Способ получения липосом

Союз Сюветскик Соцналнстнческнк Республик(22) Заявлено 22 Л 1,77 (21) 2548 б 05/28-13 (51)М. КЛ,с присоединением заявки Ио А б 1 К 9/00 Государственный комитет СССР но делаи изобретений и открытий(23) Приоритет Опубликовано 3010,80. Бюллетень М 40 153) ЮЖ б 15.45: .615,7(088,8) Дата опубликования описания 301080(72) Авторы изобретения М.В. Штейнгарт, В,Н, Васильченко, И,А. Тихонова,И.Г. Зайцева, И.С. Гусева, О.И. Самодаеваи Н.А. Бугрим Физико-технологический институт низких температурАН Украинской ССР и Харьковский научно-исследовательскийфизико-Фармацевтический институт(54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ЛИПОСОМ 1Изобретение относится к области медицины, а именно к химико-фармацевтической промышленности.Известен способ получения липосом, заключающийся в том, что липиды раст воряют в органическом растворителе, например в хлороформе, и смешивают с водным раствором, содержащим лекарственные вещества, полученную смесь обрабатывают ультразвуком с последую О щим центрифугированием и хроматографированием для концентрирования липосом и удаления невключившихся лекарственных веществ 1) .Однако известный способ не позво ляет получить высококонцентрированные дисперсии липосом, так как количество включаемого вещества составляет 7.Целью изобретения является увеличение количества включаемого вещества.20еЭта цель достигается тем, что в качестве липидов используют лецитин, который растворяют в смеси раствори" телей, а именно Фреона 12-Фреона 11 при соотношении 1:1, хлористого эти ла-Фреона 12 - 1:5, хлористого этила- хлороформа-фреона 12 - 1:1:10. Полученный раствор лецитина барботируют в водный раствор лекарственного вещества, преимущественно инсулина. 30 2П р и м е р 1. 1 г яичного лецитина растворяют на холоде в 10 мл хлористого этила в баллоне, снабженном распылительной форсункой. 3 аллон заполняется 50 г фреона 12. Полученную смесь барботнруют в 10 мл раствора инсулина с концентрацией 40 ме/мл при температуре 20 оС и интенсивном помешивании магнитной мешалкой. Молочно-белую дисперсию озвучивают ультразвуковым диспергатором при частоте 22 кГц в течении 10 мин до появления голубой опалисценции смеси. Лигосомы осаждаются центрифугированием при 105000 д в течение 1 ч. Образованные липосоьвя, как показывает электронная микроско- пия, имеют размеры 300-500 А.П р и м е р 2. 70 мг яичного лецитина и 3 мг холестерина растворяют в 5 г фреона 11 в баллоне, снабжен-. ном распылительной форсункой. Баллон заполняют 5 г фреона 12. Полученную смесь барботируют в 10 мл раствора трис-НСВ с РН, содержащего рубомицин с концентрацией 2 мг/мп. ДалЬ- ше, как в примере 1. Полученные липосомы имеют размеры 240-450 А.П р И м е р 3. 1 г яичного лецитина, 0,1 г холестерина, 0,1 г карфс Ф,:. е,ф774555 4, лр Формула изобретения Составитель Т. Павлович Редактор Г. Лрусова Техред Е.Гаврилешко Корректор Г. ГригорукТираж 673 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж, Раушская наб.; д. 4/5Заказ 7579/3 Филиал ППП "Патент", г. Ужгород, ул. Проектная, 4 диолипина растворяют на холоде в смеси, содержащей 0,125 г гидрокортизона ацетата, 5 г хлористого этила и 5 г хлороформа, в баллоне, снабжениом распылительной Форсункой. Баллон заполняют 50 г Фреона 11. Полученный раствор медленно барботируют в 10 мл 0,9 М раствора МаС 0 и дальше, как в примере 1.П р и м е р 4. 200 мг яичного ле- цитина, Я мг холестерина растворяют на холоде в 10 г хлористого этила в баллоне, снабженном распылительной Форсункой, Баллон заполняется 50 г Фреона 12, Полученную смесь медленно барботируют в 30 мл буферного раствора трис-НС 1 с РН, содержащего 5- -Фтор-урацил с концентрацией 2 мг/мл, при энергичном перемешивании магнитной мешалкой. Исключая стадию обработки ультразвуком, отделяют липс- сомы от невклйчившегося 5-Фтор-урацила хроматографией на колонке с сефарозой 4 Б. Как показывает электронная микроскопия, липосомы имеют размеры 300-ЗОО А.Приведенные примеры показывают, что предлагаемый способ получения липосом позволяет использовать низкокипящие смеси растворителей, что приводит к быстрому удалению их из раствора биологически активного вещества позволяет получить 10-ную дисперсию липосом в растворе, что значительно увеличивает количество включаемого вещества до 26%. Кроме этого, предлг 2 гаемый способ позволяет включить в липосомы различные лекарственные вещества, в том числе и нерастворимые в воде. Способ не требует использова-ния сложного оборудования и дает возможность получить высококонцентрированные дисперсии липосом в промыапенных масштабах. Способ получения липосом, содержащих лекарственные вещества, путемсмешения раствора липидов в хлорофор 15 ме с водным раствором лекарственныхвеществ, с последующим озвучиваниеми центрифугированием, о т л и ч.а ю -щ и й с я тем, что, с целью увеличения количества включаемого вещества,20 в качестве липидов используют лецитин, который растворяют в смеси раст, ворителей, а именно Фреона 12-Фреона11 при соотношении 1:1, хлористогоэтила-Фреона 12 - 1:5, хлористого2 этила-хлороформа-Фреона 12 - 1:1.:10и барботируют в водный раствор лекар-.ственного вещества, преимущественноинсулина.Источники инФормации,принятые во внимание при экспертизе1. Патент Франции Р 2221122,кл. А 61 К 9/ОО, опублик. 1974 (прототип),