Способ получения креатинкиназы

Номер патента: 279892

Авторы: Кринска, Четверикова

ZIP архив

Текст

279892 ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ Союз Советских Социалистических Республиккомитет оо делам иаобрвтений и открыт ври Совете Министре СССРубликовано 26,Ч 111.1970. Бюллетень27 Дата опубликования описания 19,Х 1,1970 вторыобретения Е. П, Четверикова и А. В, КрннскаяИнститут биологической физики АН ССС Заявител АТИ Н КИ НАЗЫ СПОСОБ ПОЛУЧЕНИ рифугированием,при температуре минус 5 плюс 2 С, Надосадочную жидкость оставляют на ночь в холодильнике, и если нужно фильтруют через бумажный фильтр. Для осаждения фермента полученный раствор охлаждают до 0 - минус 5 С и медленно добавляют охлажденный до минус 5 - минус 10 С этанол до концентрации 70% при постоянном перемешивании, Смесь оставляют на 2 час, пос ле чего выпавший осадок фермента отделяютцентрифугированием в течение 15 мик при плюс 2 - минус 5 С и растворяют в небольшом количестве 0,01 М глицинового буферного раствора (рН 9,0). Диализ для удаления 15 спирта производят при 0 - 4 С в течение20 час против глицинового буферного раствора. В случае появления осадка раствор фермента центрифугируют и получают прозрачный бесцветный раствор, содержащий 20 - 20 25 мг/мл препарата с активностью 250 ед/мг. 25 Спосоо получения креатинкиназы путем экстракции мышц кролика хлористым калием осаждения балластных белков, тепловой де натурации, отделения осадка с последующим З 0 диализом надосадочной жидкости и кристалИзвестны способы получения креатинкиназы путем экстракции мышц кролика хлористым калием, осаждения балластных белков, тепловой денатурации, отделения осадка с последующим диализом надосадочной жидкости и кристаллизации целевого продукта.По предлагаемому способу надосадочную жидкость охлаждают и обрабатывают освобожденным от тяжелых металлов этанолом до достижения концентрации 70%. Это позволяет повысить качество фермента и упростить технологию его получения.Для получения креатинкиназы мышцы кролика гомогенизируют и экстрагируют 0,01 М раствором хлористого калия, Экстракт отделяют от осадка центрифугированием, подщелачивают аммиаком до рН 9,0, добавляют 5,3 г на 1 л экстракта хлористого аммония для осаждения катионов кальция и магния и затем осаждают балластные белки этанолом, Для осаждения берут спирт-ректификат, обрабатывают его едким натром (5 мл 50%-ного раствора на 1 л) для удаления перекисей, перегоняют и затем встряхивают в течение 1 час с катионитом дауэкс=50 Х 1 в водородной форме (20 г сырого катионита ста 1 л спирта) для удаления примесей тяжелых металлов. После осаждения балластных белков смесь нагревают до 20 С, оставляют на 2 час при перемешивании и отделяют осадок центредмет изобретения279892 Составитель В. Л. Таратута Корректор Т. А, Уманец Редактор О. Н. Кузнецова Заказ 3331/17 Тирад( 480 ПодписноеЦНИИПИ Комитета по делам изооретеиий и открытий при Совете Министров СССР Москва, К, Раушская наб., д. 4,5 Типография, пр. Сапунова, 2 Лизации целевого продукта, отличающийся тем, что, с целью повышения качества фермента и упрощения процесса, надосадочную жидкость охлаждают и обрабатывают освобожденным от тяжелых металлов эта олом до достижения концентрации 70%.

Смотреть

Заявка

1174888

Е. П. Четверикова, А. В. Кринска Институт биологической физики СССР

МПК / Метки

МПК: C12N 9/12

Метки: креатинкиназы

Опубликовано: 01.01.1970

Код ссылки

<a href="https://patents.su/2-279892-sposob-polucheniya-kreatinkinazy.html" target="_blank" rel="follow" title="База патентов СССР">Способ получения креатинкиназы</a>

Похожие патенты