Способ дифференциальной диагностики тиреотоксикоза

сОюз ссеетснихсввлепниснихРЕСПУБЛИК 3(5 О А 6 В 10 00 дов кринологии, 1970 госудАРстеенный комитет сссРпо делАм изОБРетений и отнРьпий(71) Ростовский ордена Дружбы наромедицинский институт(54)(57) СПОСОБ ДИФФЕРЕНЦИАЛЬНОЙДИАГНОСТИКИ ТИРЕОТОКСИКОЗА путембиохимического исследования в кровФерментов, о т л и ч а ю щ и й с я,ЯО 1097282 А тем, что, с целью повьппения чувствительности и ускорения способа, в лейкоцитах и эритроцитах определяют активность пируватдегидрогеназы (ПДГ) и лактатдегидрогенаэы (ЛДГ) и при снижении активности ПДГ в лейкоцитах на 35-377 и в эритроцитах на 13-143, ЛДГ в лейкоцитах на 26- 307 и повьппении активности ЛДГ в эритроцитах на 36-927, по сравнению3с нормой диагностируют тиреотокснкоз 1 степени, а при снижении в лейкоцитах активности ПДГ на 56-583, ЛДГ на 57"60 Х, в эритроцитах ПДГ на 33-353, ЛДГ на 40-463 - тиреотоксикоз 11-111 степени.10 15 20 30 35 25 40 45 50 551 ОИзобретение относится к медицине,преимущественно для совершенствования метода диагностики нарушенийфункции щитовидной железы.Известен способ диагностики тиреотоксикоза путем биохимического исследования крови, в частности изучениягликопротеидного обмена Г 13,Известен также способ диагностики нарушений функции щитовидной железы на основе определения активнос-ти сывороточных глютамикоаланиновойи глютамикоаспарагиновой трансаминаз Г 23,Недостатком известных способовявляется отсутствие специфичностии невозможность выявления начальныхстадий тиреотоксикоза.Цель изобретения - повышение чувствительности и ускорение способадиагностики тиреотоксикоза.Указанная цель достигается тем,что согласно способу дифференциальнойдиагностики тиреотоксикоза путембиохимического исследования в кровиферментов в лейкоцитах и эритроцитах(ЛДГ) и при снижении активности ПДГ.в лейкоцитах на 35-37 и в эритроцитах на 13-14 ., ЛДГ в лейкоцитах на26-30/ и повышении активности ЛДГв эритроцитах на 36-92 по сравнениюс нормой диагностируют тиреотоксикоз1 степени, а при снижении в лейкоцитах активности ПДГ на 56-58 , ЛДГ на57-60%, в эритроцитах Щ 1 Г на 33-35 ,ЛДГ на 40-46 - тиреотоксикоз 11-111степени.Способ осуществляется следующимобразом.У больного забирают из вены 5 млкрови в пробирку, содержащую 0,04 млгепарина и 1,5 мл физиологическогораствора. Путем центрифугирования илиотстаивания при комнатной температуре в течение 10-20 мин отделяют плазму, из которой центрифугированиемпри 1000 об/мим в течение 10-12 минвыделяют фракцию лейкоцитов. Лейкоциты освобождают от примеси эритроцитов с добавлением хлористого аммония и последующим центрифугированием.Лейкоциты промывают физиологическимраствором и осаждают центрифугированием при указанных выше параметрах.Эритроциты очищают от примеси других форменных элементов путем 2-3 кратного отмывания физиологическим 97282 2 раствором с последующим центрифугированием. После последнего центрифугирования приготавливают лиэат лейко"цитов в 1,5 мл дистиллированной водыи гемолизат эритроцитов в разведении1:20.Активность ПДГ и ЛДГ определяютс помощью тетразолиевого метода.Для этого 0,4 мл лизата или гемолизата инкубируют в среде, содержащейпируват (для определения ПДГ) илилактат (для ЛДГ) и активаторы: магний,АТФ, фосфатный буфер с рН 7,4 и 1 мл01 -ного тетразолиевого синего,Спектрофотометрически при длине волны 570 нм смотрят изменение плотности против воды. Результаты выражаютв ед./мл. Для определения ЛДГ в инкубационную среду помимо активаторовдобавляют 0,02 М НАД.