Штамм 15157а-продуцент п-дифенолоксидазы

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕН ИЯ К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУр) 440405 Союз Советских Социалистических Республик(61) Зависимое от авт. с ельства аявлено 04,08.72 (21) 1818924/28-1 л. С 120 13/О С 121( 3/00 51 аявкис присоединени Гасударственньи комитет Совета Министров СССР по делам иэебретеиийи открытий 32) Приоритетпубликовано 25.08,7 53) УДК 577.151,0(088.8) юллетеньЗт Дата опубликовани тсания 29.09.75, Антропова 1) Заявитель Украинский научно-исследовательский институт целлюлозно бумажной промышленностиТАММ М/СОК РАСЕМОЗББ 151 ДУЦЕНТ п-ДИфЕНОЛОКСИДАЗ мопроток лот ацетПриме фермента ном спос ромицета 25 зом,К 1 мл6 авляют2,5 мл ацетколоримет30 та произво фильтрата приора а-нафтола, ,О. Через 30 минржания фермснультивированног 5 мл 0,1 М раст тного буфера; рН руют. Расчет сод ят по формуле: йства.фатный лигнин тв (п-оксикорич овой, протокате Изобретение относится к микробиологической промышленности и касается получения нового штамма, используемого для получения фермента п-дифенолоксидазы,Предлагаемый штамм может быть использован также при очистке сточных вод от лигнина и его производных, для получения мономеров лигнина, например ванилиновой, п-оксибензойной, протокотеховой, сиреневой и других,кислот и мономеров.Известен штамм Мисог гасетояиз 15157.Данный штамм получен из штамма Мисог гасетозиз 15157 путем адаптации его к лигнину и имеет следующую характеристику.Морфология.На жидкой лигнинсодержащей среде мицелий формируется пленкой. Гифы светло-желтой окраски. Спорангиеносцы изогнутые, высота свыше 50 мм, толщина 26 - 28 мк. Спорангии 70 - 85 мк в диаметре, темно-бурые, Споры имеют утолщенную оболочку, образуются на пленке, желтого цвета, шаровидной формы, шиповатые. Ризоиды коричневого цвета. На твердой суслоагаровой среде мицелий одноклеточный без перегородок. Колонии белого цвета.Биохимические своГидролизует суль осины до ароматических вещес ной, п-оксибензойной, ванили ховой, гоатеховой, сиреневой и феруловой кисванилона и ванилина),ом получения лигнинразрушающегоп-дифенолоксидазы при поверхностбе культивирования,продуцента микМисог гасетозиз 15157 а. С 5-суточнои культуры Мисог гасетозиз15157 а, выращенной на сусло-агаре, произво дят смыв спор стерильной водопроводной водой. Полученной споровой суспензией засевают матрацы на 1 л, содержащие по 200 - 500 мл лигнинсодержащей среды. Матрацы термостатируют при температуре 27+2 С в течение 15 8 - 10 суток. Ферментный препарат получаютотделением мицелил гриба от культуральной жидкости на фильтре. Концентрируют филь- трат на вакуум-сушильной установке (или вакуум-сушильном шкафу) до 1/10 первоначаль ного объема, В сконцентрированной культуральной жидкости определяют активность и-дифенолоксидаза по окислению а-нафтола калориметрически на ФЗКМ.Активность определяют следующим обра440405 Составитель М. ЛаринаТехред Е. Борисова Корректор Е. Рогайлина Редактор А. Бер Заказ 2698/9 Изд Юо 575 Тираж 506 Подписное ЦНИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5Типография, пр. Сапунова, 2 ЕхСх -оЕогде С., - искомая концентрация окисленногофенола и соответственно активноСть,мг/мл;Е., - оптическая плотность исследуемогораствора;Ео - оптическая плотность используемогофенола;Сев концентрация используемого субстрата, выраженная в мг/мл,Активность п-дифенолоксидазы, продуцируемой Мисог гасетозия 15157 а - 0,02-0,0 б мг/млкультуральной жидкости,Предмет изобретенияШтамм Мисог гасетозиз 15157 а - продуцент п-дифенолоксидазы. Морфология.На жидкой лигнинсодержащей среде мицелий формируется пленкой, гифы светло-желтой окраски. Спорангиеносцы изогнутые высотой 5 свыше 50 мм и толщиною 26 - 28 мк. Спорангии 70 - 85 мк в диаметре, темно-бурые. Споры образуются на пленке желтого цвета шаровидной формы, шиповатые ризоиды коричневого цвета.10 На твердой сусло-огаровой среде мицелийодноклеточный без перегородок, Колонии белого цвета.Биохимические свойства,Гидролизует сульфатный лигнин осины до 15 ароматических веществ (п-оксикоричной, п-оксибензойной, ванилиновой, протокатеховой, гомопротокатеховой, сиреневой и феруловой кислот, ацетованилона, ванилина).