261268

263268 ОПИСАН И ЕИЗОБРЕТЕНИЯК ПАТЕ НТУ Сове Соеетскин Социалистических РеспуслинПриоритет 21.11.1966,10081/66, ЯпонияОпубликовано 06,1.1970. Бюллетень4Дата опубликования описания ЗОХ 1.1970 Комитет по делам чаооретений и открытий при Сосете тинистров СССРпония) СПОСОБ ПРОИЗВОДСТВА АРОМАТИЧЕСКИХ СОЕДИНЕНИИ ПРОИЗВОДНЫХ БЕНЗОЛА1Известны химические способы получения душистых (ароматических) веществ - производных бензола, заключающиеся в возгонке бензойной смолы, окислении толуола путем реакции замещения в бензольном ядре или окисления боковой цепи бензольного ядра.Предлагается способ производства ароматических соединений производных бензола, например пара-оксиоензойной кислоты, параоксибензальдегида, ванилинового спирта, ванилиновой кислоты, 3,5-диметокси-оксибензилового спирта, заключающийся в том, что штаммы дрожжей, например Яасс 1 тагогпусез АТСС 20018, Басстагогпусез сегенза 1 АТСС 152248, Тогиа цЯз АТСС 15239, Яасс 1 тагогпусез зае АТСС 20018, культивируют в аэробных условиях на соеде, содержащей углеводы, минеральные соли, а также замешенные производные бензойной кислоты или бензальдегидан, у которых метоксильная группа находится в положении 3 или в положениях 3 и ,5-ом и которые имеют формулу де Я, представляет собой СНО или СООН- ОСНа, Ка - Н, ОН или ОСН:. Во время культивирования микроорганизмов их ферменты деметоксилируют вышеуказанное соединение в 3 нли в 3 и 5-ом положениях, накапливая в культуральной среде соот ветствующие ароматические соединения - производные бензола, например пара-оксибензойную кислоту, пара-оксибензальдегид, ванили- новый спирт, ванилиновую кислоту.П р и м ер 1. К кульгуральной среде, состоя щей из 100 г глюкозы, 2,5 г 1-аспарагиновойкислоты, 1,0 г первичного кислого фосфата калия, 3,0 г сульфата магния (гептагидрата) и 1 л водопроводной воды, добавляют 0,1 г ванилина, рН среды доводят до 4 - 5. К этой среде прибавляют 100 мл раствора, содержащего споры Басстагоптусез заЕе и представляющего собой такую же среду, как описано выше, но без ванилина. Зту смесь культивируют, встряхивая, при температуре 28 - 30 С в 20 течение пяти дней, затем центрифугируют. Вполученный верхний прозрачный раствор вносят 1 г гидроокиси калия, после чего его концентрируют под уменьшенным давлением до обьема, равного примерно 200 мл, Остаток 25 подкисляют серной кислотой и непрерывно втечение двух дней экстрагируют эфиром для выделения продуктов ферментации. Большую часть растворителя отгоняют, и концентрированный эфирный раствор встряхивают с не большим количеством насыщенного раствораЗаказ 053/бЦНИИПИ Комитета Тираж 480 Подписное делам изобретений и открытий при Совете Министров СССР Москва, Ж, Раушская наб д. 4/5 Сапунова биография, пр бикарбоната натрия для отделения кислых и нейтральных, компонентов. Кислую фазу, растворимую в насыщенном растворе бикарбоната натрия, слегка подкисляют серной кислотой и затем экстрагируют эфиром, Получа ют приблизительно 0,08 г экстракта. Эти экстрагированные продукты исследуют посредством хроматографии на бумаге, для чего их помещают на поперечную сторону фильтровальной бумаги и три раза получают хрома тограмму в восходящем токе 1,5 И насыщенного аммиаком н-бутанола. Из двух отдельных абсорбционных поясов (верхнего и нижнего) выделяют соответственно два вида кислых продуктов. 15Около 0,0 б г сырого продукта, полученного из верхнего пояса, очищают сублимацией при пониженном давлении, подвергают элементарному анализу - измеряют точку плавления, смешанную пробу и снимают ультрафиолето вый и инфракрасный спектры. Точка плавления 211 С. В смешанной пробе с подлинным образцом пара-оксибензойной кислоты не наблюдается депрессия точки плавления. Кроме того, величины, полученные из анализа инфра красного спектра и при элементарном анализе, хорошо согласуются одна с другой. На гра фике инфракрасного и ультрафиолетового спектров наблюдается полное совпадение даже в отдельных частях соответственно. Та- З 0 ким образом один из выделенных продуктов идентифицирован как пара-оксибензойная кислота. Было установлено, что другой является ванилиновой кислотой. После удаления кислых компонент при встряхивании эфирно- З 5 го экстракта с насыщенным раствором бикарбоната натрия его также исследуют методом хроматографии на бумаге. После размывания в восходящем токе 1,5 М насыщенного аммиаком и-бутанола опрыскивают пара-нитроани линдиазонием и 2,4-динитрофенилгидразоном, Образуются пара-оксибензиловый спирт, пара-оксибензальдегид, ванилиновый спирт. Не- превращенный ванилин отсутствует.Пример 2. 1 кг глюкозы, 25 г 1-аспарагиновой кислоты, 10 г первичного кислого фосфата калия, 30 г сульфата магния (гептагидрат), 1 г ванилина и 10 л водопроводной воды смешивают и доводят рН смеси до 4 - 5. Эту среду помещают в ферментатор емкостью 20 л 50 и добавляют туда раствор, содержащий споры Зассйагогпусез за 1 се, который является такой же питательной средой, как описано выше, но без ванилина. Эту смесь культивируют при продувании воздухом со скоростью 1 О л 1 мин в течение пяти дней. Полученный ферменгативный раствор разделяют, как описано в примере 1. Получают 0,55 г кристаллической пара-оксибензойной кислоты.Пример 3. 100 г глюкозы, 2,5 г 1-аспарагиновой кислоты, 1,0 г первичного кислого фосфата калия, 3,0 г сульфата матния (гептагидрат), 0,1 г ванилина и 1 л водопроводной воды смешивают и устанавливают рН этого раствора, равным 4 - 5. Эту смесь прибавляют к 100 мл раствора, содержащего споры Тогц 1 а цИ 1 з, представляющего собой такую же питательную среду, но без ванилина. Культивируют ее при встряхивании при температуре 28 - 30 С в течение пяти дней. После обработки ферментативного раствора (как описано в примере 1) получают 0,04 г пара-оксибензойной кислоты Предмет изобретения1. Способ производства ароматических соединений - производных бензола, например пара-оксиоензойной кислоты, пара-оксибензальдегида, ванилинового спирта, ванилиновой кислоты, 3.5-диметокси-оксибензилового спирта, отличающийся тем, что его осуществляют путем аэробного выращивания дрожжей, продуцирующие ферменты которых способны отщеплять от производных бензойной кислоты или бензальдегида метоксильную группу, находящуюся в положении 3 или в положениях 3 и 5, представленных общей фор- мулой где 1 с, является СНО или СООН; Ка - ОСНа, 1 са - Н, ОН или ОСНз, на питательной среде, содержащей указанные выше производные бензойнсй кислоты или бензальдегиды, в присутствии углеводородов и необходимых минеральных солей.2, Способ по п. 1, отличающийся тем, что используют штаммы дрожжей Зассйагогпусев АТСС 20018, Яассйаготпусез сегеиз 1 а АТСС 15248, Тогц 1 а цИ 1 з АТСС 15239, Яасс 11 агогпусез за 1 се АТСС 20018.