Способ получения противогрибкового антибиотика

О П Союз Советских Социалистических Республик) Йриорит сударетвенный комит СССР и дедам изобретении н открытий,779.88 8) о 250179,бюллетень Ж 3 Опубликов ата опубликования описания 25017 Т.М.Воронкина, В.И.Коренева, Г.В,КирсановаБ.Т,мучак, В.В.Оноприенко и И.Н.Колосов(72) Авторы изобретен ио-исследовательский инстипатологии сесоюзиый на Фиаявитель ИЯ ПРОТИВОГРИБКОВООТИКА СПОСОБ ПОЛУАН ом или ге з смеси бензоланом. Изобретение относится к Фармацевтической промышленности, а именно кпроизводству антибиотиков,Известен способ получения противогрибкового антибиотика, заключающийся в том, что культуральную жидкостьЭЫцвоссойцт 1 епа 1 це босс . экстрагируют хлороформом с последующим вы-.делением целевого продукта путеммногостадийной системы очистки, .Этот способ трудоемкий и не обеспечивает достаточный выход и степеньчистоты антибиотика.Отличительной особенностью предлагаемого способа является то, чтоштамм Эс 3 цеост,айцтя 1 емМипт басс.выращивают на питательной среде, содержащей глюкозу и пептон (2,6:1 т 5).Культуральную жидкость при рН 7. экстрагируют смесью растворителей, сос"тоящей из насыщенных и хлорироваиныхуглеводородов (хлористый метилен,хлороФорм, четыреххлористый углерод),например петролейный эфир (т,кип,4070 аС) и четыреххлористый углерод(9:1 по объему). Растворители изобъединенного экстракта частично от":гоняют в вакууме, а осыпавшие кристаллы отделяют фильтрованием, Получен"иый препарат повторно кристаллизуют тП р и и е р 1, Антибиотик получают путем глубинного культивирования Х 6 дтосРа 4 и тт 1 епо 1 ипт при 28 со на среде, содержащей глюкозу (3,9) и пептон (1,5) в колбах на встряхиваемой качалке со скоростью вращения 220 об/мин, рН 6. Продолжительность ферментации 120 ч, Культуральную жидкость фильтруют, фильтрат в объеме 10 л с содержанием антибиотика не .ниже 100 мг/л (т.е, 1 г антибиотика по весу) экстрагируют при рН 7 четыре раза смесью петролейного эфира и четыреххлористого углерода (9:1) при соотношении кулвтуральной жидкости и растворителя 2:1. После разделения сепарированием или центрифугированием объединенный экстракт упаривают в вакууме на роторном испарителе при температуре не выше 30 С до объема 150- 200 мл. Выпадающие при этом кристаллы белого или бледно-розового цвета отделяют Фильтрованием, Получают 0,8 г кристаллического продукта с содержанием 90 по весу антибиотика.П р и .м е р 2, Кристаллизацию очищенного препарата, полученного по примеру 1, осуществляют из смеси бенАнтибиотик имеет формулу Н НСо НВ СОМИеОН Ме К Мв НС 1 Иф и 1.т, С 02%Ие Формула изобретения- М еаза - МеЬеп - ОН,Составитель Г.СмирноваТехред С,Мигай Корректор И.Демчик Редактор Л.Письман Заказ 785 В/1 Тираж 67( Подписное ЦНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 1.13035, Иосква, Ж, Раушская наб., д.4/5Филиал ППП Патент, г.ужгород, ул.Проектная, 4 зол-гексан (2:1) . Для этого навескупрепарата растворяют в 15-кратномобъеме растворителя (15 мл на 1 г ве,щества) при температуре кипения, Затемраствор выдерживают при ОС до полного выпадения кристаллического:.продукта. После фильтрования и высушивания фполучают мелкокристаллический порошокантибиотика белого цвета.Полученный антибиотик характеризуется следующими свойствами:т.пл. 214"214,5 фСЩ39,9 ( с 0,4 10в этиловом спирте); У-спектр в этиловом спирте Я оц 211 (Е 9500);мол.вес 737; ИК-спектр имеет полосыпоглощения в области 3426, 3360,3325 1640, 1520 см . 15Эмпирическая формула С 7 Н Н 7 0.На основании ИК-спектра, результатов титрования кислотами и щелочамии исследовании продуктов кислотногогидролиза установлено, что антибиотик нейтральный полипептид, При жесткомгидролизе антибиотика 5 н. НС 0 в 20 ной уксусной кислоте (20 ч 105 С) образуются, моль: Ь -лейцнн 1;0 -алло-изолейцин 1 Ь - К -метиллейцин 1;Э-эритро-ф -оксилейцин 1;Ь- М -метилаланин 3При легком гидролизе (Зн. НС 0 в50-ной уксусной кислоте) получаютпептиды30Н- ФеЬеп - ею - Ме Оа - ОН,Н-МеМа- НцЬепЯе - МеМа-ОН,Н- (.еп- Ме Иа - М еаза - Нц(.еп - Ие -Н мюМе нСнС О жНй 1 СНИе,Способ получения противогрибковогоантибиотика путем глубинного культивирования Здуеосбайцт 1 еопа 1 цт бсисс,на питательной среде, содержащей источники углерода, азота, минеральныесопи, с последующим выделением целевого продукта иэ культуральной жидкости экстракцией органическими раст-.ворителями и очисткой кристаллизацией,о т л и ч а ю щ и й с я тем, что, сцелью повышения выхода и чистоты антибиотика, продуцент выращивают насреде с пептоном и глюкозой, экстракцию осуществляют смесью углеводородаи хлорированного углеводорода прирН 6-7 и кристаллизуют из смеси бензол-гексан (2:1),