Способ количественного определения антибиотиков

О П И С А Н И Е о)592845ИЗОБРЕТЕН ИЯК АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ Со 1 оа. Советских Социалистических Реслублик61) Дополнительно т, свид-ву -явлено 13.01,75 (21) 209600,1/301)М.Кл 2 С 12 Р 90 исоединением заявкиосударственнмй комите овета Министров СССР о делам изобретенийн открытий(45) Дата опубликования описания 01.03.78 53) УДК 615,779,9шкович, А. В, Прокопов , Терешин, М, А. Малк А. М. Зисерман и Н. М Н, Д, Лохина,Н, С. Реди,ишина Заявитель дский научно-исследоватеантибиотиков ни скии инсти 54) СПОС ЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИАНТИБИОТИКОВ 2 льтре4 в кювете3е же реактивы и 0,5 мл во неомицина определяют кривой, которая предста ротив контроляды), Концентрапо градуировочлена ниже. цию ной 23 0,56 0,83 1,2 1,5 1,9 птическая плотностьпродуктов реакциипри я=424 н,я Пример 2. А ндомицина осущес примере 1, испол рН 4,2, в качествнализ концентрации оле твляют так, как описан зуя буфер Мак-Ильвейн е экстрагента хлороформ,15 0,25 0,35 0,48 тность а=4 П р им ер 3, Берутжидкости нистатина,0,015%-ного водного ранего, 10 мл 0,1 М фосфавора с рН 5,0 и экстртиленхлоридом, Затемописано в примере 1, О 0,5 мл культуральной добавляют 15 мл створа бромтимол ситного буферного растагируют комплекс мепоступают так, как рганическую фазу отИзобретение относится,к микробиологической промышленности и может найти применение при производстве витаминов, алкалоидов, .аминокислот.Известен способ количественного опреде.ления канамицина в растворе путем проведения реакции с нингидрином с последующим колориметрированием окрашенного продукта 111. Однако известный способ не обеспечивает определения антибиотиков, имеющих кислотноосновные группы.С целью апределения антибиотиков, имеющих кислотноосновные группы по предлагаемому способу в процессе биосинтеза и выделения в исследуемый образец добавляют кра ситель, содержащий кислотноосновные группы и гидрофобные элементы структуры и экстрагируют образующиеся соединения органическим растворителем, не смешивающихся с водой. 20П р и м е р 1. Берут 0,5 мл нативного раствора неомицина, добавляют 15 мл 0,015%-ного водного раствора красителя бромтимолового синего, 10 мл фосфатноцитратного буфера с рН 5,6 (0,2 М Ка-,НРО 4 2 НО - 35,65 г в 25 1 л и 0,1 лимонной кислоты - 21,008 г в 1 л, соотношение растворов 8,", мл и 11,6 мл).:Экстратируют комплекс хлороформом в течение 20 мин, Хлороформный слой отделяют и колориметрируют на ФЭКе при синем свето онцентрацпя, неогяици 100 150 200 250 30на, ед/мл Градуировочная кривая для определения концентраций олеандомицина представлена ниже. Концентрация, ед/мл 23,7 39,5 59,2 79,0 118,5592845 Формула изобретения Составитель С. Малютина Редактор Л, Новожилова Техред И. Карандашова Корректор И. СимкинаПодписное Заказ 970/2138 Изд, Мо 192 Тираж 563 НПО Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5Тип. Харьк. фил, пред, Патент деляют от водной и от твердой фазы - мицелия.П р и м е р 4, Анализ содержания леворина в мицелии осуществляют так, как описано в предыдущем примере, использовав в качестве исходного раствора суспензию 0,1 г мицелия в 200 мл воды.Прим е р 5. 12 л раствора олеандомицина с активностью 11,2 ед/мл с рн 6,6 фильтруют через колонку с катионитом СДВ-ЗТ в Ка+ -форме,со скоростью 80 мл/см ч. Десорбцию проводят 30 мл метиленхлорида, содержащего 0,5% бромтимол синего. В элюате определяют концентрацию олеандомицина колориметрированием. Преимуществами предложенного способа является простота, быстрота проведения и высокая чувствительность анализа. Так, на проведение известных методов анализа требуется от нескольких часов до суток, предложенный способ требует не более получаса, чувствительность метода выше известных в 5 - 10 раз. Все это позволяет оперативно контролировать технологические процессы получения антибиотиков .и за счет этого повысить нх выход,5 Способ количественного определения антибиопиков путем колориметрирования охра щенного продукта взаимодействия антибиотика с химическим реагентом, о т л и ч а ющ и й с я тем, что, с целью определения антибиотиков, имеющих кислотноосновные группы, в процессе биосинтеза и выделения в ис следуемый образец добавляют краситель, содержащий кислотноосновные группы и гидрофобные элементы структуры и экстрагируют образующиеся соединения органическим растворителем, не смешивающимся с водой.20 Источник информации, принятый во внимание при экспертизе:1. Гос. Фармаклея СССР. Хизд. М., 1968,