Способ получения антител

ОП ИСАНИЕИЗЬВРЕТЕН ИЯК АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ Союз СоветсимкСоциапмстмчвскмкРеспублик и 833257(51) М. Кл. А 61 К 39100 с присоединением заявки-Гееударстеееый кемитетСССР дв делам взебретелрй я еткрытал(53) УДК 576.8. .097.3 (088,8) Дата опубликования описания 31.05,81(72) Авторы изобретения В. М. Минаева, Б. А. Старкова и И. И, Райхер Пермский ордена Трудового Красного Знамени научноисследовательский институт вакцин и сывороток(54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ АНТИТЕ.Л 1Изобретение относится к микробиологии и может быть использовано в медицине при получении гомологичных препаратов антител или иммуноглобулина.Известен способ получения антител путем спиртового фракционирования сыворотки с последующей обработкой хлороформом и отделением целевого продукта от осадка 1).Однако известный способ не обеспечивает высокого выхода целевого продукта.Цель изобретения - повышение выхода целевого продукта.Указанная цель достигается тем, что способ получения антител осуществляют путем спиртового фракционировання сыворотки с последующей обработкой хлороформом и отделением целевого продукта от осадка, осадок после отделения целевого продукта подвергают элюции дистиллированной водой при рН 11,0 - 11,1 в соотношении осадка и воды 1:4 с дальнейшей концентрацией, раствора методом" воздушного диализа при 6 - 8 С до содержания белка 5 - 7%.Пример 1. При спиртовом фракционировании 2 л сыворотки к вирусу клещевого энцефалита на стадии обработки хлороформом получают 150,0 г осадка. Осадок эмульги . 2руют в 600,0 мл дистиллированной воды, добавляют 1 н раствор ХаОН до рН 11,0 - 11,1, встряхивают 30 мин, центрифугируют при 16000 об/мин 10 мин при 4 - 6 С. Добавляют 1 н раствор НС до рН 7,0, Повторно центрифуги руют при6000 об 1 мин 10 мин при 4 - 6 С, Центрифугат сливают в вискозный мешок и подвергают воздушному диализу при 6 - 8 С.в течение 48 ч. Полученный препарат профильтровывают через стерилизующую пластину ЕКЬ - 2,0. Объем о стерильного препарата составляет 36,0 мл,концентрация белка 6,7701 о. В препарат добавляют сахврозу из расчета 0,5 г на 1,Ог белка. Раствор антител разливают в ампулы в объеме 2,7 мл и лиофилизируют. Растворение сухого препарата осуществляют в 1 д 1,5 мл дистиллированной воды.Содержание белка в готовом препарате 10% Чистота по данным электрофореза набумаге 97 - 9 У/О гамма-и бета-глобулино;вые фракции.Специфическая активность в реакцииторможения гемагглютинацин (РТГА) 1: :60, в реакции биологической нейтрализа833257Формула изобретения Составитель С. Малютина Редактор Л. филь Техред А. Бойкас Корректор С, Щомак Заказ 3845/4 Тираж 687 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам нзобретениИ и открытиИ 113035, Москва, Ж - 3 о, Раушская наб., д. 4/5 филиал 11 ПП Патеитэ, г. Ужгород, ул. Проектная, 4ции на белых мышах З,О логарифма индекса нейтрализации.Пример 2, При использовании хлороформенного осадка, полученного в процессе производства противогриппозного иммуноглобулина при условиях, указанных в примере 1, концентрация белка в готовом образце достигает 9,5%.Чистота по данным электрофореза на бумаге 97 - 98% гамма-и бета-глобулиновые фракции.1 ОСпецифическая активность по данным реакции торможения гемагглютинации к вн русу гриппа тип Ле 1:160, тип В 1:160.Пример 3. При использовании хлороформенного осадка, полученного в процессе производства противостолбнячного иммуно глобулина из донорской сыворотки при условиях, указанных в примере 1, концентра- циЯ белка в готовом обРазце достигает 10 о/о.Чистота по . данным электрофореза на бумаге 98/гамма-и бета-глобулиновые фракции.Специфическая активность 100 МЕ/мл.Использование предлагаемого способа получения антител обеспечивает дополнительный выход иммунного белка за счет использования отходов производства в количестве 1,63 г на 1 ОО,Ог осадка, что позволяет получить дополнительно 12,0 мл 10%-ного раствора иммуноглобулина из Ь иммунной сыворотки,Способ получения антител путем спиртового фракционирования сыворотки с последующей обработкой хлороформом и отде.леннем целевого продукта от осадка,отличающийся тем, что, с целью повышения выхода целевого продукта, осадок после отделения целевого продукта подвергают элюции дистиллированной водой при рН 11,0 -11,1 в соотношении осадка и. воды 1:4 сдальнейшеи концентрацией раствора методом воздушного диализа при 6 - 8 С до содержания белка 5 - 7%.Источники информации,принятые во внимание при экспертизе1. Патент ЧССР88563,кл ЗОВ 2/04, 1958,