Способ определения токсичности сыворотки крови

ОПИСАНИЕИЗОБРЕТЕНИЯК АВТОРСКОМУ СВИ ТВЛЬСТВУ Союз Советскик Социалистическик Республик(51)М. Кл. с присоединением заявки Йо А 61 В 10/00 8 01 й 33,/16 Государственный комитет СССР по делам, изобретений и открытий(72) Авторы изобретения В.ф. Учайкин, О.А. Машков и А.В. Троицкий Второй Московский ордена Ленина государственныймедицинский институт им. Н,И. Пирогова(54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ТОКСИЧНОСТИ СЫВОРОТКИКРОВИ Изобретение относится к областимедицины,а именно определению ток"сичности сыворотки крови,и можетбыть использовано для обнаруженияи количественного определения токсичных веществ, образующих при поражении печени,а также оценки эФфективности удаления из организма токсических веществ в условиях клиники..Известен способ определения токсичности сыворотки крови путемкультивирования ее на биологическом тест-материале с последующи) измерением степени воздействия исследуемой сывороткина тест-культуру 1 .Однако известный способ не позволяет определить токсичность сыворотки крови при поражении печени,Белью изобретения является определение токсичности сыворотки кровипри поражении печени,Эта цель достигается тем чтосыворотку культивируют с лейкоцитар"ной пленкой в питательной среде, содержащей плазму крови человека йкролика, взятых в соотношении 2,5:1и по величине зоны миграции зрелых лейкоцитов определяют токсичность сыворотки.Способ осуществляют следующим 5 образом,Культивируют кусочки лейкоциуарной пленки на питательной среде,состоящей иэ смеси плавуны крови человека и кролика с добавлением гепарина. В опытных культурах к питательной среде добавляют равнре количество исследуемой сыворотки, в контрольных - раствор Рингера. Культивирование производят по методу висячей капли в камерах Максимова при37 С в течение 18 ч, Показателембиологической активности исследуемого материала служит. величина эонымиграции лейкоцитов вокруг культивируемой пленкиПри помощи рисовального аппарата контуры кусочков и эонмиграции переносят на бумагу и планиметрируют, Миграцию опытных куль тур вычисляют по отноыению к контрольной, принятой за 100. Если исследуемая сыворотка обладает. угнетающим действием на миграцию, получают величину с отрицательным знаком,если стимулирует - с положительным,Заказ 3071/3 Тираж 673 ПодписноеБНИИПИ Государственного комитета СССРпо дулам изобретений и открытий113035, Москва, Ж, Раушская наб д, 4/5 Филиал ППП Патентф, г. Ужгород, ул, Проектная, 4 П р и м е р 1. У собаки с экспериментальной печеночной недостаточностью, которую получили введениемв общий желчный проток четыреххлористого углерода из расчета 0,1 йп на1 кг веса с последующей его перевязкой, определяют токсичность сыворотки крови путем добавления ее. в количестве 0,1 мл к гемокультуре, представляющей собой кусочки лейкоцетарной пленки здорового человека, культивируемые по методу висячей каплина гепаринизированной плазме человека и кролика, После подращиваниягемокультуры в течение 18 ч в термостате при 37 фС образуются зоны миг-рации лейкоцитов, которые проектируют на бумагу при помощи рисовального аппарата и планиметрируют. Конт-.ролем служат культуры той же пленки,к питательной среде которых прибавля-,ют вместо испытуемой сывороткираствор Рингера, Рост опытных культур вычисляют р процентах по отношению. к контролю, который принимаютза 100 и обозначают как плюс илиминус от 100 (контроля), На высотефункциональной недостаточности печени в сыворотке крови обнаруживаютвещества, резко снижающие миграциюлейкоцитов в гемокультуре, На высоте поражения печени токсические свойства сыворотки равняются в среднем43., Очистку крови у собаки производят путем пропускания,ее через колонки, заполненные активированным углеммарки СКТ-ба. В процессе очистки крови токсичность сыворотки резко уменьшилась, а через 60 мин сорбции сыворотка была нетоксична (+ 6), Уменьше-.ние токсичности сыворотки крови коррелировало с динамикой клиническойкартины, Собаки после гемосорбцинбыли активными, хорошо ели, адекватно реагировали на внешние раздражители.П р и м е р 2, Алеша С., 2,5 месклинический диагноз . вирусный гапатит. В, тяжелая форма, гепатодистрофия, печеночная кома,В период глубокой печеночной коьи (9 день болезни), 7-й день желтухи токсичность сыворотки крови, которую определяют аналогично приме 1 ру 1 из 0,1 мл сыворотки, равнялась-42, после геомосорбции, которуюпроводят с помощью активированногоугля марки СКГ-ба, токсичность сыворотки полностью исчезла + 13, в товремя как уровень билирубина.понизился только в 1,5 раза с 16,64 до10,6 мг,В, а другие функциональныепробы существенно не изменились,Уменьшение токсичности сывороткисопровождалось просветлением сознания, нормализацией сердечно-сосудистой и дыхательной деятельности,Однако в дальнейшем состояние вновьухудшилось и на 11 день болезни, 9день желтушного периода наступил15 летальный исход, Токсичность сыворотки крови непосредственно передсмертью вновь увеличилось до - 72,Предложенный способ позволяетобнаружить и количественно измерить20 в дыворотке крови токсичные вещества, образующиеся при поражении печени, Способ с большой степенью точности, по сравнению с известным,позволяет оценить результат удаленияд из крови токсичных веществ, например, методом гомосорбции,Способ оПределения токсичностисыворотки крови путем культивирования ее на биологическом тест-материале с последующим измерениемстепени воздействия исследуемойсыворотки на тест-культуру, о тл и ч а ю щ и й с я тем, что, сцелью определения токсичности сыроротки крови при поражении печени,сыворотку культивируют с лейкоцитарной пленкой в питательной среде,содержащей плазму крови человекаи. кролика, взятых в соотношении2,5:1 и по величине зоны миграциизрелых лейкоцитов определяют токсичность сыворотки,Источники информации,принятые во внимание при экспертизе