Способ диагностики бактериальной дизентерии

Союз СоветскихСоциалистическихРеспублик ОП ИСАНИЕИЗОБРЕТЕНИЯК АВТОРСКОМУ СВИ ТЕЛЬСТВУ(22) Заявлено 002.80 (21) 2923158/28-13с присоединением заявки Но -(51)М. Клз А 61 К 39/00 ГосударствеиныЯ коиктет СССР яо делам нзобретеииЯ я открытнй(72) Авторы изобретения Рижский медицинский институт(54) СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ БАКТЕРИАЛЬНОЙ ДИЗЕНТЕРИИ Изобретение относится к области медицины и касается диагностики дизентерии.Известен способ диагностики бактериальной дизентерии путем определения5 в сыворотке крови специфических антител к дизентерийному возбудителю 13.Однако известный способ недостаточО но чувствителен и в 20"30 случаев дает ложноположительные результаты.Цель изобретения - повьааение чувствительности способа,Поставленная цель достигается тем, что способ осуществляют путем исследования крови, нз которой готовят монослой 10-ной взвеси эритроцктовбольного и добавляют аутологичные лимфоциты, предварительно сенсибнлизированные Оантигеном шнгелл флекснера, и комплемент, затем после инкубирования их 2-2,5 ч при 37 С и 17- 18 ч при 4 С подсчитывают количество участков лизированных эритроцитов и при повышении их числа на 10 по сравнению с контролем диагностируют дизентерию.Способ осуществляют следующим образом.30 Берут 10 мл крови в пробирку, содержащую 20 ед. кристаллического гепарина, и разделяют на Фракции лимфоцитов и эритроцитов путем центрифугирования при 1000 об/мин в течение 15 мин в градиенте плотности фиколл-верографина.В пробирках готовят два образца, содержащих мойослой 10-ной взвеси зритроцитов больного, трижды отьытых фосфатным буфером, в один из которых 1 контроль) добавляют равные объемы взвеси аутологнчрых лимфоцитов в концентрации 2 10 .мл, и комплемент в виде свежей сыворотки крови белой ььыи в разведении 1:5. В другой образец (опыт) добавляют также равные объемы взвеси аутологичных лимфоцитов, сенсибилиэированных предварительно с равным объемом липополиахаридного О-антигена шигелл при 37 С в теечение 30 мин в концентрации 210 мп, и комплемента маши в разведении 1.5, и запускают в камеру Горяева, помещенную в увлажненную чашку Петри. Затем контрольную и опытную смеси запускают в камеру Горяева, которую предварительно помещают в чашку. Петри, содержащую увлажненную фильтровальную бумагу.882526 Формула изобретения Составитель Т. Крюкова Редактор Г, Кацалап ТехредМ.Рейвес Корректор М. ДемчикЗаказ 10028/5 Тираж 690 Подписное БНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, З, Раушская наб., д. 4/5филиал ППП "Патент", г. ужгород, ул. Проектная, 4 Оба образца смеси выдерживаю втечение 2 ч в термостате при 37 С, азатем 18 ч в холодильнике при 4 ОС.Подсчитывают количество участков лизированных эритроцитов, площадь которых не менее 5 клеток, и при повышении их количества в опыте на 10 ибольше по сравнению с контролем диагностируют дизентерию.П р и м е р 1. Больной И.Г., 23 летпоступил в стационар без жалоб на нарушения желудочно-кишечного тракта и. 1 Одругих систем организма) в связи сослучайным обнаружением в кале шигеллЗонне, с подозрением на дизентерию.Реакция пассивной гемагглютинациис эритроцитарным антигеном шигелл 5Зонне была отрицательна.С помощью предлагаемого способабыл выставлен диагноз дизентерии:показатель контроля 4, а при стимуляции этой реакции О-антигеном ши Огелл равен 15,Следовательно, реакция пассивнойгемагглютинации была ложноотрицательна.П р и м е р 2. Больная К.С.М.,14 лет, поступила в стационар с проявлениями гемоколита ( боли в животепреимущественно слева, спазм сигьы, стул 5-8 раз в день со слизью икровью . Предварительный диагноз дизертерия.При использовании контрольного диагностического препарата - "дизентерии" показатель реакции был равен69, т.е. почти в 9 раз превышая показатель контроля, что также свиде- З 5тельствовало о диагнозе - дизентерия.При использовании предлагаемогоспособа был получен отрицательный результат - при добавлении О-антигенашигелл Флекснера количество лизиро Ованных эритроцитов в виде овальныхучастков просветления монослоя величиной в 5 клеток и более было равно 7, а в контроле 8, Б дальнейшемправильность этого ответа была подтверждена высевом из кала салмонеллэнтеридес. Исходя из этого, окончательный диагноз был исправлен на салмонеллез. П р и м е р 3. Больная К.С,Л., 23 лет, госпитализирована с неясными признаками, присущими дизентерии и пищевым инфекциям водянистый понос, нормальная копрограмма); С помощью предлагаемого способа был выставлен правильный диагноз дизентерии, так как результаты способа были следующие: показатель контроля 9, показатель стимуляии реакции препаратом О-антигена шигелл - 19.Использование предлагаемого способа позволяет повысить достовер. ность диагностики бактериальной дизентерии до 92-94. Способ диагностики бактериальнойдизентерии путем исследования крови,о т л и ч а ю щ и й с я тем, что,с целью повышения чувствительностиспособа, готовятмонослой 10-нойвзвеси эритроцитов больного и добав;ляют аутологичные лимфоциты, предварительно сенсибилизированные О-антигеном шигеллФлекснера,и компле-.мент, затем после инкубирования их2-2,5 ч при 37 С и 17-18 ч при 4 ОС,подсчитывают количество участков лизированных эритроцитов и при повышении их числа на 10 по сравнению сконтролем диагностируют дизентерию.Источники информации,принятые во внимание при экспертизе1, Покровский В.И. и др. Дизентерия. М., Медгиз, 1979, с, 209,