Способ определения пептидов в напитках

Соки СоветскихСоциалистически Республик 0 Государственный когнитет СССР по делам изобретений и открытий4 о-,Дата ссГблогесзанггя эпгп 2) Авторизэбретения акянц чныи институт пищевои промышленности 4) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ПЕПТИД В НАПИТКАХИзобретеяие относился к гсивобезалкогольной промышлениостги, в частности к способам определения,пеп"пидэз з нагпитках, и может применяться в консервной, ликероводочной и внноделвческэй па эм ышл сивости.Известен спосоо определения пептидэз ",напитках, предусматгривающгий введение в исследуемую пробу напитка метилглиоксаля и спектрофотометриче:,кий анализ продуктов,реакции 1.Недостатком известного с соба является то, что сн гнедостаточно ен, поскольку анализу мешают белки,и нолыные соединен,ия, и длителан.Цель изобгретения ноификацияпроцесса и псзышен,ие т и определения пептидов.Это дсстигается тем, что в предлагаемом способе перед введением в исследуемую пробу напитка метигоглиоксаля из о 1 се удаляют белии и полифенолы путем добавления 0,5 - 1,5 мл 1,н. раствора щелочи ги осаждения их насыщевным раствором оснозгного уксуанокисгоого свинца в количестве от 1 до 5,нл 1 на 10 лл иапи"пка с лэследующей фильтрагоией обгразовазшейся смеси.Предлагаемый способ осуществляют следующим образом. го точ фег- инте оччост 71) Заявитель Всесоюзный Нагниток наливают,в мерную колбу емк,тью 50 зг.г, добавляют 1 и, распвораХаОН до слабощелочной среды в котичестзс 0,5 - 1,5 гял;и от 1 до 5 мл на 10 мл,напитка насыщенного раствора РЬ (СНзСОО) 2.Смесь порвхоешизают и фильтруют. В фильтрат с рН среды, разной 12 - 12,5, вводятметилглисксаль и выдерживают смесь прои18 - 20 С, после чего рН среды устанавли 10 вают равной 3,0 - 3,2 введением 1 нраствора НС 1, В смесь добавляют дистиллирозанггуго воду, и известным методом подвергаютспектрофотометрическому анализу продукты регнкппп. По налиброзочной кгризсй на 15 ходят содержание пептидов в исследуемомнапитке.П р и м е р 1. 40 лгл з,на наливают вмерную колбу емгкостью 50 згл, добавляют1 н. раствэра лаОН до слабощелочной сре-"С ды (1 лгл) и 4 ял насыщеннсгэ,рзстзэраРЬ(СНзСОО) о,В мерную кэлбу добавляют ди:тиллгнрэванную воду до отметки 50 лг.г. Полученную смесь пегремешивают и фильтруют че 25 рез двойной бумажный фильтр. 2,5 ялфильтрата наливают в меряную кслоу "мкостью 25 лг,г, добавляют 1 н. раствор МаОНдо тех пор, пока рН среды не станет разной 12,5. Далее в зту колбу гтрилизаютЗО 0,5 мл О,1 н.,р а створа метил глагэксаля,630582 Формула изобретения Составитсль Л. Пашинипа Рсдактор М. Дмитриева Техред А. Камышникова Корректор И. Симкина Заказ 739,1147 Изд.683 Тираж080 Подписное НПО Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий Москва, 7 К, Раушская наб д, 4/5 Тип. Харвк. Фпл. пред. Патентсмесь выдерживают 30 мин,при коъыатной температуре (18 - 20" С). Затем в эту колбу приливают 1 н. раствэра НС 1 с таким ра четом, чтобы рН раствора стала равной 3,0 - 3;2.В колбу добавляют дистиллированную ;воду до отметки 25 мл, и,все тщательно перемешивают. Получеиный раство 1 р наливают в кювету толщиной 1 см спектрофотометра, помысле чегго измеряют оптическую плотность раствора при 335 нм. Го калибровочной кришной 1 находят содержание пептидов или азота пептидов в исследуемом вине.П р и м е,р 2. 25 мл шампанского,виноматериала или шампанского наливают в мерную колбу емкостью 50 мл, добавляют 0,5 лл 1;н. раствора КаОН до слабощелочной среды, б мл насыщенного раствора РЪ(СНзСОО)2 и дястиллироваяцую воду дэ огметки 50 мл. Содержимое колбы перемешивают и фильтруют через двойной бумажный фильгр. 2,5 мл фильтрата используют для проведония реакциями с мегилглпсксалем, после чего подвергают спектрофотаметрическому анализу, как описано в примере 1. Содоржание азота пепгидов, определенное по даному способу, в виноматериалах,составляет от 40 до 120 мгlл, в Советском ша,мпанском - от 25 до 130 мг/л.П р;им е,р 3. 10 - 25 мл Жигулевского пива наливают в мерную колбу емкостью 50 мл, добавляют 0,5 мл 1 н. раствора ИаОН до слабощелочной среды, 2,5 мл РЬ (СНзСОО) з и дистиллирова,нную волу до оъмегки 50 мл. Содержимое юлбы,пврвмешивают и фильтруют через двойной бумажБый фильтр. 20 мл фигпьтрага переносят в мерную колбу на 50 мл, добавляют 1 мл КазСОз для проверки избьгпка РЬ (СНзСОО), Содержимое колбы доводят дисгиллированной водой до оюметии и фильтруют, затем 5 мл фильтрата используют для проведения реакции с иегилглиаксалем, после чего подвергают спектрофогомет 1 рическому анализу, как описано в цримере 1. Содержанне пептидов в пиве в пересчете на аланил-алании сэставило 2560 мг/л, азот пепти:,с;з был равен 220 мг/л..П ри м ер 4. 40 мл яблочнсэ сака и.а;гивают,в смергную колбу емкостью 50 мл, дсбавляют 1,5 мл 1 н. ИаОН и 5,0 мл насыщенно:.о раствора РЬ(СНзСОО), и дистигллированиую воду до огметки 50 мл, Содержимое колбы перемешивают ги фильтруют через двойной бумажный филь пр, 5,0 мл фильтрата используют для,проведения реакция с метилглиоксалем и опектрофотсметрического анализа, как описано в примере 1. Содержание пептидов в перес сте иа аланслл-аланиии в яблочном соке составило 750 мг/л, азот пептидов был равен 625 мг/л.Предлагаемый способ позволяет и 41 тенсифицяровать процесс и пэвысить точность определения пептидс 1 в, Кроме того, он позволяет у.".до:тить метод анализа. 25 Способ определения пептидов в,на. птках, предусматривающий введенские в исследуемую,пробу напитка мегилглиоксаля и спектрофотометрический анализ продуктов реакции, отличающийся тем, что, с 30 целью интенсификации .троцесса и повышения точности определения пептидов, перед введевием в исследуемую пробу напитка метилглиоксаля из нее удаляют белки и полифенолы путем добавления 0,5 - 1,5 мл 35 1,н.,раствора щелочи,и осаждения их насыщенным раствором основного уксуонокислого свинца в количестве от 1 до 5 мл на 1 О мл напитка с пооледующей фильтрацией э бд а зов а в шейся смеси.40 Исто чсник инфсрмации, принятый вовнимание при экспертизе:1. Ре 1 егзЬоег б., Ргеу Ч, Епе рЬоопе 1 гзсЬе Мейос 1 е гцг апау 1 зсЬеп Везгпгпипд 45 акоп Рор 1 с 1 еп пеЬеп Агппозапгеп, - МсгосЬтпса Ас 1 а, 1969,5, з. 981 - 988.