Способ защиты грамотрицательных бактерий от теплового воздействия

(54) (57) СПОСОБ ЗАЩИТЫ ГРАМОТРИЦАТЕЛЬНЫХ БАКТЕРИЙ ОТ ТЕПЛОВОГО ВОЗДЕЙСТВИЯ с использованием защитных добавок, вводимых в бактериальную суспензию до действия температуры, о тл и ч а ю щ и й с я тем, что, с целью повышения выживаемости клеток грамотрицательных бактерий при 55 о60 С, в бактериальную суспензию перед действием высокой температуры вводят аминобензгидразид в концентрации 1-5 ф 10 М. ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ СССРПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ(71) Всесоюзный научно-исследовательский институт особо чистых биопрепаратов(56) Соггу 1. ТЬе еггесг оЕ чагег асГдч 1.Гу оп ГЬе аеас гез 1 зГапсе ой ГасгеФ 1 а. 1 п "Уагег ге 1 агопз оЕ Гоойз". 1,опдоп - Нею,1 огЕ - Бап Ргапсдзсо, Асад. Ргезз., 1975, р. 325.Беккер М.Е., Дамберг Б.Е., Рапопорт А.И. Анабиоз микроорганизмов. Рига, Зинатне, 1981. бай С 12 Ж 1/00, 1/04 // //(С 12 Н 1/00, С 12 К 1:185; 1:42. 1214754 Продолжение табл. етения является ра х 10 12,0+2,0 ф 10 8+ О,10 8,00,810 10 4, 5+0,4 10 0 клет протект оль АБГОценка ц а 2 б жизнеспособ вод т льтур на агар пробах вместо ысе лась путЭндо. ВАБГ добачества фРеэулемость б онтрольных ляли экви зиологиче а иологическрация (КОЕпрогрева к КонцентрацияАБГ всуспензии алентные коли"кого раствора.ия АБГ на выжив осле веы влия ичеОпыт нтро ействии 0 а блица ст акерий Кратность 4увеличения 10 М 2,210 10 5 числ Контра 10 выхеток 50 12,0 2,8 10 З,О 10 0,6 10 3,2 1,0 х АБГ менееувеличение чисв 1,5 раза поа повышение,4. При концентрац 0 М наблюдает живых клеток л внению с контр центрации АБГ 5 ла 9+0,210 О О+-1,5 10 51,5 10 1 шьолем до 0 2,20,1 10 ко Изобретение относится к микробиологии, а именно к способам защиты микроорганизмов от теплового воздей ствия при получении бактериальных препаратов,Целью иэобр зработка способа повышения выживаемости клеток грамотрицательных бактерий при тепловом воздействии, при температуре 55-60 С.Сущность изобретения заключается в том, что для повышения выживаемости клеток грамотрицательных бакте рий при 55-60 С используют в качестве защитного средства аминобензгидразид (АБГ), который добавляют в бактериальную суспензию до воздействия температуры в концентрации 1-510 м.П р и м е р 1. В независимых сериях опытов культуры клеток ЕзсЬег- сЬта со 1 Мс различной исходной активностью подвергались температурОным воздействиям 60 2 С в течение 5 мин или 55 С в течение 15 мин, Раствор АБГ добавляется до конечной концентрации 10М. Исходная концентрация бактерий составляла 5 " л ок/мл. Соотношение клеток13 и ора составляло 10 клеток/ ерий после тепловых возедставлены в табл.1. сло колонкообразующииниц после тепловыхвоздействий П р и м е р 2. В культуральнуюжидкость, содержащую взвесь клеток Е.со 1 д М.7, вносили добавки АБГ в различных концентрациях. СоотношеЮние клеток и протектора составляло 1,0-0,210 клеток/моль АБГ.Результаты влияния различных концентраций АБГ на выживаемость бактерий после тепловых воздействий представлены в табл.2,физиологическийраствор 20 физиологическии раствор + 510 М АБГ 436 Физиологическийраствор + 103глицерина 260Составитель В.Соинаактор Л.Повхан Техред С.Мигунова Корректор А.Зимокосов Подписноекомитета СССРоткрытийская наб д.4/5 57/38 Тираж 490ВНИИПИ Государственного по делам изобретений и 113035, Москва, Ж, Рауш каз Филиал ППП "Патент", г.ужгород, ул.Проектная, 4 увеличивает выживаемость бактерий в 5,5 раза.П р и м е р 3. Было проведено сопоставление защитного действия АБГ с применяемыми в практике протекторами, Результаты влияния АБГ и глицерина на жизнеспособность клеток Е,со 1 Мпосле их прогрева при 55 С в течение 15 мин представлены в табл.3.У П р и м е р 4. В условиях приме. ра 1 проводились опыты поопределению влияния АБГ на защиту от теплового воздействия яеггаГа шагсезсепз. Полученные результаты показали, что число колониеобразующих единиц при добавке 1 О М АБГ составляет после нагрева 5,0+0,9 10, тогда как беэ добавок АБГ эта величина равна 1, 1+ фО 410 эПредлагаемый способ, предусматривающий использование в качестве протектора аминобенэгидразида позволяет повысить выживаемость клеток грамотрицательных бактерий после теплового воздействия почти вдвое по сравнению с применяемым в практике протектором-глицерином.Использование в качестве защитной добавки аминобензгидразида в значительно меньших концентрациях по сравнению с глицерином позволяет получить более чистые бактериальные препараты, что имеет большое значение для их дальнейшего использова" ния.