Среда для определения активности антибиотиков

СОЮЗ СОВЕТСКИХСОЦИАЛИСТИЧЕСИИРЕСПУБЛИК 1) С 12 Я 10 СУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССРО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИЙОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯАВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ И"ИТВОА Кащ ательнтиго Зк 0-5 в 0 0-3,00-20,0 о 1 л(71) Всесоюзный научно-исследовский технологический институт абиотиков и Ферментов медицинсконазначения(56) 1, Государственная ФармакопеСССР, Х издание, 1968, с. 948,2, Каталог сухих питательныхсред, выпускаемых в СССР для медицинской бактериологии, Вып.1, М.,1980, с. 21-22 (прототип),(54) (57) СРЕДА ДЛЯ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ТИВНОСТИ АНТИБИОТИКОВ, содерж источник азота, натрий ФосФорно кислый двузамещенный, агар-агар дистиллированную воду,о т л и ч ю щ а я с я тем, что, с цельюия точности определения, о естве источника азота содеаммоний уксуснокислый при см качественном соотношении кентов, г/л;Аммоний уксуснокислыйНатрий фосФорнокислый двузамещенный 2, Агар-агар 15, Дистиллированнаявода ДИзобретение относится к медицинской промышленности и касаетсяопределения антибиотической активности,Известна среда для определенияактивности антибиотиков, содержащаябульон Хоттингера, БаНР 04 агарагар 11,Известна также среда для определения активности антибиотиков, содержащая панкреатический гидролиэат 10кильки, хлористый натрий, натрий АосАорнокислый двузамещенный, агар-агари дистиллированную воду 21.Однако известные среды не обеспечивают высокой точности определения из-эа нестандартности источника азота,Цель изобретения - повышение точности определения.Эта цель достигается тем, что пи рОтательная среда для определения активности антибиотиков, содержащаяисточник азота, натрий фосфорнокислый двузамещенный, агар"агар и дистиллированную воду. в Качестве источника азота содержит аммоний уксуснокислый при следующем количественном соотношении компонентов, г/л;Аммоний уксуснокислый 3,0-5,0Натрий фосфорнокисЗОлый двузамещенный 2,0-3,0Агар-агар 15,0-20,0Дистиллированнаявода До 1 л35П р и м е р 1. Для определения биологической активности неомицина и стрептомицина питательную среду следующего состава, г/л; аммоний уксуснокислый 5, натрий Фосфорно О кислый двузамещенный 3, агар-агар 20, вода дистиллированная до 1 л, рН после стерилизации 7,8-8,0, расплавляют на водяной бане, охлаждают до 70 С и вносят.1 В глюкозы и 2108 спор 45 Эас 122 ия БцЬ 121 а,АТСС бб 33 на 1 мл среды. Засеянную питательную среду разливают по 10 мл (один слой) в стерильные чашки, Петри, После застывания питательной среды делают лунки и подсушивают чашки со средой при комнатной температуре 15-20 мин, Далее лунки заполняют растворами контрольной (1 мкг/мл) и испытуемой концентрации антибиотиков в фосфатном буфере Р 4, Затем чашки помещают в термостат при 37 С После 18- 20 ч инкубации замеряют диаметры зон задержки роста тест-микроба и рассчитывают активность испытуемо.го образца по предварительно построенной стандартной кривой с использованием следующих концентраций неомицина, мкг/мл; 0,5; 0,75, 1,0; 1,2и 1,5 в фосфатном буфере Р 4,Аналогичным образом определяютактивность стрептомицина.Для построения стандартной кривойстрептомицина берут такие же концентрации, как и для неомицина. Контрольная концентрация неомицина истрептомицина 1 мкг/мл в фосфатномбуфере Р 4,П р и м е р 2Для определениябиологической активности мономицинаи канамицина используют среду следующего состава, г/л; аммоний уксуснокислый 4 , натрий фосфорнокислыйдвуэамещенный 2,5, агар-агар 18, водадистиллированная до 1 л,рН после стерилизации 7,8 - 8,0. Условия проведения анализа те же, что в примере 1.Для построения стандартной кривоймономицина и канамицина используютследующие концентрации этих антибиотиков, мкг/мл; 1,0, 1,5, 2,0; 3,0и 4,0 в фосфатном буфере Р 4. Контрольная концентрация мономицина иканамицина 2 мкг/мл,П р и м е р 3, Для определениябиологической активности гентамицина,тобрамицина и амикацина используютпитательную среду следующего состава, г/л; аммоний уксуснокислый 3;натрий Фосфорнокислый двузамещенный2, агар-агар 15, вода дистиллированная до 1 л; рН посде стерилизации7,8-8,0. Условия проведения анализате же, что в примере 1, Для построения стандартной кривой гентамицина,тобрамицина и амикацина используютследующие концентрации этих антибиотиков мкг/мл; 0,5; 0,75; 1,0,1,2,1,5 в Фосфатном буфере Р 4. Контрольная концентрация гентамицина, тобрамицина и амикацина 1 мкг/мл,Сравнительные данные по воспроизводимости результатов и точностиопределения на примере определениябиологической активности неомицинаи стрептомицина представлены в таблице. Использование изобретения позволяет снизить вариабелъность реэульта" тов анализа, что повышает точность определения, исключить иэ состава среды пищевое сырье, что удешевляет среду и упрощает способ ее приготов. ления,1096281 Результаты определения биологической активности аминогликозидов На среде по Гф Х На предлагаемой среде На среде прототипа У патии Антибиотик Числооп- ре- еРеэультатмкг/ ле- ний 1 1,0 13 677,5 12,1 2,0 16 675,8 14,6 10,0 12 676,8 25,2 2 1,0 10 7247 13,4 2,0 16 722,0 18,5 10,0 12 723,0 18,5 Стрептомицин 9 697,2 5,8 2,0 12 688,8 21,4 10,0 12 690,2 20,4 3 1,0 1 1,0 10 702,0 6,7 4,0 10 702,5 11,2 10,0 12 702,0 12,0 2 1,0 10 647,5 6,3 4,0 10 647,5 12,4 10,0 12 648,0 118 Неомицин Составитель Г.СмирноваТехред С,Легеза Корректор А.Тяско Редактор Т,Портная Заказ 3744/18 Тираж 522 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж, Раушская наб., д, 4/5 Ф щеюш в + филиал ППП "Патент", г, Ужгород, ул, Проектная, 4онрольаяоненранятанара Число оп- ре- де- ле- ний Стан дарт ное от- кло- нение 5 Контрольнаяконцентрациястандарта Чис ло оп- ре- де- ле- ннй Реэуль тат Х мкг/ /мл Стан арт ное от- кло- нение 5 Х Контрольнаяконцентрациястандарта Резуль тат Х мкг/ /мл Стан дарт. ное от- кло- нение 5 у