Способ получения эритроцитарного диагностикума

и 63474 Ф Йаюз Саеетскил Сациалистических Республик(61) Дополнит т. свид-ву ьнос к 2) Заявлено 11.07.77 (21) 2508437(28-1 51) М. Кл,-А 61 К 39/О исоединением заявки Ле Гасудаастееиь й каиит 3) Приоритет3) Опубликовано 30.15) Дата опубликован СССР па лелем кзаблетеиий. А. Шамардин и Б. В. Каральн зобретени 71) Заявител СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ЭРИТРОЦИТАРНОГО ДИАГНОСТИКУМА тп медици диагностих для ст имзации том в на- ием чива- тикутве ваИзобретение относится к обласны, в частности к приготовлениюческих препаратов.Известен способ получения эритроных диагпостикумов, предназначенныопределения реагентов на Гс-фрагмемуноглобулина 6, путем сенсибилиэритроцитов глобулиновым препараприсутствии конъюгирую щего агентапример СгС 1 с последующим отмывсенсибилизированных эритроцитов.Однако известный способ не обеспет высокой чувствительности диагно Целью изобретения является повышение чувствительности диагностикума.Эта цель достигается тем, что в качес конъюгирующего агента используют ри нол. Кроме того, для сенсибилизации эритроциты, глобулиновый препарат и риванол берут в соотношении 1: 0,5: 0,5 соответственно.Способ осущсствляют следующим образом.Смешивают 1 объем 2,5%-ной взвеси эритроцитов, 0,5 объема 0,1 - 0,2%-ного раствора глобулинового препарата и 0,5 объема 0,02% -ного раствора риванола (2-этокси,9-диаминоакридино лактат). Смесь выдерживают в течение 60 мин при 37 С (для натпвпых эрптроцитов) пли 40 - 45 С (для фиксированных эрптроцптов) прп периодическом встряхивании, затем эритроциты 3 раза отмывают пс менее чем 50-кратным 5 по отношению к осадку эрптроцптов объемом 0,85%-ного раствора хлористого натрия, содержащего 0,1 - 0,2% желатины и 1% (по обьсму) 1,15 М фосфатного буфера рН 7,2.10 П р и м с р. Проводят сенсибилизациюформалшгпзнрованных по Вапнбах эритроцитов барана 1 дб нормальной сыворотки человека. Смешивают 2 мл 2,5%-ной взвеси эритроцитов, 1 мл 0,1%-ного раствора 1 дб 15 и 1 мл 0,02%-ного раствора риванола,приготовленных на 0,85%-ном растворе КаС 1, содержащем 1% (по объему) 1,15 М фосфатного буфера рН 7,2. Смесь выдерживают 60 мпп при 45 С при периодическом 20 встряхивании. Затем эритроциты триждыотмывают 0,85% -ным раствором ХаС (по 4 мл), содержащим 0,1% жслатины и 1% (по объему) 1/15 М фосфатного буфера рН 7,2. К осадку отмытых сенспбплпзирован ных эрптроцптов прибавляют 2 мл такогоже растворителя.В качестве контроля используют эритроциты, сснспбплпзированные тем же препаратом 16 по способу Бойдена и Яндл - 30 Симмонса.634749 Максимальное активное разведение сыворотки, содержащей ревматоидный факторСпособ сенсибилнзации Предлагаем ы йБойдена 16 - 23 110 в 1Яндл и Симмонса Составитель Г. Смирнова Техред 3, Тараненко Редактор М. Дмитриева Корректоры: В, Дод и 3, Тарасова Заказ 1915/8 Изд.718 Тираж 666 Подписное НПО Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5Типография, пр. Сапунова, 2 Определение эффективностг 1 сенсибилизации эритроцитов проводят с помощью двух реагентов на Гс - фрагмент 1 дб: сыворотки, содержащей ревматоидный фактор, и взвеси Я. ацгецз Сочап богатого белком Л. В первом случае определяют ма 1:16 000 -1:20 0001 8 С 00 -1:12 0001:600 -1:1500 Как видно из таблицы, предлагаемый способ обеспечивает высокую чувствительность диагностикума при определении ревматоидного фактора и Л-содержащего ста филококка.Предлагаемый способ обеспечивает высокую чувствительность диагностикума, позволяет диагносцировать ряд заболеваний и дает возможность количественного опреде ления белка А у стафилококков. Формула изобретения 1. Способ получения эритроцитарногодиагностикума для определения реагентов 20 ксимальное активное разведение сыворотки - индикатора, во втором - минимальную агглютинирующую дозу Я. ацгецз Союап. Результаты исследований представленыв таблице. на Рс-фрагмент иммуноглобулина СЬ путем сенсибилизации эритроцитов глобулиновым препаратом в присутствии конъюгирующего агента с последующим отмыванием сенсибилизированных эритроцитов, о т л и ч а ющ и й с я тем, что, с целью повышения чувствительности диагностикума, в качестве коныогирующего агента используют риванол. 2. Способ по п. 1, отличающийся тем; что, с целью сенсибилизации, эритроциты, глобулиновый препарат и риванол берут в соотношении 1: 0,5: 0,5 соответственно.