Способ получения ферментного препарата кислойпротеиназы

Союз СоветскихСоциалистическихРеспублик Зависимое от ав свидетельстваКл, ба, 146 а, 22/О Заявлено 02.Х 1.1966 ( 1110528/28-13) аявкис присоединени ПК С 121 с С 12 К ДК 663.11:576.8.093,1ПриоритетОпубликовано Комитет ло делам иаобретеиий и открыти лри Совете Министров СССР11,1968. Бюллетень7 Дата опубликования описания 5.1 Ч.196 Авторы,изобретен В, В. Дорохов и нов алов Всесоюзный научно-исследовательский институт ферментно и спиртовой промышленности,Заявите СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ фЕРМЕНТНОГО ПРЕПАРАТА КИСЛОЙ ПРОТЕИ НАЗЫью продуцировать кислую пр Известен способ получения ферментного препарата кислой протеиназы путем культивирования продуцирующих ее плесневых грибов на питательной среде, содержащей источники углерода, азота и необходимые для роста минеральные соли.Для повышения активности чистой протеиназы и сокращения .продолжительности процесса выращивания предложено в качестве источника углерода использовать глюкозу, а в качестве источника азота и стимулятора биосинтеза кислой протеиназы-пептон. В сре. ду вводить стабилизатор кислой протеиназы в виде ионов Хп, процесс вести при двухступенчатом температурном режиме, поддерживая на первой ступени более низкую температуру, чем на второй.По предлагаемому способу используют предпочтительно штаммы Азрегр 11 цз атчаптог 1200 и Азрегр 11 цз огугае79, При этом в питательную среду следует вводить дополнительный стимулятор - казеин, температуру,первой ступени поддерживать 27 - 28 С, второй ступени - 30 - 31 С. Для Азрегр 11 цз ачатпоп200 рН среды целесообразно поддерживать на уровне 1,8 - 2,2, а для Азрегр 1- 1 цз огугае79 3,0 - 3,5.Способ заключается в следующем.Плесневые грибы, например Азрегр 11 цз атчаптог 1200 или Азрегр 11 цз агугае79,культивируют на питательнои среде следующего состава (в г/л): глюкоза 50 - 60; пентон 9,5; казеин 0,1 - 0,2; КНРО 4 0,5; Мд 304 0,15; Мп 304 0,02; Хп 504 0,02; Ре 504 0,02.В этой среде в качестве источника углеродаиспользуют глюкозу, источника азота и стимулятора биосинтеза кислой протеиназы - пептон, стабилизатора кислой протеиназы ионы Хп и дополнительного стимулятора биосинтеза кислой протеиназы - казеин.Показатель рН среды в начале процессакультивирования микроорганизмов поддерживают на уровне 5,0 - 5,5, затем спустя 12 час для Азрегр 11 цз огугае на уровне 3,0 - 3,5, а для Азрегр 11 цз ажагпог 1 1,8 - 2,2.Процесс культивирования ведут при двухступенчатом температурном режиме, причем температура на первой ступени, длительность которой 20 - 24 час, 27 - 28 С, а температура на второй ступени 30 - 31 С, длительность которой 20 час, При таком температурном режиме создаются оптимальные условия для роста микроорганизмов и повышения биосинтеза кислой протеиназы, максимальная активность фермента проявляется после 36 - 40 час с начала процесса роста культуры.При соблюдении указанных выше условийобеспечивается наибольший выход кислой протейназы.30 Способност о210788 Предмет изобретения Составитель М. И, Андреева Техред Л. К. Малова Корректоры: Н, И. Быстрова и В. К. КрыловаРедактор В, ф, Чулкова Заказ 576/4 Тираж 530 ПодписноеЦИИИПИ Комитета по делам изобретений и открытий при Совете Министров СССРМосква, Центр, пр. Серова, д. 4 Типография, пр. Сапунова, 2 теиназу на среде с глюкозой и пептоном, молочным казеином и ионами цинка при соблюдении рН и температурного режима в указанных выше пределах обладают плесневые грибы различных видов. Так, из 2 О исследуемых культур грибов рода Азрегр 11 цз и Реп 1 с 1111 цгп 220 оказались продуцентами кислой протеиназы. Однако наиболее активными штаммами являются Азрегр 11 цз аьчагпог 1200, проявляющий оптимум действия при рН 1,8 - 2,2, и Азрегр 11 цз огукае79 - при рН 3,0 - 3,5. 1, Способ получения ферментного препарата кислой протеиназы путем культивирования продуцирующих ее плесневых грибов на питательной среде, содержащей источники углерода, азота и необходимые для роста минеральные соли, отличающийся тем, что, с целью, повышения активности кислой протеиназы и сокращения продолжительности процесса выращивания, в качестве источника углерода используют глюкозу, а в качестве источника азота и стимулятора биосинтеза кислой протеиназы - пептон,;при этом в среду вводят стабилизатор кислой протеиназы в виде ионов Хп, а процесс культивирования ведут при двухступенчатом температурном режиме, поддерживая на первой ступени процесса более низкую температуру, чем на второй.2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что в питательную среду вводят до 1 полнительный стимулятор биосинтеза кислой протеиназы - казеин.3. Способ по п. 1, отличающийся тем, что в качестве продуцентов кислой протеиназы используют предпочтительно штаммы Азрегр 11 цз ажатог 1200, Азрегр 11 цз огугае79.4, Способ по пп. 1 - 3, отличающийся тем, что на первой ступени процесса культивирования поддерживают температуру, 27 - 28 С, на второй 30 - 31 оС, а рН для Азрегр 11 цз ажатог 1200 1,8 - 2,2, а для Азрегр 11 цз огукае79 - 3,0 - 3,5.