Установлено, что у больных с первой степенью тяжести тиреотоксикозаактивность ЛДГ в лейкоцитах выявляется в пределах 108-116 ед/мл, а вэритроцитах 566-630 ед./мл, в товремя как у практически здоровыхлюдей эти предельные границы, активности фермента в лейкоцитах и эритроцитах 155-158 и 416-482 ед./мл соответственно. Активность ПДГ в лейкоцитах у больных с первой степеньютиреотоксикоза выявляется в пределах 2733 ед,/мл и в эритроцитах 232-245 ед./мл,в то время как для практически здоровых людей эти предельные границы активности фермента в лейкоцитах и эритро.цитах 43-51 и 269-285 ед./мл, соответственно. Таким образом, при снижении активности НДГ в лейкоцитах иа 35-37 ив эритроцитах на 13-1430 ЛДГ в лейкоцитах на 26-30 и повышение ЛДГв эритроцитах на 36-92 по сравнениюс нормой ставят диагноз: тиреотоксикоз 1 степени, а при снижении в лейкоцитах активности ПДГ на 56-58%,ЛДГ - на 57-60 , в эритроцитах ПДГна 33-35 , ЛДГ на 40-46 ставят диагноз: тиреотоксикоз П-,111 степени.П р и м е р 1. Больная Г. 36 лет,поступила в эндокринологическое отдление с жалобами на общую слабость,сердцебиение, раздражительность, потливость, бессоницу. Боли ноющего характера в области сердца, В течениепоследнего года стали появляться несколько раз в неделю приступы учащен-ного сердцебиения,Составитель И. ЕмельяненкоРедактор М, Товтин Техред Л.Мартяшова Корректор А, Ференц Заказ 4086/4 Тираж 688ВНИИПИ Государственного комитета СССРпо делам изобретений и открытий113035, Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5 Подписное Филиал ППП "Патент", г. Ужгород, ул, Проектная, 4 3 1097Объективно: кожа влажная, щитовидная железа внешне не изменена, незначительный блеск глаз, пульс 96 уд,/мин, АД 110/60 мм рт. ст, В связи с подозрением на тиреотоксикоз из локтевой вены взято 5 мл крови для определения в лейкоцитах и эритроцитах активности ПДГ и ЛДГ. Результаты исследований: активность ПДГ в лейкоцитах 28,2 ед./мл, т.е. на 357 ниже, чем 1 О у здоровых людей, в эритроцитах 232,4 ед./мл, что на 137. ниже, активность ЛДГ в лейкоцитах 110,3 ед,/мл, что на 267 ниже, чем у здоровых людей, тогда как в эритроцитах активность ЛДГ повышена до 566,2 ед./мл, что на, 367. превышает данные, характерные для группы здоровых людей. Выявленный характер изменения активности ферментов в клетках крови в сочетании с данными клинического обследования позволил поставить диагноз нарушения функции щитовидной железы с тиреотоксикозом 1 степени.П р и м е р 2. Больная И. 36 лет. 2 Поступила в эндокринологическое отделение с жалобами на раздражительность, потливость, утомляемость, го 282 4ловные боли, сердцебиение. Похудела за последний год на 10 кг. Считаетсебя больной 3 года.Данные обследования: на ЗКГ диффузные изменения в миокарде, пульс 100 уд./мин. АД 140/80 мм рт. ст. Лабораторное обследование: активность ПДГ и ЦДГ в лейкоцитах соответственно 19 и 65 ед./мл, что на 59,67 и 58,47. ниже, чем у здоровых людей, в эритроцитах эти величины соответствуют 187 ед./мл и 250 ед./мл, что ниже на 33 и 407., чем у здоровых людей. На основании лабораторных данных поставлен диагноз: тиреотоксикоз 11-111 степени.Предлагаемый способ диагностики тиреотоксикоза в 7 раз более чувствителен, чем известный, и позволяет выявлять нарушения функции щитовидной железы на несколько месяцев ранее, в зависимости от индивидуального течения и тяжести развития заболевания у каждого больного (в среднем от 5 до 12 мес). Это дает возможность своевременного начала правильного лечения и предупреждения перехода заболевания во 11 и 111 стадии.