Способ получения монотерпенов

О П И С А Н И Е (1 цЗЮВ)6ИЗОБРЕТЕНИЯ Союз Советских Социалистических Республик(22) Заявлено 07.02.78 (21) 2595085/28 51) М С 12 Р 764 рисоединением за иГосударстввииыи комитет 23) Приоритет Бюллетень43) Опубли делам изобретеии овано 07.03.8 53) УДК 663,18(45) Дата опубликования описания 07.03.8 нный А, Мироно льский вит) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ МОНОТЕРПЕНО 2 ются терной остьИзобретение относится к микробиологи. ческой промышленности, а именно, к спо. собу получения монотерпенов: гераниола, нерола и линалоола, используемых в парфюмерной, мыловаренной, пищевой и фар мацевтической промышленности.Известен способ получения монотерпенов путем культивирования их продуцентов - низших грибов на питательной среде, содержащей источники углерода, азота 1 и минеральные соли, в условиях аэрирова ния 111.Известный способ предусматривает получение смеси монотерпенов с помощью низшего гриба Сега 1 осуз 11 з гпоп 1 Иогппз 15 при выращивании его на питательной среде, содержащей в 1 л 30 г декстрозы, аминокислоты в количестве, эквивалентном по азоту 1 г мочевины, минеральные соли, микроэлементы, 0,1 г тиамина и 5 мкг био тина, При этом максимальное накопление смеси терпенов происходит на пятый день и составляет для гераниола, нерола и линалоола в сумме 26 кг/л жидкой среды. Недостатками этого способа явля относительно невысокий выход смеси пенов, использование дорогой питател среды и значительная продолжитель времени культивирования (5 дней). Цель изобретения - повышение выхода монотерпенов.Цель достигается тем, что в качестве продуцента используют штамм Егегпойе сшгп азЬЬу 11, а в качестве источников углерода и азота - соответственно глюкозу и янтарную кислоту, пептон и хлористыл аммоний.Способ заключается в следующем.Монотерпены синтезируются грибом Егетпойес 1 цгп азЬЬуй, развивающимся аэробно при 25 - 30 С в жидких питательных средах, содержащих в качестве источ. ника углерода глюкозу (7,5 - 10 г/л) и янтарную кислоту (1 - 2 г/л), в качестве источника азота - пептон (4 г/л) и хлористый аммоний (0,5 - 1 г/л), а также минеральные соли: Мд 504 0,05 - 0,1 г/л и КНР 04 0,2 - 0,5 г/л. Начальная величина р 1-1 среды 5,5 - 6,5. После 2,5 - 3 сут культивирования синтезируемые грибом монотерпены накапливаются в культуральной жидкости в количестве 57,5 - 96,5 мг/л в соотношении гераниол: нерол: линалоол 1:1:0,4. Для идентификации монотерпенов используют методы газо-жидкостной и тонкослойной хроматографии.Следовательно, при меньшей продолжительности культивирования на более дешевой питательной среде выход монотерпенов810816 Формула изобретения Составитель М. ЛаринаРедактор Л. Волкова Техред А. Камышннкова Корректоры: В, Нам н О. Гусева Изд,234 Тирагк 530 ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений н открытий 113035, Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5Зак,аз 2146 Подписное Загорская типография Упрполнграфнздата Мособлнсполкома 3возрастает в 3,5 - 4 раза на 1 л питательной среды.Пример 1. Двухсуточную культуру гриба Егеп 1 ойесшп 1 азЬЬуй, выращенную в колбах на качалке 28+1 С в среде, содержащей мясной бульон 90 - 100 мг Я по ХН,; глюкоза 0,25 г; ИАС 1 0,5 г; готовый посевной материал (2 об. /,) переносят в ферментационную среду (по 100 мл среды в колбах емкостью 750 мл). Состав ферментационной среды г/л; глюкоза 7,5; пептон 2,0; янтарная кислота 0,1; ХН 4 С 1 0,5; Мд 304 0,05; К,НР 04 0,2 г. Значение рН 5,5 (устанавливается раствором 1 н ХаОН ). Культивирование гриба (ферментацию) ведут на качалке с 220 об/мин при 28 + 1 С в течение 72 ч. К концу ферментации в культуральной жидкости накапливается 25 мг/л гераниола, 25 мг/л нерола и 7,5 мг/л линалоола,Пример 2. Условия приготовления посевного материала и засева ферментационной среды те же, что и в примере 1, Состав ферментационной среды г/л: глюкоза 10,0 г; пептон 4,0 г; янтарная кислота 2,0 г; Ь 1 Н 4 С 1 1,0 г; МАЗО 0,1 г; К,НР 04 0,5 г; рН 6,5. Ферментацию ведут, в 750 мл колбах с 60 мл среды на качалке с 220 об/мин при 28+1 С в течение 66 ч. К концу ферментации в культуральной жидкости накапливается 42 мг/л гераниола, 42 мг/л нерола и 12,5 мг/л линалоола.Использование низшего гриба Егегпо. 4йесшп 1 азпЬуй 1 для получения монотерпе.нов позволяет повысить выход терпенов в 3,5 - 4 раза при сокращении времени культивирования почти в 2 раза, Таким 5 образом, способ является не только продуктивнее, но и производительнее по сравнению с прототипом. Кроме того, питательная среда, используемая для выращивания Егегпойесшт авЬЬуй, дешевая и со держит доступные для промышленного получения компоненты. 15 Способ получения монотерпенов путемкультивирования их продуцентов - низших грибов на питательной среде, содержащей источники углерода азота и минеральные соли, в условиях аэрирования, 20 отличающийся тем, что, с целью повышения выхода монотерпенов, в качестве продуцента используют штамм Егегпойес 1- шп азЬЬуй, а в качестве источников углерода и азота - соответственно глюкозу и 25 янтарную кислоту, пептон и хлористыйаммоний. Источники информации,принятые во внимание при экспе 1.тизе30 1, 1.алка Е Ра 11 лег Я, К., В 1 овупйез 1 зо 1 глопо 1 егрепез Ьу Сега 1 осуз 1 з поп 111- 1 оггл 1 з РЬу 1 осеппз 1 гу, у. 16, р. 1555 - 1560,1977.