Способ моделирования миодистрофии поперечно-полосатой мускулатуры

СОЮЗ СОВЕТСНИХСОЦИАЛИСТИЧЕСКИХРЕСПУБЛИК 4 б 09 В 23/2 ЕТ СССР ОТНРЫТИ ГОСУДАРСТВЕННЫИ КО ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИ ПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ(54 СПО ДИСТРОФ ТОЙ МУС (57) Для животному недель вв 400 мг/кг 1,2,4 тр количестве делю. 1 та СОБ МОДЕЛИР ИИ ПОП ЕРЕ КУЛАТУРЪ скорения способ внтрибрюшсснн одят клофибрат массы тела еже иазол вводят вн 5001000 м с /к бл.Изобретение относится к экспериментальной медицине, в частности к способаммоделирования патологических состояний, иможет быть использовано в медицинскойбиохимии, патофизиологии и кардиологиипри изучении миодистрофии сердца и поперечно-полосатой мускулатуры в эксперименте.Цель изобретения - ускорение способаза счет введения ингибитора каталазы - 3 амино, 2, 4-триазола и активатора перекисьгенерирующей способности пероксисом - клофибрата.Способ осуществляют следующим образом.Экспериментальных животных (крыс) содержат на рационе вивария. Клофибратвводят внутрибрюшинно в дозе 250 -400 мг/кг массы тела ежедневно, З-Амино,2, 4-триазол вводят внутрибрюшинно в количестве 500 - 000 мг/кг три раза в неделю.Продолжительность эксперимента 4 - 6 недель.Пример 1, Самцов крыс Вистар массой 50 - 200 г содержали на рационевивария. Опыты проводили параллельно начетырех группах животных: 1 - контроль,11 - клофибрат, 111 - аминотриазол, 1 Ч -аминотриазол+клофибрат. Клофибрат вводят внутрибрюшинно в дозе 400 мг/кг массытела ежедневно. З-Амино, 2, 4-триазол вводят внутрибрюшинно в дозе 500 мг/кг массытела три раза в неделю. Животным контрольной группы вводят физиологическийраствор.Через 6 недель крыс забивают декапитацией и органы исследуют морфологическими и клинико-биохимическими методами, выявляя наличие миодистрофии сердцаи поперечно-полосатой мускулатуры.Внешне животные 1 - 111 групп практически не отличались между собой. Крысы 1 Чгруппы к концу эксперимента были менееподвижными, у них появлялась переваливающаяся походка. Несмотря на это, животные выглядели опрятными, без выраженных симптомов истощения или токсикоза.Примерно через 25 дней после началаопыта у двух крыс из десяти (1 Ч группа) развился паралич задних конечностей.Через 2 - 3 дня обе крысы пали. В тойже группе пала еще одна крыса, В контрольных группах летальный исход не наблюдался. Прирост массы тела крыс во 11и 1 Ъ группах был ниже, чем в 1 и 111группах. При вскрытии у животных опытной(1 Ч) группы можно было обнаружить признаки атрофии поперечно-полосатой мускулатуры: истончение мышц спины и заднихконечностей, мышцы имели желтоватыйоттенок. У некоторых особей наблюдалосьувеличенное, дряблое сердце, на поверхности которого иногда встречались зоныпросветления некротического характера. Патологических изменений органов выявлено небыло, 5 О 5 20 25 30 35 40 45 50 55 При морфологическом изучении ткани печени заметных изменений в гепатоцитах опытной группы по сравнению с группами контроля выявить не удалось. Во 11 и 1 Ъ группах в клетках печени наблюдалось зависимое от клофибрата увеличение количества пероксисом. В то же время в ткани сердца были выявлены существенные отличия: вакуолизация саркоплазматического ретикулума миоцитов, образование гигантских митохондрий, увеличение количества лизосом и липидных включений. Эти изменения можно охарактеризовать как проявления кардиомиодистрофических процессов. В поперечно-полосатой мускулатуре были обнаружены признаки атрофии миоцитов: наблюдалась липидная инфильтрация, капилляры выглядели спавшимися, в отдельных нервных волокнах, проходящих в непосредственной близости от капилляров, отмечались признаки дегенерации.Данные морфологического исследования были подтверждены при изучении в плазме крови активности органоспецифических ферментов.В таблице приведены данные влияния клофибрата и аминотриазола на активность органоспецифичных ферментов в плазме крови крыс (активность ферментов выражена в )/1,Р дано в сравнении с контролем (1 группа). Г 1 ри совместном введении клофибрата и аминотриазола появлялась тенденция к увеличению средней активности ферментов, отражающих патологические изменения в мышечной ткани (креатинфосфокиназа, лактатдегидрогеназа, малатдегидрогеназа ) . Об этом же свидетельствует характеристика изоферментного спектра лактатдегидрогеназы. В плазме крови крыс опытной группы существенно возрастало количество изоферментов ЛДГ, ЛДГ и ЛДГ 4. Первые два изофермента специфичны для ткани сердца, тогда как ЛДГ 4 в основном локализуется в клетках поперечно-полосатой мускулатуры крыс. При изучении в плазме крови крыс активности ферментов, характеризующих патологические изменения в клетках печени (у-глутамилтранспептидаза, глутаматдегидрогеназа), отклонений от контрольного уровня выявить не удалось.Пример 2. Самцов крыс Вистар массой 150 - 200 г содержали на рационе вивария. Клофибрат вводили внутрибрюшинно в дозе 250 мг/кг массы тела ежедневно. З-Амино, 2, 4-триазол вводили внутрибрюшинно в дозе 000 мг/кг массы тела три раза в неделю. Длительность эксперимента 4 недели.Основные клинико-биохимические и морфологические изменения у животных опытной группы аналогичны описанным в примере . В то же время в данной се.рии летального исхода и паралича задних конечностей у крыс не наблюдалось.1324053 лабораторному животному внутрибрюшинно вводят З-амино, 2, 4-триазол и клофибрат соответственно в дозе 500 - 1000 мг/кг и 250 - 400 мг/кг массы тела в течение 4 - 6 недель. Формула изобретения Группа животных Фермент 690 1 82 Креатинфосфокиназа Лактатдегидрогеназа Малатдегидрогеназа Глутаматдегидрогеназа 12,3 + 1,2 9,0 + 1,6 10,2 + 1,1 11-глутамилтранспептидаза 0,8 + 0,3 1,0 + 0,3 0,4 + 0,2 0,6 + 0,1"Р 0,05;Р0,01,Составитель М. ПознякРедактор М. Петрова Техред И. Верес Корректор Л. ПилипенкоЗаказ 2969/54 Тираж 433 ПодписноеВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий113035, Москва, Ж - 35, Раушская наб., д. 4/5Производственно-полиграфическое предприятие, г. Ужгород, ул. Проектная, 4 Способ моделирования миодистрофии поперечно-полосатой мускулатуры, отличающийся тем, что, с целью ускорения способа,404 + 35 293 + 25 342 + 23 417 + 33 284 + 28 335 + 26 421 + 79 280 + 21 368 + 21 501 + 64 430 + 35 8,6 + 1,6