Способ моделирования посттравматической эпилепсии

СОЮЗ СОВЕТСКИХСОЦИАЛИСТИЧЕСНРЕСПУБЛИК 09) 0647 51) 4 С 09 В 23/2 ИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ ВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ(56) Напппопс 1 Е.С. е а 11980, и. 21, р. 3-14,Мф 33нский с гит 1 ерз 1 а,Изобретениеа именно к нев Цель изобре Ж фиксируют в стереотаксическом аппарате. Скальпелем производят разрез мяг" ких тканей головы в сагиттальном направлении. Находят переднезаднюю и ла- Ъ теральную координаты структуры, предназначенной для введения крови. Бормашиной высверливают в найденной точке отверстие, после чего в него вводят инъекционную иглу микроинъектора (внешний диаметр 0,5 мм) на необходи" . Ю мую глубину, также определяемую по стереотаксическому атласу. В течение 5 мин вводят 10-15 мл крови (2-3 мкл/мин). ф 3 После завершения введения остав ляют иглу в месте введения ещев течение 2-4 мин, после чего ее удаляют, Начиная со следующего дня после введения крови животному производят внутрибрюшинные ежедневные однократные введения пикротоксина в дозе 9,9-1; 1 мг/кг, с последующей визуальной регистрацией поведенческих изменений. едицине,тноситсялогии,шение восния - попособа. оизводимости ествляется следующим Спос кого аппара едполагаетсявматическую Крысу, у котороивоспроизводить посттэпилепсию под эфирным рауш-нарко ар масс ОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТНРЫТИЯМПРИ П(НТ СССР образом,Крысу линии Вистар помещают в коробку с отверстием для хвоста, который опускают на 3-5 мин в теплую воду (40-50 С), Затем с помощью скальпеля надрезают кончик хвоста и опускают в пробирку, куда предварительно наливают бидистиллированную воду (0,2 мл), Не погружая кончик хвоста в воду, собирают в пробирку венозную кровь до объема 0,8 мл. Полученную лизированную кровь набирают в шприц микроинъектора, инъекционную иглу микроинъектора фиксируют в вертикальном положении водителя стереотакси(54) СПОСОБ МОДЕЛИР АВМАТИЧЕСКОЙ ЭПИЛЕПСИИ(57) Изобретение относится к медицине, а именно к неврологии. Цель - повьппение воспроизводимости способа.С этой целью животному в мозг билатерально вводят 10-15 мкл лизированной гомокрови. Затем ежедневно 1 раэв день вводят пикротоксин в дозе0,9-1,1 мг/кг. Применение способапозволяет повысить воспроизводимостьмодели посттравматической эпилепсиина 977. по сравнению с прототипом. е р 1. У крысы линии Вис 320 г из хвостовой вены1506470 3берут 0,6 мл крови, к которой добавляют 0,2 мл дистиллированной воды. В дальнейшем эту кровь используют для введений в гиппокамп. Крысу-самца линии Вистар массой 270 г под эфир 5 ным наркозом закрепляют в стереотаксическом аппарате и по координатам (АР = -4,8, Е = 3,5, Н = 3,5) вводят в гиппокамп билатерально по 12 мкл лизированной крови, при этом каждое введение осуществляется в течение 5 мин, после чего инъекционная игла находится в зоне введения еще в течение 2 мин. На следующий день после введения крови животному производят первое внутрибрюшинное введение пикротоксина в дозе 1 мг/кг. Наблюдение в течение 30 мин после введения ПКТ показывает отсутствие эпилептиформных 20 реакций.В последующем инъекции этой дозы производят однократно ежедневно. После 4-го введения у крысы отмечаются замирания и миоклонические вздраги вания мышц морды и ушей в течение 15 мин. После 7-го введения пикротоксина у крысы развиваются клонические судороги всего тела, регистрирующиеся в течение 25 мин, 10-я инъекция вы зывает клонические судороги мышц передних конечностей, и после 17-го введения пикротоксина отмечается генерализованный клонико-тонический припадок (длительность 2,5 мин), заканчивающийся выраженной постприступной депрессией, В дальнейшем такие припадки возникают после каждого введения (всего произведено 20 введений) у а также после окончания Вв еде 40 ния пикротоксина через 6,5 мес после последней инъекции эпилептогена. Таким образом, у крысы воспроизведена модель посттравматической эпилепсии имеющей хронический прогрессивный характер эпилептиформных проявлений.