Способ инактивации инфекционности вируса лихорадки западного нила

(5 ГОСУДАРСТВЕННОЕ ПАТЕНТНВЕДОМСТВО СССР(ОСПАТЕНТ СССР) фПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕ ЕКЦИА А огии, гигиенырства здравоспечения ре рнэбиш вили(21) 4929528/13 (22) 19,04.91 (46) 30.01.93. Бюл. М 4 (71) Научный центр эпидемиол и профзаболеваний Министе о ранения и социального обе с ублики Грузия (72) М.Б, Мирцхулэва, Н, О, Ба АД.Цибэдзе и Э.А,Иванидзе (7 В) А,Д. Цибадзе Изобретение относится к медицине, в стности вирусол огии.В вирусологии известны разные спосоинактивации ннфекционности вирусов, они малоэффективны - не достигается лная инактивация инфекционности.Наиболее близким решением к изобрению является инактивация инфекционно- и при действии на вирусы ионизирующего лучения и больших доз ультрафиолетовосвета, однако действие этих факторов наду с инактивацией инфекционности русов нарушаег целостность и функциорование клетки-хозяина.Целью изобретения является поюЬая активация инфекционности вируса лиходки Западного Нила без нарушения цело- ности и функционирования клеток.Это достигается тем, что в предлагаем способе полная инактивация инфекциности вируса лихорадки Западного Нила стигается путек; воздействия переменномагнитного поля на зараженные клеточе культуры. Применяются магнитные ля звуковых частот, которые не нарушают(54) СПОСОБ ИНАКТИВАЦИИ ИНФ ОННОСТИ ВИРУСА ЛИХОРАДКИ 3 П Д НОГО НИЛА(57) Использование: медицина, вирусоло гия, биотехнология. Инактивации инфекционности вируса лихорадки Западного Нила достигают обработкой переменным магнитным полем с частотой 2000 - 6000 Гц, индукцией 0,0002 - 0,25 мГ, временем экспозиции 25 - 30 мин монослоя культуры клеток, зараженного вирусом, после культивированияо в течение 48 ч. 1 табл.целостность и функционирование клетокпри нецитопатических величинах индукции поля и используются в физиотерапии.Исследования проводились на зараженных вирусом лихорадки Западного Нила культурах клеток Чего и Ч-Е. Исходный титр вируса 7,5-8,0 19. В экспериментах использовался вирус, разведенный до 6,0 1 ц. Титр вируса в реакции гемагглютинации (РГА) - 1:5000-1:10000. После заражения вирусами клеточных культур абсорбцию вируса на клетки проводили при температуре 37 С в течение 1-1,5 ч. После чего неадсорбированные вирусы удаляли, а монослой промывали и заливали средой поддержки, После этого этапа помещенные в пеницилиновые флаконы заряженные культуры инкубировали в течение 18 ч при 37 С и: помещали потом в соленоид, где создавалось переменное магнитное поле (частота 50-10000 Гц, индукция 0,0001-0,5 мТ) при прохождении переменного синусоидального тока от генератора ГЗ-ЗЗ, Спустя 24 ч после воздействия магнитным полем удостоверялись по РГА в присутствии вируса в1792425 Зависимость вьскивземостн сосунков при введении ВКЖ зараженных клеточных культур от частоты и индукции приложенного к культурам переменного магнитного поля+ не развиваетсл хаЦПД-цитопатическое самое наблюдается для необлинкубационного периода:ректерная для заражения картидействие переменного магнитн летальным исходом.го поля на клеточные кул Составитель М.МирцхулаваРедактор З.Ходакова Техред М.Моргентал Корректор О.Кравцова каз 169 Тираж . Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж, Раушская наб., 4/5 оизводс 1 юнно-издательский комбинат "Патент", г, Ужгород, ул.Гагарина, 101 вирусосодержа щей кул ьтурал ьной жидкости (ВКЖ) и вводили ВКЖ сосункам белых мышей, При введении ВКЖ необлученных полем образцов у сосунков развивалась характерная инфекция с летальным исходом. 5 Зависимость выживаемости сосунков при введении ВКЖ образцов, обработанных переменным магнитным полем, от частоты и индукции поля представлена в таблице. Как видно, в широком диапазоне частот (2000- 10 6000) и индукции (0,0002 - 0,25 мТ) происходит полная инактивация вируса лихорадки Западного Нила -все сосунки остались живыми. Были использованы следующие экспозиции в указанном диапазоне поля - 15 5,10,15,20,25,30,40,50,60 мин., Экспозиция указанным магнитным полем в течение 5 - 20 мин, 50,60 мин и введение ВКЖ этих образцов сосункам приводили к летальному исходу, однако при 20 мин воздействия сосунки 20 погибали после инкубационного периода, Таким образом, полная ииактивация вируса . наблюдается в диапазойе следующих характеристик переменного магнитного поля: частота 2000 - 6000 Гц, индукция 0,0002 - 0,25 25 мТ, время экспозиции 25-40 мин. Допредельные величины: частота 1500 Гц, индукция 0,0001 мТ, время 20 мин. Послепредельные величины: частота 6500 Гц, индукция 0,3 мТ, время 50 мин.Для достоверности у оставшихся в живых сосунков после 30 дней определяли титр антител, который выявился у всех сосунков - 1:20. Что указывает на присутствие вируса в ВКЖ образцов при введении сосункам и отсутствие инфекционности вируса лихорадки Западного Нила при обработке зараженных клеточных культур переменным магнитным полем вышеуказанных характеристик. Формула изобретения Способ инактивации инфекционности вируса лихорадки Западного Нила, заключающийся в том, что выращивают монослой клеток, заражают его вирусом, культивируют в течение 48 ч с последующей обработкой переменным магнитным полем с частотой 2000-6000 Гц, индукцией 0,0002- 0,25 мТ, временем экспозиции 25 - 30 мин,