Способ выявления гиперлипидемии

СОЮЗ СОаЕТСКихсоцидлистичеснРЕСПУБЛИК 191 (П) 1 И 33/52 51 АРстаенныЙ комитетзоБРетекиям и ОтнРытиГННТ СССР ГОС ПО ПР ИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕИИ ельскии инстиицины ухтин,овицкий3 тся к мявлени цине овыИзобретени а именно к сп денного содерЦель изобр ствительностиСпособ осу е отно особам о ро жания лиетения е ч повьпп едую обцествля центрации, каобразце, в стме с известным следуемо ной плаз ар содтриг2 Р ржанием ицеридов аэ;е холеидов в мгЕ, ависих р С-слестерина и зведенной в уммарное соде ерина и триг андартной плже представлинтенсивнос жан ице зме с+ 75)В На черткость межд е тью флуоресцен А ВТОРСНОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ(56) С 11 п. Саед., 1986Ф 1, р. 63-66. Пробу. крови разводят буферным раствором в 50-500 раз, отделяют форменные элементы, к полученному раствору плазмы добавляют флуоресцентный краситель (фК) 4-диметиламино- дифторметилсульфонилбензилиденацетофенон до концентрации 000-1100/ /Р мкМ (где Г " величина разведения крови), измеряют интенсивность его флуоресценцпи и рассчитывают сум маркое содержание холестерина (ХС) и триглицеридон ТГ) по формуле(54) СПОСОБ ВЫЯВЛЕНИЯ ГИПЕРЛИПИДЕМИИ(57) Изобретение относится к медицине и может быть использовано для выявления повьппенного содержания липидрв в крови. Цель изобретения - повышение чувствительности способа,Пробу крови разводят буферным раст.вором, отделяют форменные элементы,добавляют флуоресцентный краситель иизмеряют интенсивность его флуоресценции, а суммарное содержание холестерина и триглицеридов (мг.7) рассчитывают по формуле. Способ позволяет проводить анализ в 0,5-1 мкл плазмы. 1 ил. где К - суммарное содержание холестерина и триглицеридов,мгЖ;А - интенсивность флуоресценции 4-диметиламино-дифто550 545 555 560 ции ФК и суммарным содержанием холестерина и триглицеридов (по оси абсцисс - интенсивность флуоресценции, мкМ; по оси ординат - суммарное содержание холестерина и триглицеридов5 в плазме крови, мг 7).П р и м е р 1. 20 мкл крови разводят в 100 раз (Р=100) Физиологическим раствором, содержащим 1 О мМ 10 трис-НС 1 и 2 мМ ЭДТА, рН 7,4, центрифугируют полученную суспензию при ЗООя в течение 10 мин, к 1 мл супернатанта добавляют 10 мкл 1 мМ эталонного раствора ФК. Интенсивность флуоресценции при длине волны возбуждения 440 нм и длине волны наблюдения 550 нм измеряют на флуоресцентном спектрофотометре в 1-сантиметровой кювете. По приведенной формуле 20 рассчитывают суммарное содержание ТГ и ХС (;Е), равное 550 мгХ (время ана. лиза 1 мин). Величина :Е, измеренная с помощью прототипа, составляет 546 мгХ (объем плазмы крови 50 мкл, 25 время анализа 15 мин). Верхняя граница нормы (И) суммарного содержания указанных липидов составляет 470 мгЕ, Таким образом,) И,И470 мгХ и в исследуемой пробе выявлено повьппен- ЗО ное содержание ТГ и ХС.1П р и м е р 2. Пробу крови разводят в 50, 100, 200 и 500 раз. К полученным после отделения форменных элементов растворам плазмы добавляют 35 ФК до концентрации (К) 20, 10, 5 и 2 мкМ соответственно. По предлагаемому способу оценивают суммарное содержание ХС и ТГ.40В таблице показано суммарное содержание ТГ и ХС в плазме крови, мг%, определенное по предлагаемому споров бу в зависимости от разведения крови. Разведение Концентрация Содержание крови,Г красителя, ТГ и ХСД,К=1000/Г,мкМ мг 7. Таким образом, во всех приведенных случаях Х И, где И = 470 мгй (пример 1), и повьпченное содержание ХС и ТГ выявляется вне зависимости от величины разведения крови.Предлагаемое изобретение позволяет повысить чувствительность способа в 10-20 раз за счет воэможности про-: ведения регистрации в 0,5-1 мкл плазмы крови. Формула изобретения Способ выявления гиперлипидемии путем отделения плазмы крови, добавления к ней красителя с последующим измерением интенсивности Флуоресценции в исследуемом и контрольном образцах, определением суммарного содержания холестерина и;триглицеридов и сравнением полученного показателя с нормой, о т л и ч а ю щ и й - с я тем, что, с целью повышения чувствительности способа, в качестве красителя используют 4-диметиламино -дифторметилсульфонилбензилиденацетофенон в насыщающей концентрации, а суммарное содержание рассчитывают по Формуле где К - суммарное содержание холестерина и триглицеридов,мгХ;А - интенсивность флуоресценции 4-диметиламино-ди-.1фторметилсульфонилбенэилиденацетофенона в исследуемом образце;С - суммарное содержание холестерина и триглицеридов вконтрольном образце, плазмы мгХВ - интенсивность флуоресценцки 4-диметиламино-ди- фторметилсульфонилбенэилиденацетофенона в контрольном образце плазмы в такойже концентрации,как в исследуемом образце,а гиперлипидеиию выявляют при увеличении полученного показателя вьппенормы.1476384Составитель В.МиРедактор М.Петрова ТехредЛ.Олийнйк Корректор С.Чер аказ. 2150/45 Тираж 790 ПодписноеНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытия113035, Москва, Ж-ЗЗ, Раушская наб., д. 4/5 КНТ СССР оизводственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул. Гагарина, 1 О 1