П р и м е р 2У крысы линии Вистар массой 300 г из хвостовой вены берут 0,6 мл крови, к которой добавляют 0,2 мп дистиллированной воды. Полученную лизированную кровь в даль 50 нейшем используют для введений в сенсомоторную кору. Крысу-самца линии Вистар массой 310 г под эфирным наркозом закрепляют в стереотаксическом аппарате и в область сенсомоторной коры билатерально вводят 15 мкл лизированной крови, при этом каждое введение осуществляется в течение 5 мин,после чего инъекционная игла находится в зоне введения еще 2 мин, На следующий день после введения крови животному производят первое внутрибрюшинное введение пикротоксина в дозе 1,1 мг/кг. Наблюдение в течение 30 мин после введения показывает отсутствие эпилептиформных реакций,В последующем инъекции этой дозы производят однократно ежедневно. После 7-го введения пикротоксина у крысы отмечаются выраженные миоклонусы конечностей, вздрагивания мышц морды, ушей, наблюдающиеся в течение 20 мин. После 15-го введения у крысы отмечаются клонические судороги всего тела, продолжающиеся в течение 20 мин.26-я инъекция приводит к развитию генерализованного клонико-тонического припадка длительностью 2 мин с последующей выраженной постприступной депрессией. Подобные припадки отмечаются после каждого последующего введения пикротоксина (всего произведено 30 введений), а также червз 6,5 мес после последнего введения эпилептогена. Таким образом, у крысы воспроизведена модель посттравматической эпилепсии с хроническим прогрессивным характером эпилептиформных проявлений. П р и м е р 3. У крысы линии Вистар массой 340 г из хвостовой вены берут 0,6 мл крови, к которой добавляют 0,2 мл дистиллированной воды. В дальнейшем эту кровь используют для введений в гиппокамп, Крысу-самца линии Вистар массой 300 г под эфирным наркозом закрепляют в стереотаксическом аппарате, по координатам (АР = -4,8, Е = 3,5, Н = 3,5) вводят билатерально в гиппокамп по 10 мкл лизированной крови. Каждое введение осуществляется в течение 5 мин, после чего инъекционная игла находится в зоне введения еще в течение 2 мин. На следующий день после введения крови животному производят первое внутрибрюшинное введение пикротоксина в дозе 0,9 мг/кг. Наблюдение в течение 30 мин после введения эпилептогена показывает отсутствие эпилептиформных реакций,В последующем инъекции этой дозы производят однократно ежедневно, После 7-й инъекции эпилептогена у крысы отмечаются замирания, миоклонические1506470 Составитель А.БобровТехред М.Моргентал Корректор Э.Лончакова Редактор В.Петраш Заказ 5441/51 Тираж 469 ПодписноеВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5 Производственно-издательский комбинат "Патент", г.ужгород, ул. Гагарина, 101 вздрагивания мышц морды, ушей, туловища, которые длятся до 20 мин, После9-го введения у крысы развиваютсяклонические судороги всего туловища,регистрировавшиеся в течение 25 мин.После 15-й инъекции пикротоксинау крысы развиваются клонические судороги передних конечностей (позакенгуру), которые отмечаются в течение 30 мин от их возникновения, 20-яинъекция конвульсанта вызывает укрысы развитие генерализованного клонико-тонического припадка с падениемживотного на бок длительностью1;5 мин с выраженной постприступнойдепрессией. Пикротоксин, введенныйчерез 6,5 мес после последнего(20-го) введения, вызвал развитие укрысы генерализованного клонико-тонического судорожного припадка. Таким образом, у крысы воспроизведенамодель посттравматической эпилепсии,имеющей хронический прогрессивный5характер эпилептиформных проявлений.Применение способа позволяет повысить воспроиэводимость модели посттравматической эпилепсии на 977 посравнению с известным,1 О Формула изобретения Способ моделирования посттравматической эпилепсии путем введения животному в мозг крови, о т л и ч аю щ и й с я тем, что, с целью повышения воспроизводимости способа, билатерально в мозг вводят 10-15 мкл лизированной гомокрови, а затем 1 раэ 20 в день - пикротоксин в дозе 0,91,2 мг/кг.