмония При рентгенотомографическом обследовании выявлена ячеистая деформация легочного рисунка с инфильтрацией по ходу сосудов и бронхов в основании верхней доли справа и сливная очаговая инфильтрация в С и у корня легкого .слева, После курса противопненмонической терапии отмечен частичный положительный рентгенологический эффект. В целях дифференциации туберкулеза и.пненмонии больной был обследонан предлагаемым способом. Для этого эритроцитарный антигенный туберкулезный диагностикум разводят физиологическим раствором до получения 1217417 10,05 .-ной взвеси, которую наносятна стекло н количестве О, 1 мл, высушивают и фиксируют в сухожаровомшкафу при 60 С в течение 50 мин.5 На фиксированный диагностикум наносят 0,1 мл сыворотки крови обсле"дуемого в разведении 1:4 и инкуби"руют в течение 30 мин при 37 фС иотносительной влажности 80-100 .1 О Полученный препарат промывают физраствором и водопроводной водой до 1015 мин и высушивают при комнатнойтемпературе. Далее препарат обрабатывают антиглобулиновой антивидо 15 вой люминесцирующей сынороткойО, 1 мл в разведении 1:16, термостатируют при.37 С в течение 30 минпри относительной влажности 801003 и тщательно промывают физиоло 20 гическим раствором и нодой, На высушенный препарат наносят забуференный раствор глицерина и покрьваютпокровным стеклом.При просмотре мазка в люминес 25 центном микроскопе при увеличении2250 отметили специфическую люминесценцию антигена н виде светящихся точек на поверхности эритроцитов,Специфичность реакции контролируютЗО путем просмотра мазков, не обработанных сывороткой исследуемого,и препаратов из нормальных эритроцитон барана, обработанных двухступенчатым методом. В контрольных35,препаратах отмечали отсутствие спе цифического свечения. На основаниирезультатов исследования сделализаключение о туберкулезной этиологии заболевания. В дальнейшем вы 40 явление бактериологическим методоммикробактерий туберкулеза в промывных водах бронхов подтвердило диагноз: диссеминированный туберкулезлегких в фазе инфильтрации, БК+,В,цанном случае предлагаемым способом была проведена дифференциальная диагностика туберкулеза и неспецифического воспалительного заболевания легких.П р и и е р 2. Больной К , 47 лет.Перенес н 1980 году очаговый тубер"кулез верхней доли правого легкого,Прошел курс лечения с положительнымэффектом. Последние 2 года туберкулезный процесс расценивался какнеактивный. При контрольном .Флюорографическом обследонании выявлено незначительное нарастание изменений в легких. ГоспитализированСоставитель П.БонарцевТехред А.Бабинец Корректор Е. Сиромах Редактор М.Дылын Заказ 1025/8 Тираж 659 ПодписноеВНИИПИ Государственного комитета СССРпо делам изобретений и открытий113035, Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5 Филиал ППП ".Патент", г.ужгород, ул.Проектная, 4 Э 1 цля определения активности туберкулезного процесса.При рентгенотомографическом обследованиив верхнейдоле правого легкого - скопление очерченных интенсивных очагов. Проведенные исследования и клинический анализ крови больного были в пределах нормы. Активность туберкулеза была сомнительной.В целях определения активности туберкулезного процесса больной был обследован предлагаемым способом аналогично примеру 1. В полученном препарате наблюдали специфическое свечение, на основании чего было сделано заключение о наличии активного туберкулеза, В дальнейшем диагноз: очаговый туберкулез верхней доли правого легкого в фазе инфильтрации, БК- (обострение) был подтвержден положительным эффектом от противотуберкулезного лечения.В данном случае предлагаемым способом быпо проведено определение активности туберкулезного процесса,П р и м е р 3. Больная М., 59 лет. При профилактическом флюорографическом обследовании выявлены изменения в С правого легкого. Госпитализирована с диагнозом: инфильтративный туберкулез С правого легкого, БК-. При рентгенотомографическом исследовании в С правого легкого обнаружено неоднородное затемнение Зх 4 см с бугристыми контурами. Природа патологического образования быпа неясна.В целях дифференциации туберкулеза и злокачественной опухоли боль 217417 4ная была обследована предлагаемымспособом. В препарате, полученноманалогично примеру 1, специфического свечения не наблюдалось,На основании этого было сделанозаключение о нетуберкулезной этиологии заболевания. Исходя из результатов обследования больной предлагаемым способом и данных клинико 1 О рентгенологического обследования,выставлен окончательый диагноз 1 ракнижнедолевого бронха правого легкогоВпоследствии больная была проопериоована, диагноз был подтвержденгистологически.В данном случае предлагаемымспособом была проведена дифференциальная диагностика между туберкулезом и онкозаболеванием легкого.2 О Достоверность обследования предлагаемым способом на 103 выше, чемизвестным (88,6-78,6 = 10,0 Ж) приуровне значимости р0,05. При этомдостигнуто также упрощениеспособа25 за счет изъятия операции приготовления мазков из предварительно выращенных микробактерий туберкулеза,что позволяет повысить техникубезопасности. Кроме того, достигается экономия расхода сыворотки больного (предлагаемый способ по существу является микрометодом, так какна 1 анализ достаточно 0,025 млсыворотки крови, что позволяет братькровь из пальца, тогда как для постановки РНГА необходимо 2-3 мл крови, из которой получают 0,5 мл сыворотки, поэтому был необходим забор крови из вены).