Способ определения антител
Похожие патенты | МПК / Метки | Текст | Заявка | Код ссылки
Номер патента: 357984
Автор: Воробьев
Текст
Союз Советских Социалистических Республиквисимое от авт. свидетельства11 с 2300 Заявлено ЗО.Х 1.1970 ( 1602515 31-16) с присоединением заявкиПриоритетОпубликовано ОЗ.Х.1972, Бю комитет по делам зобретений и открытий при Совете Министров СССРДК 576,8,097.5(088,8) еньата опубликования описания 26.Х 11.1972 Авторизобретения. Воробьев Заявитель ПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ АНТИТ сится,к ским м избытка флуороиоцианата натрия) твора электронны)м в отдельные промл. Наиболее ярко та обозначают, как мина. Содержание ляемое по Лоури,Изобретение опно мно к иммунологиче етния,Известен способ определения антител путем использования одного из вариантов Бепрямого метода люминесцентной микроскопии, соглаоно которому фиксированный в мазке корну скуля рный антиген обрабатывают испытуемыми антителами, а затем флуоресцирующей антиглобулиновой сывороткой. Известный способ не обеспечивает чувствительности реакции при облучении акриламидного геля ультрафиолетовым светом.Цель изобретения - увеличение чувствительности реакции и определение антител как к корпускулярным, так и,к растворимым антигенам - достигается тем, что специфический антигон метят флуорохромом, комплекс антитело-меченый антитен отделяют от свободного меченого антигена диск-электрофорезом в акриламидном геле и результат учитывают по интансивности свечения свободного и связанного антигена.П р и м е р. Для испытания чувспвительности ислользуют традиционный объект иммунологии - алыбумин человеческой сыворотки. Окр антенный известным способом альбумин фильтруют через колонку с сефадексом, предварительно уравновешенную электродным буфером. Одновременно с,освобождением альбуиина от хрома (флуоресцеина изот происходит замена физрас буфером. Элюат собирают 5 бирки порциями по 1 - 1,5окрашенную порцию элюа раствор меченого альбу белка в расвворе, опреде составляет 4 - 5 мгlмл.0 Приготовляют столбики 7% -ного акриламидного геля, используя для мелкопорисгого геля трисчбуфер с р)Н 7,5, а для крупно- пористого теля трис-буфер с рН 5,5. В ка честве электродного буфера иопользуюттрис-,вероналовый буфер с рН 7,0. Приготовив гели и раствор меченого альбумина, приступают к определению его рабочей дозы.Для этого приготовляют последовательные 20 разделения меченого альбумина. 0,05 или0,1 мл каждого разведе)ния наносят на столбики геля и проводят электрофорез. После окончания электрофореза гели просматривают в ультрафиолетовом свете и отмечают 25 по,"леднее разведение антитена, дающее четкую светящуюся полосу в нижней части геля, Это разведение )принимают за рабочую дозу меченого антигена.Приготавливают последовательные разве дения изучаемой сыво)ротки. Смешивают0,05 мл каждого разведения сьпворотки с ра357984 Предмет изобретения Составитель Т. Головина Техред Т. Ускова Корректоры: А, Степановаи Н. Прокуратова Редактор Г. Ивчинкова Заказ 4112/4 Изд.1715 Тираж 406 Подписное ЦНИИПИ Комитета по делам изобретений и открытий при Совете Министров СССР Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5 Типография, пр, Сапунова, 2 бочей дозой меченого альбумина. По 0,1 - 0,15 мл смеси наносят на гели и лроводят электрофорез.При,наличии в сыворотке антител они соединяются с меченым антигеном. Комплеюс антитела-меченый антиген в силу своей большой величины и маленькопо заряда остается в верхней части геля, а свободный меченый антиген быстро перемещается в нижнюю ч алость г,еля.