Способ получения -лизина

1111 497768 ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕН ИЯ Соаз Советских Социалистических РеспубликМ. Кл. С 01/ асударствеииыи комитет Савета Мииистрав СССРса делам иаааратеиий(72) Автор изобретени Иностранць Кииоши Накаиама и Хироши Хагино(Япония) Иностранная фирма Киова Хакко Когио Компани Лимитед71) Заявите 4) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ Ь-ЛИЗИН стым по сравнению с известным, поскольку позволяет получить 1.-лизин из любой формы гидантоица с выходом более высоким, чем по известному способу,5 В качестве микроорганизмов можно использовать бактерии, плесцевыс и дрожжевые грибки, актицомицеты и др. Как правило, наилучший результат дают бактерии. Что касается состава культуральной среды, то она мо 10 жет быть сццтетической или натуральноц и должна содержать основные питательные вещества, Этими веществами явля 1 отся источники углерода, азота, неорганические соединения и т. д, В качестве источника углерода15 используют глюкозу, фруктозу, маннозу, галактозу, сахарозу, мальтозу, лактозу и др, Эти вещества могут применяться индивидуально или в виде смеси двух или более компонентов. Источником азота могут служить20 разные органические или неорганические соединения, например аммиак, хлористый аммоний, сернокислый аммоний, азотнокислый аммоний, углекислый аммоний, цитраты, мочевица или другие азотсодержащие соединения. 2 аПример1% глюкозы,дикалийсульф0 025% Мд30 тракта, 0,3%(33) ЯпонияОпубликовано 30.12,75. Бюллетень4 Дата опубликования описания 05,04. Изобретение относится к усовершенствованному способу получения оптически-активного 1.-лизина, являющегося незаменимой аминокислотой, в связи с чем оц находит широкое применение в качестве добавок к пищевым продуктам, а также в медицине.Известны различные химические способы получения лизина, в частности путем расщепления гидантоинового кольца. При этом получают лизин в виде рацемической смеси, котору 1 о при необходимости разделяют на оптические антиподы.Однако способы, позволяющие получить непосредственно Ь-лизин из любой формы исходного продукта це описаны.С целью упрощения процесса предлагают получать оптически-активный Ь-лизин непосредственно из 1.-, Р- или Р 1-5-(4-амипобутил)-гидантоина,Для этого по предлагаемому способу 1.-лизин получают с помощью биохимического гидролиза, а в качестве исходного продукта используют 1.-, Р- или Р 1.-5-(4-аминобутил)-гидантоин, который подвергают биохимическому гидролизу в присутствии микроорганизмов, способных к разрыву гидантоинового кольца. Процесс проводят в аэробцых условиях, предпочтительно при рН 6 - 11 и температуре 20 - 35 С.Предлагаемый способ является более про 1, 10 мл среды с содержанием 0,2% сульфата аммония, 0,05% ата, 0,05% моцокалийфосфата, Оч 7 Н 20, 0,3% дрожжевого экскарбоната кальция стерилизуют497768 Выход 1.-лизина цз 5-(4-ахгинвбутил)-гндантоина,Я Микроорганизм ьг-форхга ( 1.