Способ диагностики степени активности воспалительного процесса

,127870 ПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯВТОРСНОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ ГИНС"с,ститут акин во СС О, 9 ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССРПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИИ(54) СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ СТЕПЕНИ АКТИВНОСТИ ВОСПАЛИТЕЛЬНОГО ПРОЦЕССА(57) Изобретение относится к медицине, в частности к педиатрии, и может быть использовано для диагностики степени активности воспалительного процесса. Цель изобретения - повышение точности и упрощение диагностики у детей, Для этого к сыворотке,взятой на анализ периферической(5) 4 С О И 33/49, А 61 К 3 крови после центрифугации, добавляют 0,01 М боратный буфер (рН 8,4), Перемешивают, переносят в две пробирки, В одну приливают забуференный 3,57-ный раствор полиэтиленгликоля (рН 8,4) с мол,м.6000, в другую - 0,01 М боратный буфер (контроль), После инкубации на спектрофотометре определяют оптическую плотность раствора, содержащего полиэтиленгликоль, при 450 нм в кюветах с длиной оптического пути 1 см, против конт. роля. Вычисляют разность показателей оптической плотности и результат выражают в условных единицах, При увеличении экстинции на 0,045 - 0,095 усл,ед, диагностируют минимальную, на 0,096 - 0,2 усл,ед, умеренную, на 0,201 усл.ед. и более максимальную степень активности воспалительного процесса, 2 табл, 1278709Изобретение относится к.медицине,преимущественно к педиатрии, и может быть использовано в клиническойпрактике для диагностики степени активности воспалительного процесса,Целью изобретения является повышение точности и упрощение диагностики у детей.Способ осуществляют следующим образом. ОВ пробирку размером 1 ООк 8 мм ик 0,2 мл сыворотки крови (полученнойиз 0,5-0,8 мл периферической кровииз пальца после центрифугирования1 О мин при 1500 об/мин,) добавляют 50,4 мл О,Д М боратный буфер (рН 8,4)Тщательно перемешивают и переносятпо 0,20 мл в две пробирки, В одну изних приливают 2 мл Э,85 7-ного раст"вора полиэтиленгликоля (мол.м,6000) 20на О,01 М боратном буфере (рН 8,4),а в другую - 2 мл 0,01 М боратногобуфера (контроль), Тщательно перемешивают и оставляют на 1 ч при комнатной температуре, После инкубациийа спектрофотометре определяют оптическую плотность раствора, содержащего полиэтиленгликоль, при 450 нмв кюветах с длиной оптического пути1 см против контроля, Вычисляют разность показателей оптической плотности и результат выражают в условных единицах оптической плотности,При увеличении величины экстинцииот 0,045 до 0,095 усл, ед. диагности- Зруют минимальную, от 0,096 до0,2 усл,ед. - умеренную и более0,201 усл,ед. - максимальную степеньактивности воспалительного процесса,Определение циркулирующих иммун бных комплексов в сыворотке кровиздорового человека,В капилляр набирают иэ пальца 0,5-0,8 мл периферической крови и переносят в центрифужную пробирку.Отстаивают в течение 1 ч и центрифугируют 1 О мин при 1500 об/мин, Полученную сыворотку крови в объеме 0,2 мл переносят в сухую пробирку и добавляют 0,4 мл 0,01 М боратного буфера (рН 8,2), Перемешивают и пе- реносят по 0,2 мл в две .пробирки, В одну из пробирок приливают 2 мл 3,853-ного раствора полиэтиленгликоля, в другую - 2 мл 0,01 М боратного буфера, Перемешивают и оставляют на 1 ч при комнатной температуре, Определяют на спектрофотометре оптическую плотность обоих растворов при длине волны 450 нм в кювете с длиной оптического пути 1 см,Оптическая плотность смеси, содержащей сыворотку крови и растворполиэтиленгликоля, оказалась равной0,012 усл,ед что соответствовалосодержанию циркулирующих иммунныхкомплексов у здоровых людей,Определение циркулирующих иммунных комплексов в сыворотке кровиу 21 больных в возрасте от 1 мес,до 16 лет с различными заболеваниямивоспалительного характера (пневмония, пиелонефрит, ревматизм и др,)позволило установить, что по мереувеличения .