Способ определения железопро-теидов

ОПИСАНИЕИЗОБРЕТЕНИЯ К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬОВУ Союз Советских Социалистических Ресиублик(51) М. Кл 799744/30-15 1/22 исоединением заявкиосударственный комите СССР о делам изобретений и открытийБюллетень М 5) Дата опубликования описания 07.01.8 2) Авторы изобретения) Заявител Кубанский ордена Трудового Красного Знам сельскохозяйственный институт ЗОПРОТЕИДОВ зопротеидов, исключ ления электрофорет зопротеидов одноврЦелью изобретен ное определение спеПоставленная цел инкубацию геля пр сульфида натрия,П р и м е р. Навески свежего растительного материала (апексы, корни, листья риса Огурца забава сорт Краснодарский - 424, фаза кущения) гомогенизируют трисглициновым буфером. Затем проводят электрофорез гомогената. В полиакриламидном геле поддерживают режим: напряжение 2400 в, ток - 2 МА на трубку (при движении белка в концентрирующем геле); 550 в и 4 МА соответственно (при движении белка в рабочем геле). По окончании электрофореза гели помещают в 0,2%-ный раствор сульфида натрия. Через 15 мин в зонах расположения,железопротеидов появляется черная окраска. Электрофоретические спектры железопротеидов различных тканей риса различны. Эти различия характеризует неодинаковость набора активных и регулируемых генов в специализированных и неспециализированных тканях риса, а также неодинаковость этих тканей по функционированию(54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИ Изобретение относится к биохимическому анализу белков и может быть использовано 8 биохимии, физиологии и практическом культивировании живых организмов.Известен способ определения железопро теидов путем проявления индивидуальных белковых компонентов, разделяемых электрофорезом в инертном носителе, на основе способности этих компонентов прочно связывать красители или преципитирующие 10 агенты 1.Известен также способ определения железопротеидов, включающий диск - электрофорез белков анализируемого препарата в полиакриламидном геле и последующую 15 инкубацию геля в присутствии веществ, образующих с железопротеидами окрашенные соединения 21.Однако данный способ не позволяет определять полный спектр железопротеидов, 20Способ дает возможность определять электрофоретические спектры только тех железопротеидов, которые обладают ферментативной активностью и не позволяет определять электрофоретические спектры 25 весьма важной группы железопротеидов, не являющихся ферментами.Описанный способ, кроме того, позволяет определять электр офоретический спектр только одной изоферментной группы желе- ЗО ая возможность опредеического спектра желееменно,ия является более полктра железопротеидов. ь достигается тем, что оводят в присутствии794512 Формула изобретения Составитель Т, Роденкова Техред А. Камышникова Корректоры: В. Нам и А. Степанова Редактор Н. Тимонина Заказ 44/14 Изд. М. 147 Тираж 915 ПодписноеНПО Поиск Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий113035, Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5 Типография, пр. Сапунова, 2 окислительных и электронно-транспортных систем.Спектр железопротеидов апекса представлен слабоокрашенными зонами с относительной электрофоретической подвижно стью (ОЭП) 0,52 - 0,62; 0,7 - 0,86; 0,87 - 0,89 окрашенной зоной с ОЭП 0,6 г - 0,7 и интенсивно окрашенной полосой с ОЭП 0,87. Корни имеют иной спектр железопротеидов: слабоокрашенные зоны с ОЭП 0,54 - 0,58 и 10 0,77 - 0,87; окрашенная зона 0,58 - 0,77 и интенсивно окрашенная зона 0,87 - 0,91.Листья также имеют отличия в спектре железопротеидов. Их спектр состоит из слабоокрашенных зон с ОЭП 0,58 - 0,6; 15 0,77 - 0,83; окрашенной зоны 0,6 - 0,77 и интенсивно окрашенной зоны 0,83 - 0,9,Таким образом, установлено, что по содержанию интенсивно окрашивающихся железопротеидов листья превосходят корни, а 20 последние апекс. При этом листья содержат электрофоретически менее подвижные формы интенсивно окрашивающихся железопротеидов. По всей видимости, подобные изменения электрофоретического спектра 25 железопротеидов различных тканей риса связаны с различными физиологии по разному дифференцированных клеток, обусловленных различиями в составе блоков активных, регулируемых и заблокированных ге нов.Это значит, что предлагаемый способ позволяет характеризовать такие важнейшие физиологические системы клетки, как электронно-транспортные цепи, системы окислительно-восстановительных ферментов и активность генов, их контролирующих,Способ определения железопротеидов позволяет решить ряд практических задач прикладной биохимии и физиологии, в том числе характеризовать набор активных и регулируемых генов в данной ткани, отвечающих за синтез железопротеидов, а также физиолого-биохимические различия тканей, связанные с неодинаковостью спектров железопротеидов. Способ определения железопротеидов, включающий диск-электрофорез белков анализируемого препарата в полиакриламидном геле и последующую инкубацию геля в присутствии веществ, образующих с железопротеидами окрашенные соединения, отличающийся тем, что, с целью более полного определения спектра железопротеидов, инкубацию геля проводят в присутствии сульфида натрия,Источники информации,принятые во внимание при экспертизе 1, Уильямс Б. и Уилсон К. Методы практической биохимии. М., Мир, 1978,2. Биохимические методы в физиологии растений. М Наука, 1971, с. 113 в 1 (прототип).