-форхга АегоЬас 1 ег аегодепея КУ 3052АггЬгоЬасгег 11 аевсепя Кг 3154Вас 111 ця сегецв Ку 3315Вас 111 цв яцЬ 1111 в Кг 3363Се 11 ц 1 огпопов се 11 авеа К г 3491Вге 1 Ьасгег 1 цгп 11 пепв К 1 3471СогцпеЬасгсг 1 цгп рогпзегцае Кг3539 АТСС 9682М 1 сгососсцв рата.11 по 1 цг 1 сцв КУ4306 АТСС 1558Ряецг 1 огпопов г 1 Ьойан 1 па 1 О 3959ъ 1 Ьг 1 о регсо 1 апв КУ 4171Епг 1 огпусез 11 Ьц 11 дег Кг 5124Сапг 1 Ыа гпусог 1 еггпа К г 5804Авреги 111 ця ац агпог 1 К г 3 51 49 49 28 53 56 49 51 49 53 25 49 56 49 49 51 51 53 56 56 51 49 53 56 56 П р ед м ет изобретения Составитель Л. ИоффеРедактор Т. Никольская Техред Е, Подурушина Корректор Е Хмелева Заказ 400,13 Изд Ъ"о 2107 Тираж 529 Подписное ЦНИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5Типогвафия, пр, Сапунова, 2 в пробирке и добавляют Р- или 1.-5-(4-амипобутил)-гидантоина до концентрации последнего 5 мг/мл, Среду засевают различными микроорганизмами и выращивают эту культуру с аэробным встряхиванием при 30 С в течение 96 ч,В таблице приведен выход 1.-лизина. П р и м е р 2. 30 мл культуральной среды, состоящей из 0,5% глюкозы, 1% дрожжевого экстракта, 1 % пептона и 0,3% поваренной соли, выливают в коническую колбу на 250 мл и стерилизуют при 110 в течение 10 мин. Засевают культуру клетками Рвецдогпопаз 11 цогезсепв КСг 3954, 1 Х 1 К 1 Ц.-В, выращенных на косом бульонном агаре при 30 в течение 24 ч, и добавляют Р 1.-5- (4-аминобутил) -гидантоип до общей концентрации 0,1 вес. %. Процесс проводят при аэробном встряхивании при 30 в течение 24 ч. По окончании реакции раствор содержит 38,4 мг 1.-лизина, что составляет выход 90% от теоретического.П р и м е р 3, Процесс ведут по примеру 2, но в качестве микроорганизмов используют Вас 111 цв ро 1 угпуха 1 х 1 Й 1 г 1.-694. Полученный реакционный раствор содержит37,0 мл 1.-лизина,П р и м е р 4. В коническую колбу на250 мл вливают 40 мл культуральной среды5 с 2,5% глюкозы, 0,5% хлористого аммония,0,05% монокалийфосфата, 0,05% МАЗО 7 Н 20,0,2% Ы-.-амина (торговое название разныхгидролизатов казеина) и 0,5% карбонатакальция и стерилизуют. После этого добавля 10 ют 0,5 вес. % 1.-5-(4-аминобутил)-гидантоинаи засевают Мсгососсцв д 1 Шаппсцв702 ЛТСС13286 в виде культуры на косом агаре при28, Процесс проводят при аэробном встряхивании при 30 С в течение 72 ч.15 Полученный раствор содержит 2,0 мг/мл1.-лизина.П р и м е р 5, В коническую колбу на250 мл вливают 40 мл культуральной средыс 2,5% глюкозы, 0,2% хлористого аммония,20 0,05% монокалийфосфата, 0,05% дикалийфосфата, 0,05% семиводного сульфата магния,0,2% пептона и 0,5% карбоната кальция, после чего добавляют 0,5 вес, % Р-(4-аминобугил)-гидантоина. Эту среду засевают М 1 сго 25 соссцз д 1 ц 1 агп 1 сцз901 ЛТСС 13287 из культуры на косом агаре после размножения ее втечение 24 ч при 37 С, Затем эту культуруразмножают при 30 в течение 72 ч с аэробным встряхиванием,30 Полученный реакционный раствор содержит2,58 мг/мл 1.-лизина. 35 1. Способ получения 1.-лизина, отл и ч а ющ и й с я тем, что, с целью упрощения процесса, 1.-, Р- или Р 1.-5-(4-аминобутил)-гидантоин подвергают биохимическому гидролизупри помощи микроорганизмов в аэробных ус 40 ловиях с последующим выделением целевогопродукта известным способом,2. Способ по и. 1, о т л и ч а ю щи й с я тем,что процесс проводят при рН среды 6,0 - 11,0ц температуре 20 - 35 С.