После окончания фореза тели просматри,вают в ультрафиолетовом свете и отмечают последний гель, тде светящаяся полоса находится в верхней части. Это и будет наибольапее, разведение сыворотки, связывающее рабочую дозу, меченого антигена, т. е. ее т 1 нтр. Способ определения антител путем взаимодействия со специфическим .антигеном с по 5 следующим просмотром препарата в удьврафиолетовых лучах, отличающийся тем, что,с целью увеличения чувствительности и возможно 1 сти применения,метода для определе=ния антител,как к корпуокулярным, так и10 растворимым антигенам, специфический антиген метят флуорохромом, юмплекс антителомеченый антигерои отделяют от свободногомеченого антигена диск - электрофореаом вакриламидном геле и результат учитывают15 по интенсивности свечения свободного и связанного антигена,
СмотретьЗаявка
1602515
Л. В. Воробьев
МПК / Метки
МПК: A61K 39/42
Метки: антител
Опубликовано: 01.01.1972
Код ссылки
<a href="https://patents.su/2-357984-sposob-opredeleniya-antitel.html" target="_blank" rel="follow" title="База патентов СССР">Способ определения антител</a>
Способ определения антител к антигену вируса гепатита дельта
Номер патента: 1751681
Опубликовано: 30.07.1992
Авторы: Абдукаюмов, Алимаксумов, Ананьев, Вязов, Голованова, Щеголев
МПК: G01N 33/53, G01N 33/576
Метки: антигену, антител, вируса, гепатита, дельта
...1. Выделение дельта-антиге 4 г печени погибшего больного хроническим гепатитом дельта заливали 20 мл буферного раствора (состав, М: гуанидинхлорид 6; йаС 0,15; ЭДТА 0,025; трис-НС 0,05; рН 7,5), гомогенизировали 10 мин в гомогенизаторе Поттерэ и центрифугировали гомогенат в течение 30 мин при 100009, Надосэдочную жидкость сливали и использовали как препарат дельта-антигена,Выделение антидельта,5 мл сыворотки крови больного хроническим гепатитом дельта (РИА титр анти- дельта 1:200000) диализовали в теченйе 24 ч против 0,01 М фосфатного буфера рН 8,0. Раствор осветляли центрифугированием (100009, 5 мин) и наносили на колонку с сефадексом ДЕАЕ Аобьемом 20 мл, уравновешенную 0,01 М фосфатным буфером рН 8,0. Элюцию проводили тем же буфером....
Штамм гибридных культивируемых клеток mus мusсulus l продуцент моноклональных антител к антигену 8 возбудителя мелиоидоза рsеudомоnаs рsеudомаllеi
Номер патента: 1791450
Опубликовано: 30.01.1993
Авторы: Барков, Липницкий, Луговая, Свиридов, Синюкова, Фарбер, Храпова
МПК: C12N 5/00
Метки: антигену, антител, возбудителя, гибридных, клеток, культивируемых, мusсulus, мелиоидоза, моноклональных, продуцент, рsеudомаllеi, рsеudомоnаs, штамм
...ацзсццз 1. ВСКК(П)276 Д для получения моноклональных айотител.Моноклональные антитела к антигену 8возбудителя мелиоидоза получают из куль туральной жидкости среды), в которой клетки штамма выращивают вне организма ииэ асцитной жидкости мышей, которым клетки штамма вводят внутрибрюшинно,Для получения антител иэ культураль ной жидкости клетки штамма выращивают встандартных условиях: при температуре 37 С, влажности 98%, СО 2 - 5% в среде культивирования, Затем производят постепенный рассев культуры, Клетки выдерживают 0 для пролиферации без смены среды до достижения максимальной плотности, при которой клетки погибают. Культуральную жидкость осветляют центрифугированием и используют как источник антител.5Для определения титра...
