Способ получения рифамицина в

и 464128 ОПИСАНИЕИЗОБРЕТЕНИЯК ПАТЕНТУ Союэ Советских Социвлистическик Ресвуйик1) Зависимый от патент 124 9(32) Приор (33) Итали ет 29.11.72 (31) 32248-А/72 Государст веннь;н комитет овета Министров СССР по делам изьоретвннй и открытий(088,8) бликовано 15,03.75, Бюллетень1 та опубликован исания 16,07.75 72) Авторы изобретен Иностранцырмине Ренато Паскуалуччи и Джузепп(Италия) 1) Заявитель 11 носзранная фирма Аркифар Индустри Кемике дель Трентино С,п.А.(54 к области ме ГлюкозаСоевая мукаМука землянСульфат аммКН 2 Р 04СаСОзМ 50 7 НО х орехния 2 6 1 3,0 50 мг 4 мг 10 мг 2 мг 1 мг мония ачная вода буферным До 100 7 лбы инкубируют при встряхивателе при 5 см в течение 148 -ицина В составляеторганизм Яг., Ст 5/А же условиях, что и в ивной фазы. В конечследующую фермента,3 После 48 ч роста28 С, 10 об. % продукпереносят в 500 мл корудованную перегонкойследующей среды, г: а встряхивателе при а вегетативного роста бу Эрленмейера, обои содержащей 100 мл 25 10 00 5хов Изобретение относитсядицины.Известен способ получения рифамицина В путем выращивания Ягер 1 отпусез а 1 Ьоч 1 пасеоцз АТСС 12951 в аэробных условиях на среде, содержащей источники углерода, азота и минеральные соли, и последующего выделения целевого продукта.Для повышения выхода целевого продукта по предлагаемому способу в качестве проду цента используют штамм Ягер 1 отпусез Ст 5/А,Способ получения рифамицина В осуществляют следующим образом.Пример 1. Культуру Ягер 1 огпусез Ст 5/А инокулируют в колбе Эрленмейера на 500 мл, 1 содержащей 100 мл следующей среды, г:Мясной экстракт 5 Дрожжевой экстракт 5 Пептон 5 Гидролизат казеина 3 Глюкоза 20 Хлористый натрий 15 Дистиллированная вода До 1000 мл Я 4 2Сц 504 5 Н 20Хп 504 7 Н 20О Мп 504 4 Н 20Ре 504 7 Н 20СаС 12 6 Н 20Молибдат амДисгиллиров5 рН (доведенорастворами)Инокулированные к28 С на вращающемс250 об/мин с ходом наО 156 ч. Выход рефа4000 - 4500 мкг/мл.П р и м е р 2. Микровыращивают при техпримере 1 для вегетат5 ной фазе используютционную среду, г:Мука земляных оСоевая мукаГлюкозаО Пропиленгликоль464128 409,54,920,850,0010,0040,0020,050,01До 1000 мл Составитель С. МалютинаРедактор Л. Василькова Техред М. Семенов Корректор Л. Денисова Заказ 1974/12 Изд. Ло 1249 Тираж 529 Подписное ЦНИИПИ 1 осударственн 1 по комитета Совета Министров СССР по делом изобретений и открытий Москва, Ж, Раунскак наб., д. 4/5(КН 4) 2 о 04КН,РО,МЯО, 7 Н,ОМолибдат алюминияМпБО, 4 Н,ОСоС 1 6 Н 207 пЬО, 7 НОРес 104 7 Н 20Вода1рН доводится буферами (6,6 - 6,7 послестерилизации).Ферментацию проводят как и в примере 1.Максимальный выход рифамицина В достигает 5400 мгк/мл. При хроматографическом анализе не обнаружено заметного количества продуктов, являющихся аналогамириф амицина,Пример 3. Микроорганизмы Яг., Ст 5/Авыращивают в тех же условиях, что и в примере 1, но с использованием колб на 2000 мл,содержащих 500 мл среды. Через 48 ч используют три колбы для инокулирования90 л той же среды в ферментаторе из нержавеющей стали. Вегетативный рост имеетместо при перемешивании 500 об/мин и аэрации (объем в мин) при 28 С. После 36 ч рост мицелий (по объему) достигает 7%, эту вторую вегетативную фазу используют для инокулирования фермента- тора на 130 л, содержащего 900 л ферментационной среды. Рост организмов наблюдают при 28 С приперемешивании и аэрации.Через 150 ч ферментации спектрофотометрический титр составляет 5200/5500 мл. Хро 5 матографический анализ показывает присутствие рифамицина В,Общая характеристика культуры.Споры и воздушный мицелий отсутствуют.Вегетативный мицелий - от темно-коричне 10 вого до светло-коричневого с оттенкамиоранжевого, темно-оранжевого цвета. Растворимые пигменты от темно-светло-коричневогодо желтого с зеленым оттенком.Для определения биохимических характе 15 ристик используют следующие среды. Агаризованный яблочно-кислый Са - слабое переваривание. Агаризованный тирозин не гидролизуется, Желатин - без разжижения, без пиг.ментации. Лакумусовое молоко - пептониза 20 ция или коагуляция отсутствуют,Среда 6 по Шилингу и Готлибу (индикатор на базе ацетата свинца) - образованиебез пигментации. Дектрин и крахмал гидролизуются. 25Предмет изобретенияСпособ получения рифамицина В путемвыращивания культуры - продуцента рода Ягер 1 отусез в аэробных условиях на среде, ЗО содержащей источники углерода, азота и минеральные соли, и последующего выделения целевого продукта, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что, с целью повышения выхода целевого продукта, в качестве продуцента используют З 5 штамм Ягер 1 оп 1 усез 6 5/А.