степени активности воспалительного процесса наблюдается болеевыраженное повышение уровня комплексов антиген-антитело в сывороткекрови.В табл,1 приведены данные об уровне циркулирующих имунных комплексов в сыворотке крови в зависимости от степени активности воспалительногопроцесса,Из данных табл.1 следует, что уровень циркулирующих иммунных комплексов более высокий при большей степени активности воспалительногопроцесса,Коэффициент корреляции, вычисленный на основе полученных данных и отражающий степень взаимосвязи между содержанием циркулирующих иммуиных комплексов и степенью активности воспалительного процесса, равен 0,84 (Р (0,001).Таким образом, установлена зависимость; чем выше содержание циркулирующих иммунных комплексов в сыворотке крови, тем выше степень активности воспалительного процесса.Результаты оценки степени активности воспалительного процесса по содержанию циркулирующих иммунных комплексов сравнивали с критериями активности указанных заболеваний, основанных на комплексном клиниколабораторном обследовании и включающих более 20 различных показателей.В зависимости от содержания в сыворотке крови циркулирующих иммунных комплексов и степени активности воспалительного процесса по комплексу показателей больные были распределены на 4 группы: в 1-ю и во 2-ю вошли больные с низким содержанием ком 1278709плексов (менее 0045 и в пределах 0,045-0095 усл,ед,), в 3-ю со средним (0,096-0,2 усл,ед,) и в 4-ю - с высоким уровнем (выше 0,201 услед.).Гистограмма распределения больных в зависимости от степени активностивоспалительного процесса и уровня циркулирующих иммунных комплексов приведена в табл, 2,5 ОП р и м е р 1, Ребенок Г-коАлена, 12 лет, находилась в клиникес диагнозом ревматизма, неактивнаяфаза, Определение циркулирующих иммунных комплексов - 0,032 ед. экстинции, что свидетельствовало оботсутствии активности воспалительного процесса и согласовалось с данными клинико-лабораторного обследования.П р.и м е р 2, Ребенок П-н Т11 лет, находилась в стационаре поповоду острого первичного пиелонефрита, активная стадия, активность1 степени, без нарушения функции почек, хронического компенсированноготонзиллита,При исследовании циркулирующихиммунных комплексов показатель экстинции равен 0,045 ед., что соответствовало минимальной степени активности воспалительного процесса, Полученные результаты определения иммунных комплексов согласовались срезультатами клинико-лабораторного 35 40 50 55 Из данных, представленных в табл,2, следует, что только у 5,67. обследованных больных отмечено расхождение диагноза в определении сте пени активности воспалительного процесса по комплексу показателей и по уровню циркулирующих иммунных комплексов, Сравнительный анализ показал, что известный способ (определе ние количества ранних розеткообраэующих нейтрофилов) значительно уступает по точности диагностики предлагаемому способу, Согласно полученных результатов известный способ 25у 65,3 Е обследованных больных не позволил определить степень активности воспалительного процессаВ качестве примеров использования показателя циркулирующих иммунных комплексов для диагностики степени активности воспалительного процесса можно привести следующие наблюдения,обследования - у ребенка диагностирована минимальная степень активности воспалительного процесса,П р и м е р 3. Ребенок Л-коАлександр, 9 лет, находился в клинике с диагнозом хронического вторичного пиелонефрита, гидронефроз правойпочки П- степени, Данные клинико-лабораторного обследования указывалина наличие у ребенка минимальнойстепени активности воспалительногопроцесса (показатели СОЭ, острофазовые реакции, результаты анализовбиохимических и лабораторных), Содержание циркулирующих иммунных комплексов - 0,078 ед соответствоваломинимальной активности воспалительного процесса,П р и м е р 4, Ребенок С-ва Лена, 10 лет, находилась. в стационаре по поводу ревматизма, активная фаза, миокардит, полиартрит, активность 1 степени, острое течение, Но. Результаты комплексного клинико-лабораторного обследования указывали на наличие минимальной степени активности воспалительного процесса у ребенка, Величина экстинции составляла 0,095, что соответствовало граничному значению минимальной степени активности воспалительногопроцесса,П р и м е р 5, Ребенок Е-ва Елена, 14 лет, находилась в клиникепо поводу хронического вторичногопиелонефрита, нефроптоз Ш степени,активная стадия, активность П степени, без нарушения функции почек,В сыворотке крови содержание циркулирующих иммунных комплексов /0,096ед.