Способ получения фракции гваяковойсмолы

1854274 Союз Советскик Соцналисткческик Республик(23) Приоритет Государствеммый комитет СССР по делам изобретениИ и открытий(72) Авторы изобретения ИностранцыВернер Гютляйн (ФРГ), Ханс Вилингер (Ав трия), Вальтер Риттерсдорф и Вольфганг Вернер фРГ) "г Иностранная фирма(54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ФРАКЦИИ ГВАЯКОВОИ СМОЛЫ Изобретение относится к области органической химии, а именно к способу получения фракции гваяковой смо- лы, применяемой в медицине в случае заболеваний органов пищеварения, приводящих к появлению скрытой крови в стул 6, обнаружение которой является важным моментом при установлении правильного диагноза. 10Известна гваяковая смола, которая добывается из сердцевины тропического дерева Сцаасце о 1 Г 1 с 1 пв 11 в и.Оца 1 асце запасов и применяется для определения скрытой крови в кале. Однако частое использование гваяко-, вой смолы приводит к получению ошибочных результатов. Анализ осуществляютпутем обработки взвеси кала перекисью водорода и спиртовым раствором гваяковой смолы. Появление голу 2 О бого окрашивания указывает на наличие скрытой крови. За появление голубого окрашивания ответственно два основных омонета сол, а йменно фурогваяцин, а также гваяконовая кислота 11 . Однако гваяковая смола не всегда содержит имеющиеся в ней компоненты в одном и том же соотношении, часто образуются нестабильные компоненты, которые могут разла-гаться и, таким образом, снижать точность и воспроизводимость анали". за.В то же время выделение и применение двух главных компонентов в индивидуальном виде затруднено, посколь ку применение фурогваяцина не дает стабильных результатов,в выделение гваяконовой кислоты возможно осуществить только с помощью тонкослой" ной хроматографии с очень низким выходомЦель изобретения закюпочается в разработке спбсоба получения новой стабильной смеси компонентов гваяко" вой смолы " Фракции гваяковой смолы, пригодной для диагностики наличия крови в кале.Поставленная пель достигается способом получения фракции гваяковой смолы, заключающимся в том, что гваяковую смолу, выделенную иэ сердцевины тропического дерева Сца)асив оГГ 1 с 1 па 11 в и 6 цаасца запасов растворяют в ацетоне, затем прибавляют толуол, после чего полученную смесь фильтруют, фильтрат упаривают досуха и остаток растворяют в смеси н-гептана и уксусного эфира в соотношении 2:5 или в ацетоне и разде-.854274 ляют на колонке с силикагелем в атмосфере углекислого газа при помощи элюента, в качестве которого используют смесь н-гептана и уксусного эфира в соотношении 2:5 или смесь ацетона и толуола в соотношении 1:5, при этом отбирают Фракции с й 0 45Р в смеси толуол, диоксан и ледяная уксусная кислота в соотношении 90:25:10, упаривают их досуха и полученный остаток перекристаллизовывают иэ п-ксилола.фракция гваяковой смолы характеризуется удельной экстинкцией Е1 см при 600 нм, которая должна быть.не менее 200, определяемой по реакции с перекисью водорода, отличающаяся диапазоном ИК 1600 см (м); 1505 см (ч, з); 1260 см " (я, Ь); 1200 см(ы, Ь); 1115 см(м); 1025 см(м) и величиной В О,45 в смеси толуол диоксан ледяная уксусная кислота 90:45:10.