Штамм erwinia саrотоvоrа мл-1-продуцент транс-элиминазы

ОПИСАНИЕИЗОБРЕТЕНИЯК АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ Союз СоветскихСоциалистическихРеспублик оо 960256(И) М. Кл. С 12 М 15/00 Государственный комитет СССР по делам изобретений и.открытий(088.8) Опубликовано 230982 Бюллетень Йо 35 Дата опубликованя описания 2309,82.Г.Лобанок, Л.С.Капитонова и Б.А. 1) Заявител Инстит кробиологии АН Белорусско 54) ШТАММ ЕКМ 1 И 1 А САКОТОЧОВА МЛ- ПРОДУЦЕН ТРАНС-ЭЛИМИНАЗЫ Изобретение относится к микробиологической промышленности, а именно к штаммам - продуцентам пектолитических.ферментов, и может найти применение в сельском хозяйстве при ма церации растительных тканей.Известны штаммы - продуценты пектолитических ферментов например, грибы рода ЙЬ 1 еор 05 1Однако такие штаммы выделяют пектолитические ферменты, обладающие невысокой активностью транс" элиминаэы.Известен штамм Вас 111 цэро 1 ущуха АТСС 21551, образующий пектолитические ферменты с активностью транс" элиминазы 2100-19000 ед/мг 2),Недостатками этого штамма являются дорогостоящая и сложная по составу питательная среда и низкая скорость роста (50-70 ч).Известен также штамм С 1 бэТг 1 Мца те 1 э 1 пешв-продуцент пектолити" ческих фержнтов, в том числе пектат-транс-элиминаэы с активностью в культуральной жидкости 360 ед/мл, а в ферментном препарате 700028000 ед/г 131Недостатками известного продуцента являются низкая активность трансзлиминазы и продолжительное. время ферментации,48 ч),Целью изобретения является получение нового штамма с высокой скоростью роста на дешевой питательной среде, синтезирующего пектолитические ферменты с высокой активностью.Предлагаемый штамм Еги 1 п 1 а сагойочога МЛвыделен из лесной подстилки в окрестностях Минска. Культура хранится .на картофельном агаре при 4-5 оС в музее культур института микообиологии АН БССР и в музее культур промьхаленных микроорганизм 15 .мов института "ВНИИГенетикан, коллекционный номер ЦМПМ В"2031. Штамм бактерии Егю 1 пхасаго 1 очога МЛобладает следующими моофологическими и физиолого-биохимическими призна ками.Морфологические признаки.Колонии бесцветные, выпуклые.пикообоазные к центру с волнистыми краями. Клеткиодиночные, пряьие 25 палочки 0,5-0,7 Х 1,5-1,9 мк, подвижные, с перитрнхиальнымн жгутиками ,(около 8), выраженной раковины не имеют, После ,5-дневного роста на картофельно-глюкоэной среде колонии достигают 12-16 мм в диаметое.960256 Составитель Е.ВоробьеваТехред М. Гергель КорректорЕ.Рошко Редактор Л. Лукач ж е аеюшкаЗаказ 7149/31 Тираж 505 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва Ж, Раушская наб., д. 4/5филиал ППП "Патент", г. Ужгород, ул. Проектная, 4 ФИзиолого-биохимические признаки. Аэооб, оптимум роста при 29 С.о .удельная скорость роста 0,35", оптимальный рН 7,0-7,2.Отношение к источникам углерода.1 В процессе роста интенсивно сбражи,вает глюкозу, сахарозу, лактозу., мальтозу, аоабннозу, усваивает глицерин, маннит. Этиловый спирт не сбраживает, крахмал не гидролиэует. При росте на картофеле образует .колонии в виде блестящего влажного налета.Отношение к источникам азота. Утилизирует нитраты, минеральные и органические соли, пептон, аспарагин, мочевину.Желатину разжижает.Молоко пептонизирует.Содержание ГЦ в ДНК 51 мол.Ъ.Ацетоин не образует.,Не выделяет Н,Максимальная температуре роста 40 С.П р и м е р 1. Посевной материал выращивают глубинным способом на качалке при 31 С и рН 7,0-7,2 в течение 16 ч на питательной среде следующего состава, г/лК НРО 4:7,0КН .РО 4 2,0МфЯ 04 7 Н.О б,2(ИНД 1 ЯО 4 1,0Свекловичныйжом 11,25Для выращивания культуры посевной материал вносится в питательную среду укаэанного состава в количестве.0,5%. Условия культивирования те же, что и для посевного материала.Ферментный препарат получают из культуральной жидкости путем осаждения этиловым спиртом в соотношении 1:3,5 с последующим высушиванием в вакуум-эксикаторе или путем распылительной сушки.Активность транс-элиминазы в ферментном препарате до 7200 ед/мг.За единицу активности принимается, количество фермента, вызывающее повышение оптической плотности реакционной смеси на 0,1 за 10 мин придлине волны 235 нм. Состав реакционной смеси: 0,6 мл пектата, 0,05 мл0,01 М СаС 1, 2,25 мл трис-буфера,5 рН 8,5. Реакционная смесь в количестве 2,9 мп вносится с 0,1 мл культуральной жидкости. в 10-миллиметровуюкварцевую кювету, смесь инкубируется при комнатной температуре в тече 10 ние 1 мин,П р и м е р 2. Условия культивирования те же, что и в примере 1.Питательная среда того же состава.Свекловичного жома берется 5 г/л,15 Активность транс-.элиминазы в фермент.- ном препарате до 3000 ед/мг.П р и м е р 3. Условия культивирования те же, что и в примере 1.Питательная соеда того же состава.. Свекловичного жома берется. 15 г/л.Активность транс- элиминазы в Ферментном препарате до 5000.ед/мг.ферментный препарат мацерирует стебли льна, клубни картофеля25 и морковь в течение 24 чТаким образом, реализация изобретения позволяет получить высокоактивный штамм,- продуцент. трансэлиминазыобладакиций высокой скоростью роста на дешевой питательнойф среде. Формула изобретенияЗ 5" Штамм Егэпп 1 а сагоочога МЛ(Музей культур промжщенных микроорганизмов института "ВНИИГенетикаф,коллекционный номер ЦМПМВ)продуцент транс-элиминазы40Источники информации,принятые .во внимание при экспертизе1. Авторское свидетельство СССР9 535347, кл. С 12 М 9/14. опублик.1976.2. Патент ФРГ Р 2054948,45 кл. С 12 0 13/10. опублик, 1972.3, Авторское свидетельство СССРР 622838, кл, С 12 Х 9/00, 1977.