экстинции/ указывало на наличиеу больной умеренной степени активности воспалительного процесса, Послеклиниколабораторного обследованияэто было подтвержденоП р и м е р 6, Ребенок Н-в Александр, 11 мес., находился в клиникепо поводу острой очаговой бронхопнев"монии. Содержание циркулирующих иммунных комплексов - 0,154 ед,экстинции, что свидетельствовало об умеренной степени активности воспаления. Это было подтверждено резуль-татами клинико-лабораторного обследования.П р и м е р 7, Ребенок Б-а Ирина, 10 лет, находилась в клинике по278709 Таблица Уровень циркулирующих имунных комплексов в сыворотке крови, ед .зкстинции, при степени активности воспалительного процесса Клинич ескиегруппы больных ремиссия минимальная умеренная максимальная 12 14 10 Ревматизм 0,13+0,02 0,57+0,08 и = 44 0,033+0,006 0,053+0,01 Очаговая бронхопневмония 10 12 0,027+0,005 0,049+0,008 Оф 1+0,01 0,25+0,08 и = 36, Острый пиелонефрит и = 47 13 13 0,038+0,005 0,068+0,08 0,16+0,03 0,26+0,06 Хронический пиело.нефрит 12 35 22 17 0,041+0,004 0,062+0,01 0,12+0,008 0,24+0,03 и=86 поводу хронического первичного пиелонефрита, активная стадия, активностьП степени, без нарушения функции почек, хронический глубокий кариес,энтеробиоз, Уровень циркулирующих 5иммунных комплексов - 0,2 ед.экстинции, соответствовал П степени активности воспалительного процесса.Комплексная клинико-лабораторнаяоценка стеПени активности воспали- Отельного процесса позволила подтвердить наличие у больной умереннойстепени воспаления,П р и м е р 8Больная У-а Таня, .12 лет, находилась в клинике с 5диагнозом ревматизма, активная фаза,активность Ш степени, эндомиокардит,полиартрит, острое течение, К. Содержание циркулирующих иммунных комплексов - 0,201 ед,экстинции, По результатам определения иммунных комплексов и данным клинико-лабораторного обследования у ребенка установлена максимальная степень воспалительного процесса,П р и м е р 9. Ребенок К-ва Таня, 8 лет, находилась в нефрологическом отделении по поводу хронического обструктивного пиелонефрита, активная стадия, активность Ш степени, рецидивирующее течение, нарушение функционального состояния почек П степени, Уровень циркулирующих иммунных комплексов (0,214 ед,экст,) указывал на наличие у больной максимальной степени воспалительного процесса и был подтвержден результатамиклинико-лабораторного обследованияФормула изобретения Способ диагностики степени активности воспалительного процесса путем исследования периферической крови, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что, с целью повышения точности и упрощения диагностики у детей, сыворотку крови обрабатывают 3,5 Е-ным забуференным раствором полиэтиленгликоля с мол. массой 6000 с последующим определением величины экстинции и при ее увеличении по сравнению с исходным значе-нием на 0,045-0,095 усл. ед. диагностируют минимальную степень, при увеличении на 0,096-0,20 усл, ед. умеренную степень и при увеличении на 0,201 и более усл. ед. - макси-. мальную степень активности воспали.тельного процесса.1278709 Т а б л н ц а 2 Уровень циркулирующих иммунных комплексов, усл.ед. Активность воспалительного процесса более 0,201 нее,045 Клинико-лабораторная ремиссия 64 нимальн Умеренная 53 Максимальна Составитель П,Бонарцедор Техред И.Попович Редактор А,Подписное Тираж 778 . НИИПИ Государственного комитета ССС по делам изобретений и открытий осква, Ж, Раушская наб д. 4/13035,Производственно-полиграф ское предприя Заказ 6826/40В 0,045 + 0,0 0,095 0,2 Корректор М. Максимишинец г,ужгород, ул,Проектная, 4