Под удельной экстинкцией понимается экстинкция,которая вызывается 1 г гваяконовой кислоты в 100 мл растворителя при помощи пвроксидазы и перекиси водорода и измеряется в кювете длиной 1 см при 600 нм,Н р и м е р, 200 г Гваяковой смолы растворяют в 500 мл ацетона, причем вся смола за исключением небольшого остатка переходит в раствор, Затем при постоянном помешивании по каплям добавляют 3 л толуола, примерно через 30 мин отсасывают выпавший материал (около 60 г) и выбрасывают его. Фильтрат выпаривают в вакууме, причем получают примерно 160 г темна"коричневого стекловидного остатка Этот остаток при подогревании растворяют в 500 мл смеси н-гептана и уксусного эфира в соотношении 2:5 и после охлаждения подают на силикагелевую колонку (3,1 кг силикагеля, размеры частиц соответствуют проходу 0,063-0,2 мм диаметром Ц см и высотой 1,65 м). Силикагель предварительно промывают 2 М соляной кислотой для удаления следов железа, затем дистиллированной водой и высушивают под вакуумом, Разделение производят с 7,5 л смеси н-гептана с уксусным эфиром при их соотношении 2:5 в атмо- сфере углекислого газа. Собирают 150 Фракций по 50 мл. Франции 115- 145 после выпаривания дают 16,5 г под крашенного стекловидного материала, из которого путем перекристаллиэации в 150 г ксилола получают 12 г Фракции гваяковой смолы. Целесообразно отдельные фракции исследовать-методом тонкослойной хроматографии, так как в зависимости от условий возможны забросы элюата в получаемый мате- риала ВНИИПИ Заказ 5706/35 Тонкослойная хроматография.Силикагелевые готовые пластины60 Г - 254 (Мегс 3 с)Носитель: толуол, диоксан, ледяная уксусная кислота (90:25:10);й - 0,45.Раствор для обрызгивания,Раствор 0,05 пероксидазы и 0,5перекиси водорода в воде окрашиваютгваяконовую кислоты А в голубуюокраску,Раствор 6 формалина и 26-ныйраствор серной кислоты в воде окрашивает фракцию гваяковой смолы в коричнево-фиолетовую окраску,а загряз"нения - в красно-фиолетовую окраску.15 , Определение удельной экстинкции,Растворяют 4,0 мг Фракции гваяковой смолы в 400 мл 50-ного водногораствора спирта.1 мл этого раствора, 0,5 мл 3-но 2 О го раствора поливинилпирролидона Кв дистиллированной воде, 1,0 мл0,1 молярного раствора перекиси водорода в воде и 0,1 1-ного растворапероксидазы из морской редьки (1 е210 О/мг) в дистиллироьанной водедоводят дистиллированной водой до10 мл.Хорошо перемешанный раствор через5-10 мин подвергают измерению в кюве=те длиной 1 см при 600 нм,Удельная экстинкция = измереннойэкстинкции х 1000,ИК-сйектр (КВг): 1600 см (щ);1505 см + (ч, 5)р 1260 см (я, Ь);1115 см (в); 1025 см (гп); 1200 см35Формула изобретенияСпособ получения фракции гваяковой смолы, о т л и ч а ю щ и й с ятем, что гваяковую смолу, выделенную4 О из сердцевины тропического дереваОца)асщп оГГ 1 спа 1 з и Сца)асцвьапМца растворяют в ацетоне, затем прибавляют толуол, после чегополученную смесь Фильтруют, Фильтрат упаривают досуха и остаток рас"творяют в смеси н-гептана и уксусно.го эфира в соотношении 2;5 или вацетоне и разделяют на колонке ссиликагелем в атмосфере углекислогогаза при помощи элюента, в качестве50 которого используют смесь н-гептанаи уксусного эфира в соотношении 2:5или смесь ацетона и толуола в соотношении 1:5, при этом отбираютфракции с й 0,45 в смеси толуол,55 диоксан и ледяная уксусная кислотав соотношении 90:25:10, упаривают их:досуха и полученный остаток перекристаллизовывают из п-ксилола.Источники информации,щ принятые во внимание при экспертизе1. Диссертация: 1. КПЫ Т;Н,ВгапвсЬюе 19, ФРГ, 1964, с,21,Тираж 397 Подписное