Способ получения диагностикума

Союз Советскин Социалистическин РеспубликОП ИКАНИЕИЗОБРЕТЕН ИЯй АВУОР СИОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ61) Дополнительное к авт, свид.ву)М. Кл, А 61 К 35/ 1)2378399/28.1 осуда рственнын нокнтетСовете Ннннатроо СССРпо депак нзобретеннйн отнропнй 77. Бюллетень 4 описания 15,11,77(71) Заявитель ентрапьный институт эпидемиологии 54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ДИАГН УМА коибил овышение стабильИзобретение относится к медицине, а именно иммунологии,Известен способ получения дифтерийногодиагности кум а, заключающийся в том, чтоэритроциты обрабатывают формалином, отмывают физиологическим раствором, обрабатывают дубильной кислотой, отмывают танизированные эритроциты, сенсибилизируют анатоксином и фиксируют формальдегидом 11.Известен также способ получения столбнячного диагностикума, заключающийся в тех жеоперациях 12). Способ получения столбнячногодиагностикума отличается от способа получения дифтерийного диагностикума только технологическими режимами в соответствии со специфическими особенностями препарата,Однако эти способы не обеспечивают высочувствительности, специфичности и стаьности.препарата.Целью изобретения является пчувствительности, специфичности иности препарата.Для этого формалинизированные эритроциты обрабатывают детергентом до и после танизации, а для сенсибилизации используют прогретую фракцию анатоксина, выделенную путеммолекулярного фильтрования через мембраныХМ-ЗОО, ХМ,100 А и РМДиафло. Повышение способности сенсибилизироватьэритроциты у коммерческих очищенных препаратов анатоксинов и их специфических компонентов достигается в результате предварительного прогревания их при температуре 6065 С в течение 30 - б 0 мин с последующимбыстрым охлаждением при 0 С в смеси водыи льда,В качестве сенситинов используют молеку.лярнооднородные белковые компоненты дифтерийногя или столбнячного анатоксинов, извлеченные из препаратов анатоксинов посредством молекулярной фильтрации с мембранамиХМ-ЗОО, ХМОА, РМДиафло.Пример. Формалинизированные эритроцитыбарана или лошади последовательно отмывают нейтральным 0,85 о/,ь-ным раствором хлориданатрия, затем раствором твина, снова 0,85% -ным раствором хлорида натрия, Полученныйосадок ресуспендируют и соединяют с изотоническим раствором, в котором растворена дуо бильная кислота. После контакта эритроцитыосаждают, осадок промывают 0,85%-ным рас.твором хлорида натрия с детергентом (твином),затем без детергента. Ресуспендированныеэритроциты соединяют с анатоксином или специфическим компонентом его для взаимодейст 5 вия в тепле в течение 4 - 5 ч. Затем в смесь5789 б 7 формула изобретения Составитель С МалютинаТех ред О. Луговая Корректор 1. Мельнииенко Редактор И. Марковская Заказ 4274/8 Тирьж 677 1 одписное ЦНИИИ Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий 13035, Москва, Ж 35, Раушская наб., д. 4/5Филиал 1 П 1 11 атент, г. Ужгород, ул. 11 роектная, 4 добавляют формальдегид, последуюшее отмывание эритроцитов и хранение готового препа-. рата производят в присутствии формальдегида. Аналогичным образом, минуя лишь обработку эритроцитов анатоксином, готовят контрольный препарат.После проверки готовой серии диагностикума в РПГА со стандартной сывороткой эритроциты осаждают, доводят до 1 О - 50 о 7 в-ной густоты наполнителем, быстро замораживают и лиофилизируют. Наполнителем служит раствор Гемодез, разведенный до концентрации поливинилпирролидона 1,5 о/о, с добавлением саха- розы до концентрации 7,5 в 7 о. Температура замораживания будет - 60, ОС, Продолжительность высушивания - 30 - 35 ч при постепенном повышении температуры до 20 С. Ампулы и флаконы герметизируют под вакуумом,Перед употреблением содержимое ампулы (флакона) разводят нейтральным 0,85 о 7 о-ным раствором хлорида натрия с формалином и проверяют специфическую активность готового препарата в РПГА со стандартной противодифтерийной или противостолбнячной антитоксической сывороткой.Способ получения диагностикума, заключающийся в том, что эритроциты обрабатывают формалином, отмывают физиологическим раствором, обрабатывают дубильной кислотой, отмывают танизированные эритроциты, сенсибилизируют анатоксином и фиксируют формаль 1 ф дегидом, отличающийся тем, что, с целью повы.шения чувствительности, специфичности и ста.бильности препарата, формалинизированные эритроциты обрабатывают детергентом до и после танизации, а для сенсибилизации исполь%зуют прогретую фракцию анатоксина, выделенную путем молекулярного фильтрования через мембраны ХМ-ЗОО, ХМ-ООА и РМДиафло.Источники информации, принятые во внимание при экспертизе: