Способ моделирования сахарного диабета

(51) 4 С 09 В 23/28 ОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ ССС ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ А ВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ МОДЕЛИРОВАНИЯ САХАРНОГО произведения доклиничесиабета кроликам еаеднев-9 мес. перорально ввоамид в дозе 1 мг/кг,сследов нологии мон и химии го (72) В,В.П О.К.Блох, (53) 615.4 (56) Баран тальный са нической д с. 240. Бриндак, С.Ф.Нуждина ЭксперименРоль в кли 1983,(21) 4 (22) 0 (46) 2 (71) Х 75975/28-14.11,88. Бюл. В 4рьковский научной институт эндок лторак, О.И. А,И.Гладких и б (088.8) в В,Г. и дрхарный диабет иабетологии.(57) Для вкой стадиино в теченидят глибенИзобретение относится к медицине и может быть использовано при изучении патогенетических механизмов возникновения и развития сахарного диа" бета, а также для разработки способов его профилактики и лечения.Цель изобретения - воспроизведение доклинической стадии инсулинэависимого диабета. 1,Способ осуществляется следующим образом.Кроликам породы Шиншилла ежедневно на протяжении 3-9 мес вводят перорально глибенкламид в дозе 1 мг(кг. 15П р и м е р 1. Кролику-самцу породы Шиншилла с массой тела 2,5 кг ежедневно на протяжении 3"х месяцев утром перорально вводят глибенкламид в дозе 1,0 мг на кг массы животного. 20 На 91-й день под легким эфирным наркозом животное забивают. Немедленно извлекают поджелудочную железу, которую фиксируют в жидкости Бузна. После фиксации железу проводят через ба тарею спиртов восходящей концентрации. Заливают в парафиновые блоки, из которых готовят гистологические срезы. Срезы окрашивают гематоксилин" эозином, а такжехромовым гематоксилин-ЗО флоксином для дифференцировки альфа-, бета- и дельта-клеток. Уровень сахара в крови исследуемого животного определяют по методу Хагедорна- Иенсена, содержание антител к однонитевой ДНК 35 в сыворотке крови - радиоиммунологически.При исследовании срезов железы под микроскопом установлено, что в 247. островков бета-клеток наблюдались 40 явления гидропической дистрофии фрагментация и распад ядра, набухание цитоплазмы. В 3 островков с явлениями дистрофии имеют место лимфоцеллюлярная инфильтрация. Лимфоциты 45 концентрируются в виде вала вокруг островков или отмечаются среди их клеток. В таких островках с лимфоцеллюлярной инфильтрацией явления дистрофии и распада бете-клеток более выражены, что соответствует мор-" фологическим изменениям при доклинической стадии инсулинзависимого диабета. Гликемическая кривая при проведении перорального и внутривенного специфического тестов, а также уровень антител к ДНК в сыворотке крови существенно не отличались от контрольных значений. П р и м е р 2, Кролику-самцу породы Шиншилла с массой тела 2,7 кг на протяжении 6-ти месяцев утром перорально вводят глибенкламид в дозе 1,0 мг на кг массы жлвотного, На 182-й день под легким эфирным наркозом животное забивают. Гистологическую и гистохимическую обработку тка" ней, а также определение уровня сахара и антител к ДНК проводят соглас:о примеру 1.При исследовании поджелудочной железы изменения в бета-клетках островков поджелудочной железы, указанные в примере 1, составляют 453, при этом в 153 с явлениями лимфоцеллюлярной инфильтрации. Обращает внимание большая выраженность дистрофических процессов в бета-клетках как в ост овках с лимфоцеллюлярной инфильтра" .:лей, так и без нее. Дистрофические :-роцессы наблюдаются также в эпителнальных клетках экзокринной части поджелудочной железы, окружающей пораженные островки. Гликемическая кривая при проведении перорального и внутривенного специфического тестов у животных, получавших глибенкламид в течение 6 мес., не отличались от контрольных значений. Уровень антител к ДНК достоверно превышает соответствующие значения у интактных животных.П р и м е р 3. Кролику-самцу породы Шиншнлла с массой тела 2,6 кг на протяжении 9-ти месяцев утром перорально вводят глибенкламид в дозе 1,0 мг на кг массы животного. На 273-й день под легким эфирным наркозом животное забивают. Гистологическую и гистохимическую обработку тканей, а также определение уровня сахара и антител к ДНК проводят, как опи:ано в примере 1, Инсулинемию определяли радиоиммунологическим методом.Особенностью гистологического строения поджелудочной железы животного является то, что дистрофические изменения в бета-клетках и распад последних наблюдаются в 80 Х островков. При этом наряду с дистрофией и распадом бета-клеток такие же процессй отмечаются в альфа- и дельта-клетках островков. Однако лимфоцеллюлярная инфильтрация не обнаруживается ни в одном иэ островков. Параллельно с дистрофическими процессами в клет.Составитель А.ЛычковаТехред А.Кравчук УКорректор А.Обручар Редактор Г.Волкова Заказ 6083/52 Тираж 459 ПодписноеВНИИПИ Государственного комитета СССРпо делам изобретений и открытий113035, Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5 Производственно-полиграфическое предприятие, г. Ужгород, ул. Проектная, 4 з 4 ках островкового аппарата различной степени выраженности дегенеративные изменения отмечались и в клетках эпителия экэокринной части железы. Наря" ду с глубокими морфологическими изменениями в панкреатических бета-клетках, обнаруживаются и функциональные признаки инсулиновой недостаточности: повышение гликемической кривой и снижение секреторного ответа бета-клеток на глюкозу при проведении перорального и внутривенного специфического тестов, Вместе с тем, уровень антител к ДНК в сыворотке крови не достоверно отличался от соответствующих значений интактных животных. Преимуществом предлагаемого способа является стабильное моделирование наблюдаемой в клинике последовательности патологических процессов, приводящих к развитию абсолютной инсули 396584новой недостаточности и манифестациисахарного диабета; появление аутоиммунных реакций, в том числе направленных против антигенов инсулярногоаппарата поджелудочной железы (лимфоидная инфильтрация), их приходящийхарактер и предшествование глубокимпоражениям панкреатических бета-кле О ток, прсгрессирующая направленностьдистрофических и дегенеративных изменений в последних. формула изобретения15 Способ моделирования сахарногодиабета путем введения животным химических агентов, о т л и ч а ю щ и йс я тем, что, с целью воспроиэведе" 20 ния доклинической стадии инсулинзависимого диабета, животным ежедневно перорально вводят глибенкламид в дозе 1 мг/кг на протяжении 3 - 9 мес.