Способ индикации нехолерогенных вибрионов эль-тор

) (11 1 04 Ни ИДЕТЕХЗЬСТВУ Н АВТОРСНО 1ГОСУДАРСТВЕННЬЙ НОМИТЕТ СССРПб ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ. И ОТКРЫТИЙ(21) 3444093/28-13.(56) 1, Быстрый Н.ф. Холерные бактериофаги, их классификация и перспективы использования для диагностики холеры. Авторевю. докт. дис, Саратов, 1974, с, 20-25 (прототип).(54) (57) СПОСОБ ИНДИКАЦИИ НЕХОЛЕРОГЕННЫХ ВИБРИОНОВ Эль-Тор путем выращи вания исследуемой культуры на щелочном агаре, о т л и ч а ю щ и йс я тем, что, с целью ускорения и упрощения способа, культуру со щелочного агара пересевают в среду Рисса с 0,8-1,27. маннита, посев инкубируют и индикацию проводят по изменению цвета среды в течение 2-4 ч с момента посева.Н р и м е р 1. На щелочной агар (рН 7,6) засевают 42 холерогенных и 31 нехолерогенный штаммы вибрионов Эль-Тор. Спустя 18 ч вибрионы пересевают бактериологи 56 Изобретение относится к медицинской микробиологии, а именно к ускоренным методам обнаружения нехолерогенных вибрионов Эль-Тор.Известен способ индикации нехо лерогенных вибрионов Зль-Тор путем выращивания исследуемой культуры на щелочном агаре 1 .Однако известный способ длителен и сложен в осуществлении.Целью изобретения является ускорениеги упрощение способа.Цель достигается тем, что согласно способу индикации нехолерогенных вибрионов Эль-Тор путем выращивания 15 исследуемой культуры на щелочном агаре, культуру со щелочного агара нересевают в среду Гисса с 0,8-1.27 маннита, посев инкубируют и индикацию проводят по изменению цвета 20 среды в течение 2-4 ч с момента посева.Способ осуществляют следующим образом.Среду предварительно проверяют 25 на пригодность для постановки данного теста с помощью заведома нехолерогенного и холерогенного штаммов. Среда может быть использована для обнаружения нехолерогенных штаммов, 36 если контрольный нехолерогенный штамм изменяет ее цвет в течение 2-3 ч, а холерогенный - в течение 6 и более часов.Посевы помещают в термастат при 37 С и ежечасно контролируют йзменеоние цвета среды. Если при очередном просмотре наблюдается очень слабое изменение цвета среды, то следующее наблюдение проводят через 30 мин. Для контроля в пробирку со средой засевают нехолерогенный штамм, время изменения которым цвета среды известно. Кроме того, вместе с посевами ставят пробирку с незасеянной 45 средой - контроль среды, ее цвет при стоянии в термостате при 37 С не должен меняться,ческой петлей в пробирки со средойГисса с 0,8 маннита и ставят втермастат при 37 С. Изменение цвеота среды, свидетельствующее о расщеплении маннита, регистрируют ежечасно, а в некоторых случаях и че-.рез 30 мин. В таблице представленысроки расщепления маннита холерогенными и нехолерогенными вибрионами.в средах с различной концентрацией его.П р и м е р 2. 42 холерогенныхи 31 нехолерогенный штаммы вибрионов Эль-Тор засевают на щелочнойагар (рН 7,6). Через 18 ч вибрионыпересевают бактериологической петлейв пробирки со средой Гисса с 17маннита. Иетодика учета результатов аналогична примеру 1,П р и м е р 3. 42 холерогенныхи 31 нехолерогенный штаммы вибрионов Зль-Тор засевают на щелочнойагар (рН 7,6). Через 18 ч вибрионыпересевают бактериологической петлей в пробирки со средой Гисса с1,27. маннита. Иетодика учета результатов по примеру 1Представленныев таблице данные свидетельствуюто том, что нехолерогенные вибрионырасщепляют маннит в течение 2-4 ч,а холерогенные вибрионы в такиесроки маннит не расщепляют.На основании проведенных экспериментов штаммы вибрионов Эль-Тор,расщепляющие маннит с образованиемкислых продуктов и изменяющие вследствие этого цвет среды в течение2-4 ч, следует считать нехолерогенными. Вибрионы Эль-Тор, расщепляющие маннит и изменяющие цвет средыв более поздние сроки, целесообразно изучать путем заражения кроликов-сосунков.Предлагаемый ускоренный способобнаружения авирулентных вибрионовЭль-Тор прост, экономичен и можетбыть использован для экспресснойоценки эпидемической значимостивибрионов Зль-Тор. Его применениебудет способствовать сокращениючисла штаммов, нуждающихся в изучении более длительным, трудоемкими дорогостоящим способом на кроликах-сосунках,1090718 2 2,5 3 4 Группывибрионов Нехолерогенные 0,8 1,0 1,2 Холерогенные 0 0,8 1,0 0 1,2 КоРРектоР В, Гирняк Редактор С. Титова Техред М.Пароцай Заказ 2769/1 Тираж 525 ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам иаобретеНий и открытий 113035, Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5Подписное филиал ППП "Патент"., г. Ужгород, ул. Проектная, 4 Концентрацияманнита,Х Сроки расщепления маннита, ч 5 6 7 8 9 10 8 16 5 2 0 0 0 0 0 0 8 16 5 . 2 0 0 0 0 0 О.8 16 5 2 0 0 0 0 0 0 0 0 0 5 7 20 4 5 1 0 0 0 5 7 20 4 5 1 О 0 0 5 7. 20 4 5 1