Способ культивирования мукоровых и гифальных грибов

Союз Советских Социалистических Республик,аяв цо 10,Х. я я в к ц Л присоединение 1 риоритетОпубликовано 01 Л 11,1 Комитет по деламобретений и открытий юллетень МСовете т 4 инистров СССР Дата опубликования описания 30.1:,196 Авторыизобретенц Билай и 3. 3. Коваль. М. Пидопли аявитель СПОСОБ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ МУКОРОВЬ И ГИФАЛЬНЫХ ГРИБОВ(объегяоат 750 с.тгз) - 500 с,тгз среды. рН такойсреды 5,2 - 5,5. После стерилизации в колбыили матрасы стерильно добавляют отдельноперетопленнь 1 й, взвешенный и измсльче,шыйдо получения пороц;кообразцой массы парафин, Навсска парафина для каждой колбы 4 г,для каждого матраса 3 г,И Для обеспечения хорошего роста грибов необходимо обеспечить равномерное распределение парафина в толще питательной среды,Приготовленную с парафином среду разливают в пробирки, чашки Петри или чашки Ко.15 ха и производят иглой посев грибов, используяпри этом суспецзию спор, смываемую основной жидкой стерильной средой из культуры цасусловом агаре.Посевной материал выращивают в тсчеццс20 двух суток при 45, 52 и 54 С в зависимости огвида культивирусзгых грибов. Выращенный основной жидко 5 косяка на пробг бу, или с одной коццдии. После ты содержимоеИзвестен способ культивирования гифальцых и мукоровых грибов на твердом, предварительно измельченновт парафине в присутствии водной минеральной питательной среды, содержащей источники азота, фосфора, калия и магния, при аэрации среды с последующим отделением выращенных дрожжей от культу- ральной жидкости,Для улучшения условий использования парафина в процессе культивирования и интенсификации таким путем процесса по предлагасмому способу измельчение парафина ведут до порошкообразного состояния, а процесс куль. тивирования осуществляют при высокой температуре, предпочтительно равной 42 - 56 С, обеспечивающей плавление парафина.Вводить измельченный парафин при глубинном культивировании грибов следует двумя порциями, первую из которых вносят во время посева грибов, а вторую спустя два-три дня с начала процесса культивирования,Предлагаемый способ заключается в следующем.Готовят питательную среду, например минеральную среду Чапека, следующего состава: ХаКОз 2 г; КНзРО, 1 г; МАМБО, 7 Н.О 0,5 г; КС 1 0,5 г; Ге(50)з 7 Н,О 10 тгг; дистиллированная вода 1,г. Эту среду разливают в матрасы или колбы в зависимости от способа выращивания (глубинного или поверхностного) посевнои материал смываюг й стерильной средой с одного рке ня одцн матрас цли колплсцки в колбе. Подсчитывают получения необходимой густо- разливают при глубицнохт спо. торы или в колбы на качалке, тном - в матрасы,:1 акпв 2829,119 Тп а;и ЗЗО 11 одппс:и ЦИИИПИ Коцптста по дспгм пвоорстс;пй и открытп 11 при Совстс Мшпсров СССР ,1 осква, Цсптр, пр. Ссрсва, д. 4 Типографии, вр. Сапунова, 2 При глубинном выращивании посевной материал расходу 1 от из расчета на 300 - 400 ль 1 жидкой среды смыв спор из одной пробирки со скошенным агаром, Такое же количество посевного материала расходуют и при поверхностном способе,Продолжительность культивирования зависит от принятого способа выращивацця, т, е. при поверхностном пять-семь, прц глубицпом ссм ь-дсв 51 ть дней.При поверхностном культивировании парафин лучше вносить вначале, так как образующаяся во время роста грибов пленка очень легко разрушается даже при незначительном движении срсды в матрасе и затем пе восстанавливается.При глубинном способе выращивания парафин лучше прибавлять двумя порциями: первую половину необходимого количества - во время посева, а втору 1 о половицу - спустя два-три дця.Фермецтация ведется при температурах 45, 52 и 5 оС. Многие штаммы грибов на третий- пятый день образуют пигменты.После окончания ферментации полученную биомассу промывают для освобождения от оставшегося парафина петролейным эфиром или же другим растворителем парафина. Для парафинового гача лучше применять метилэтилкетон или метилизобутилкетон.Культуральную жидкость с выращенным грибом перед фильтрацией центрифугируют. Поднявшийся ца поверхность жидкости парафин отделяют (оц не содержит мицелия гриба). При фильтрации мццелий промывают водой, нагретой до 50 - 60 С, и оставшийся неиспользованный парафин, таким образом, псреводят в жидкое состояние, что облегчит отделение его от продуктов фермсцтации. Для полного удаления парафина мицелий на фильтре промывают гексаном и отфильтровывают через капроновый фильтр,13 процессе срмсцтаццц в зависимости от трсбоьанцй, предъявляемых к получаемому продукту, можно регулировать р 1-1, который обычно повышается от 5,2 - 5,5 до 6,5 - 7,5, Для этого применяют КОН, КаОН цли аммиак.Для ускорения процесса можно использовать стимуляторы - спородрож 5 кевой автолц. зт, экстракт липидов и другие широко извсст 11 ые вещества.Для культивирования применяют грибы с высоким температурным оптимумом, вь 1 деленныс по специальной методике из почв и рубца рогатого скота. К цим относятся Лзрегр 11 пз огутас, Лзрегр 11 пз 1 цпт 1 да 1 ць, Мцсог рцз 111 цз, Лзрсгр 11 цв п 1 дсг, РЫкорцз огузае, ЛЫс 11 ц согугпЬ 11 сга, ЛЬз 1 г 11 а гагпоза, Мцсог Ыегпа 11 з, Мг 1 зог гасспюзцз, Мпсог с 1 гс 1 пе 11 оЫез. 20 Предмет изобретения1. Способ культивирования мукоровых и гифальцых грибов на твердых, предварительно измельченных парафинах, в присутствии водной минеральной питательной среды, содержащей неоники азоа, фосфора, каля и магния, и прц аэрации среды, от,гичсиои 1 ийся тем, что, с целью улучшения условий использования парафина в процессе культивирования и интенсификации таким образом процесса, измсльчсццс парафинов ведут до порошкообразцого состояния, процесс культивирования осуьцсствляют при высокой температуре, обеспеццвающей переход парафина из твердого в :кидкос состояние.2. Способ по п. 1, от,1 ичаоигийся тем, чтотемпература культивирования равна 42 - 56 С.3. Способ по и, 1, от,гича 1 ощийся тем, что,ц 1 эи глубинном культивировании грибов измсльцецный парариц вводят в питательную 40 среду двумя разными порциями: первую вовремя посева грибов, а вторую спустя два-три дня с начала процесса культивирования,