Способ определения активности продуцентов пенициллинацилазы

Номер патента: 511344

Авторы: Белкинд, Голуб, Романовва

ZIP архив

Текст

О П А С А К И Е 1,1 511 З 44ИЗОБРЕТЕНИЯ Союз Советски Социалистических Республикй АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВ Дополнительное к авт. свил в Заявлено 25,11.74 21) 2078 3 13(51) М,С 12 К 1/ОС 01 И 3316 ПРИСО з) пр линением заявки осударотоеииь 1 и комитетСоевто Министров СССРоо двам кзобретоиион отирмтий срнтетбликовано 2 63,577.1(72) Авторы изобретения М. Бел Г. И. Голуб Олеано союзный научно исследомте льс кий инс Гитут антибиотико) Заявнте РБДЕЛБНИЯ АКТИВНс",ГИ ПОДУИП1 г-НИ 11 ИД т 1 Р 1 длцИ гД 1 ПОСОБ Изобретение относится к ме ромышленности, а именно к сппинскойобам опре ензилпениния егоидролизаашиванич клады ва циллино ска, пропг.танного КОЛОНИИ И ВЫДеРжи на дуцентов пенициллин: ения активност после чего об и установлени аботку продуктов интенсивности о илазы, Известен способодуцентов пеници,тивности ем гид пределения а осушествляют ис инацилазь 1 пу ",азовой бенз ся приме Около лпеницилл олиза пенициллинаци а и обработки проду иметиламинобензальа ия окрашенных соеди становлением интенс ктов ги дг идом нений пара - разова- дующим ролиз для о посл ИХ ОК ивности н Однако измок, требует ма трудо=ерий в жид 1 й метод весьирования бактдвух раз. Прэтомук центрифугиреловеком 10 т пасс и определ кой среде не мене нии активности по приходитсяованию, Для20 аналидважды прибег ать проведения одним енее 6 ч ся не обретениа опред зов требуеЦель и ускорение и упроцления активности прое процес рикатывают шпателем Открытые чашки с ди 5 " . ри 37 ОС ПосДиски т;цательноповерхности средь,ами выдерживают. ГОНердойм надуцентов пенициллинацилазы,Для этого колонии клеток продуц пенициллинацилазы вырашивают на Г среде, а гидролиз осуществляют пут.04.76.51 оллетень15 (53) УД Предлагаемый способ поясняетНром его выполнения, П р и м е р50 бактеоий е ЬСПЕ ф. С Геее СОМЬЕ1 О АТСС 9637 высеивают на чашку Петри скукурузным агаром ( кукурузный экстракт%, агар агар - 1,59 ь, рН 7,4), содержашим 0,1;о фенилуксусной кислоты, которая является НЕЕдуктэрол 1 синтеза пеннциллинацнл у зы. Чашки инкубируют в. течение 48 часпри телтпературе 18 , На выросшие коло нии накладыва 1 ОГ диск фильтровальчой бума ги, предварительно смоченнсй в 3,5%-ном растворе бензилпенициллина, в 0,1 М фос- О фат 11 олг буфере, рН 7,8 и высушенной в течение 30 мин при 37 С.(оставнтелв 1 СеребренниковаРедактор Н,Козлова Техред А.КамътшниксваКоррект"р М.йейзерман рираж Подписное Ц 11 И 11111 " осударствениого комитета Совета Министров СССР но делам изобретений н открытий Москва, 113035, Раушская наб., 4 11 реднрнитис 11 атент, Москва, Г 59, Бережковская наб., 24 3ле этого диски снимают и выдерживают;ЗО мин, при комнатной температуре. Затем вписки. смачивают в 5%-ном растворе парадиметиламинобензальдегида, ттриготовленном в 20% растворе уксусной кислоты в этано ле, и высушивают при комнатной температуре. На высушенных дисках в местах со прикосновения с колониями клеток, продуцируюших пенициллинацилазу, образуются зоны желто-зеленого цвета. По интенсивности 10 окрашивания, которую определяют визуально, судят об активности продуцента. Использование предлагаемого способа позволяет одному человеку произвести в15 течение 6 час полуколичественный анализ 1 О,ООО субклонов, что существенно ускоряет отбор активйых штаммов,Формула изобрете ния Способ определения активности продуцен тов пенициллинацилазы путем гидролиза пенициллинацилазой бензилпенициллина и обработки продуктов гидролиза парадиметиламинобензальдегидом для образования окра шенных соединений с последующим установлением интенсивности их окрашивания, о т л и ч а ю ш и й с я тем, что, с целью ускорения и упрощения процесса, колонии клеток продуцентов пенициллинацилазы выращивают на твердой среде, а гидролиз осуществляют путем накладывания диска, пропитанного бензилпенициллином, на колонии и вы держивания его, после чего обработку продуктов гидролиза и установление интенсивно сти окрашивания осуществляют на диске.

Смотреть

Заявка

2078633, 25.11.1974

ВСЕСОЮЗНЫЙ НАУЧНО-ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИЙ ИНСТИТУТ АНТИБИОТИКОВ

РОМАНОВВА НИНА БОРИСОВНА, ГОЛУБ ЕФИМ ИЛЬИЧ, БЕЛЬКИНД АННА МОИСЕЕВНА

МПК / Метки

МПК: C12K 1/00

Метки: активности, пенициллинацилазы, продуцентов

Опубликовано: 25.04.1976

Код ссылки

<a href="https://patents.su/2-511344-sposob-opredeleniya-aktivnosti-producentov-penicillinacilazy.html" target="_blank" rel="follow" title="База патентов СССР">Способ определения активности продуцентов пенициллинацилазы</a>

Похожие патенты