Способ выделения ферментных инактиваторов

Номер патента: 247134

Авторы: Иностранна, Иностранцы, Федеративна, Ханс

ZIP архив

Текст

ОПИСАНИЕИЗОБРЕТЕН ИЯК П АТЕ НТУ Сова Советскиа Социалистическиа Республикависимый от патента.1967 ( 1155142/28-1 аявле Приоритет 26 Х.1966. Р 49298 1 Ча/6 а. Федеративная Республика Германии Комитет по дел публиковано 20,И.1969. Бюллетень21 иаобретений и открытий при Совете Министро СССРДата опубликовани писания 1 З.Х 1.196 Авторыизобретения ИностранцыВерле и Ханс Фрая Республика Геостранная фирманфабрикен Байерная Республика Г Ойгентцмании) аяви АГрмании) ПОСОБ ВЪДЕЛЕНИЯ ФЕРМЕНТНЪХ ИНАКТИВАТОРОВ Способ выделения ферментных инактиваторов, например калликреина, из комплекса энзима, присоединенного к полимерному носителю, не известен.Для получения высокоочищенного инакти ватора предлагается комплекс энзима и полимерного носителя приводить в воде в контакт с раствором калликреин-инактиватора. После этого полученный комплекс промывают, диссоциируют и изолируют таким образом 10 инактиватор.Способ выделения ферментных инактиваторов, например калликреина, заключается в том, что энзимы, например трипсин, химотрипсин, калликреин, присоединяют ковалент но к нерастворимому или растворимому носителю (полимерному веществу), Полученный при этом продукт присоединения приводят в воде в контакт с раствором калликреин-инактиватора, полученный при этом комплекс очи щают промыванием, например, водой и буферным раствором диссоциируют и выделяют калликреин-инактиватор.Причем носители (полимерные вещества) должны содержать функциональные группы, 25 способные реагировать с энзимами по методу химии пептидовнапример смолы, содержащие группы ангидрида хлорангидрида кислоты, изоцианата и азида или смолы, содержащие активированные атомы фтора, 30 Диссоциация достигается, например, посредством смещения рН или добавлением веществ, ослабляющих действие молекулярного обмена, например, мочевины,П р и м е р. Для получения калликреин-колонки 400 мг калликреина гомогенизпруют в 200 мл 0,2 М фосфатного буфера с рН 7,5 при 0 С. Затем добавляют 2 мл 1%-ного раствора гексаметилендиамина, размешивают,в течение 3 миц, после чепо добавляют 100.000 КЕ (2 упротеин КЕ), растворенные в 20 мл 0,2 М фосфатного буфера с рН 7,5, Полученную суспензию размешивают около 8 час при температуре 0 - 4 С. Для выделения калликреина 80000 единиц калликреина смешивают приблизительно с четырехкратным обьемом порошка целлюлозы и заливают в колонку (вышеописанную), охлажденную водой и заполненную 8 ерас 1 ех Сгслоем в 1 см. Последгпою промывают буфером с рН 7,8, содержащим 0,1 И триэтаноламина и 0,2 М ХаС 1, адсорбируют в колонке 75000 единиц. из них 40000 единиц элюируют аммонийацетатным бу фером с рН 2,0.Калликреин-инактиватор можно элюировать от калликреин-колонки 8 М раствором моче- вины с добавлением буфера с рН 7,8 0,1 М триэтаноламина при нейтральном рН, После отделения мочевины с помощью колонны247134 Составитель Т, ПолянскаяТехред Л, В, Куклина Корректор Г. И. Тарасова Редактор А. Бер Заказ 2887/15 Тираж 480 ПодписноеЦНИИПИ Комитета по делам изобретений и открытий при Совете Министров СССРМосква, Раушская, д. 4/5 Типография, пр. Сапунова, 2 ерЬаг 1 ех 6-25 выход фермента каллекреининактиватора составлял около 1007 о. Предмет изобретенияСпособ выделения ферментных инактиваторов, например калликреина, из комплекса энзима, присоединенного к полимерному носителю, отличающийся тем, что, с целью получения высокоочищенного инактиватора, комплекс энзима и полимерного носителя приводят в воде в контакт с раствором калликреин инакпиватора, после чего полученный комплекс промывают, диссоциируют и изолируют таким образом инактиватор,

Смотреть

Заявка

1155142

Иностранцы Ойген Верле, Ханс Фритц, Федеративна Республика Германии, Иностранна фирма Фарбенфабрикен Байер, Федеративна Республика Германии

МПК / Метки

МПК: C12N 9/48

Метки: выделения, инактиваторов, ферментных

Опубликовано: 01.01.1969

Код ссылки

<a href="https://patents.su/2-247134-sposob-vydeleniya-fermentnykh-inaktivatorov.html" target="_blank" rel="follow" title="База патентов СССР">Способ выделения ферментных инактиваторов</a>

Похожие патенты