Способ получения протеолитических ферментов

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ ц 576336 Союз Советских СОцидпистических Респубпикприсоединением заявкиГасударственныи камитет Саввта Минн,"трав СССР аа делам изааретеннй и аткрытий(088.8) та опубликования описания Об,10.7(71) Заявители Балтрушис, Д, И. Гашкайте, А. Ю. Лугаускене и Г, А. Махтеевааунасский политехнический институт им. Антанаса Снечкусаи Институт биохимии АИ Литовской ССР ИТИЧЕСКИХ ФЕРМЕНТО-уреидокислоть ственно 0,001 - еды.штамм Вас 111 цз Изобретение относится к области микробиологии, а именно к способу выращивания продуцентов протеолитических ферментов и увеличения активности продуцируемых ферментов.Известен способ получения протеолитических ферментов, например при выращивании продуцента Вас 111 цз тпезеп 1 епсцз ПЬш на питательной среде, содержащей источники углерода, азота, фосфора и стимулятор роста 11.Недостатком известного способа является высокая стоимость некоторых наиболее эффективных -замещенных р-аланинов, а также то, что при длительном хранении это соединение темнеет и частично разлагается,С целью удешевления целевого продукта по предлагаемому способу в качестве стимулятора роста используют натриевые соли М-замещенных р-уреидокислот общей формулы:й - И - СХ - ХН,СН, - СН,тпезеп 1 епсцз ПБш выращивают в колбах 250 мл в 50 мл полусинтетической питательной среды следующего состава, г/л:Крахмал нерастворимый 100,0 5 Глюкоза 10,0Цитрат аммония (гидрат) 30,0 Однозамещенныи фосфорнокислый калий 2,0Двузамещенный фосфорно 10 кислый натрий 3,0Сернокислый магний 1,5 Сернокислый кальций (гидрат) 1,5 Железо сернокислое, закисное(гидрат) 0,02 15 Марганец сернокислый 0,00125Медь сернокислая 0,0075 и-Аминобензойная кислота 0,01 Крахмал подвергают гидролизу с помощьюамилазы до появления с йодом коричневой ок раски.В качестве стимулятора берут натриевуюсоль Х-фенил-Х-карбамидо+аланина в количестве 0,001 в ,15% от объема питательной среды. Выращивание проводят на качалках 25 при 37" С в тсчсиис 42 - 44 ч ири начальномрН 7,2. После выращивания рН определяютр Н-метром ЛПУ.Далее известным методом определяют вессухой биомассы при 105 С, протеолитическую 30 активность по методу Ансона, модифициро1 елок Вес сухой биомассы Количество натриевой соли Ч- рени лч- к арб амидо-З-аланина,оог Специфическая активность,.,/м г./мл контроло контролю контролю 2,47 4,27 3,4053,113,792,75 ванному Куницом, специфическую активность на 1 г сухой биомассы и содержание белка по методу Лаури,На каждую концентрацию стимулятора проводят 6 опытов, результаты которых представлены в таблице.Используемые в способе стимуляторы роста хорошо растворимы в питательной среде, легко синтезируются. Сырье для их синтеза, а именно анилин и бензиламин, дешево и доступно,тем, что, с целью удешевления целевого продукта, в качестве стимулятора роста используют натриевые соли И-замещенных р-уреидокислот общей формулы:К - Ы - СХ - КН,СН, - СН, - СОО 1 Ча,где К - СаНв; С,Нз - СНя -10 Х - О или 5.2. Способ по п. 1, отл ич а ю щ и й ся тем,что 1 Ч-замещенные р-уреидокислоты вводят вколичестве преимущественно 0,001 - 0,15% кобъему питательной среды.15 Источники информации,принятые во внимание при экспертизе1, Авторское свидетельство Ме 495911, кл.С 12 В 3/14, 1972. Формула изобретения1. Способ получения протеолитических ферментов путем выращивания продуцента Вас 11- 1 цз гпезеп 1 ег 1 сцз ПБш на питательной среде, содержащей источники углерода, азота, фосфора и стимулятор роста, о т л и ч а ю щ и й с я Составитель Т, Серебренникова Техред И. Карандашова Корректор Т. Добровольская Редактор В. Блохина Заказ 2279/18 Изд. М 837 Тираж 563 НПО Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж.35, Раушская наб., д. 4/5