Штамм гибридных культивируемых клеток животных mus мusсulus l. продуцент моноклонального антитела к антигену мембран жировых глобул женского молока
Номер патента: 1698287
Опубликовано: 15.12.1991
Авторы: Авдеев, Барышников, Жордания, Кадагидзе, Казачкина, Кармакова, Короткова, Якубовская
МПК: C12N 5/20, C12P 21/08
Метки: антигену, антитела, гибридных, глобул, женского, животных, жировых, клеток, культивируемых, мusсulus, мембран, молока, моноклонального, продуцент, штамм
...специфичности, клонируют методом предельных разведений на фидере из клеток селезенки и тимуса мышей ВА 1 В/С:Для приготовления фидера кусочки тимуса и селезенки разрушают в стеклянном гомогенизаторе Поттера, Взвесь клеток фильтруют через 2 слоя марли, Суспензию клеток разливают по 0,1 мл в лунки 96-лу 40 45 50 роля используют сыворотку крови мыши,35 а также поликлональные антитела кроликаТитр антител в культуральной жидкостиопрсделяют в иммунофлюоресцентном тесте. Титр антител в культуральной жидкости равен 500,5 Для выращивания асцитной опухоли изштамма гибридных клеток пригодны мыши самки ВА 1 ВС. Интактным мышам за 1 - 7 дн дс прививки опухоли вводят внугрибрю. шинно по 0,5 мл 3%-ного пептона на вазели новом масле, Клетки гибо 7...
Штамм гибридных культивируемых клеток животных mus мusсulus l. продуцент моноклональных антител к антигену рsеudомоnаs рsеudомаllеi, не реагирующих с близкородственным возбудителем сапа
Номер патента: 1740415
Опубликовано: 15.06.1992
Авторы: Кулаков, Разина, Титова, Храпова
МПК: C12N 5/00
Метки: антигену, антител, близкородственным, возбудителем, гибридных, животных, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, продуцент, рsеudомаllеi, рsеudомоnаs, реагирующих, сапа, штамм
...антител к видоспецифическому антигену Р.рзецбоааИе 1,Моноклональные антитела получаютлибо из культуральной жидкости (при культивировании "ин витро"), либо из асцитической жидкости (при культивировании гибридом "ин вива"). Для демонстрации их избирательной (в отношении возбудителя мелиоидоза) специфичности используют метод иммуноферментного анализа, прямой и непрямой иммунофлюоресценции,Иммуноферментный анализ.В качестве антигена на твердой фазе для сравнительного анализа в ИФА используют водно-солевые экстракты из взвесей инактивированных бактерий (двухсуточные культуры либо Р,щаИе либо Р.рзецбощаИе 1, типичных штаммов, обладающих полным набором антигенов, присущих каждому виду), подвергнутых обработке ультразвуком и осветлению...
Штамм гибридных культивируемых клеток mus мusсulus l продуцент моноклональных антител к антигену микобактерий человеческого типа мyсовастеriuм тuвеrсulоsis н rv с молекулярной массой 20 к д
Номер патента: 1794949
Опубликовано: 15.02.1993
Авторы: Авдиенко, Капина, Куликовская, Литвинов, Черноусова
МПК: C12N 5/00
Метки: антигену, антител, гибридных, клеток, культивируемых, мusсulus, мyсовастеriuм, массой, микобактерий, молекулярной, моноклональных, продуцент, тuвеrсulоsis, типа, человеческого, штамм
...10 М2-меркаптоэтанола, 50 ед/мл гентамицина,Характер роста: стационарная суспензияМетод снятия; встряхиваниеЧастота пассирования:2-3 суток Посевная доза: 2-3 10 клеток/мл5Кратность рассева: 1;2-1:3Консервация клеток: клетки заморожены после 1,3, 10, 15 и 25 пассажей в культуре и после роста в виде асцитной опухоли в мышах, Общее количество ампул - 30, по 4-5 млн клеток в ампуле, Криозащитная сре"да: эмбриональная телячья сыворотка с 1020 одиметилсул ьфоксида, Режимзамораживания: клетки в криозащитнойсреде хранили 1-3 сут при -70 С, после чегопомещали в жидкий азот. Выживаемостьпри размораживании - 80 о ,5 Сведения о контаминантах линии: бактерии - нет,грибы - нет,микоплаэма - нет,дрожжи - нет,Морфология культуры; культура...
Предыдущий патент: Система автоматического управления реаниматором
Следующий патент: 357985
Случайный патент: Устройство для автоматического пуска турбонасоса при падении давления в нагнетательной магистрали