Питательная среда для определения индекса стафилококков в морской воде

(5 )ск мды М ания понения мс.31. игиенической среОПРЕДЕККОВ В Л н н н д ОСУДАРСТВЕННОЕ ПАТЕНТНОЕДОМСТВО СССРГ СПАТЕНТ СССР) Бюл, М 4следовательский институт обнальной гигиены им.А.Н.МарПИТАТЕЛЬНАЯ СРЕПА ДЛНИЯ ИНДЕКСА СТАФИЛОРСКОЙ ВОДЕ Изобретение относится к медицинскои (санитарной) микробиологии и может быть использовано в бактериологических лабора ориях при контроле морской воды в зона рекреации для гигиенической оценки ее ка ества с целью исключения риска заражени при купании,В применяемых в настоящее время мето ических материалах для выделения стафи ококков как из морс .ой, так и иэ пресной во ы предложено использовать 1 о пептонну воду с 10 О хлорида натрия или мясопе тонный бульон (МПБ) с 8 ф хлорида а рия. Повышенная кс нцентрация хлорида атрия в среде продиктована галотолерантыди Свойствами стафилококков и вносится л обеспечения элективнс сти,В настоящее время во многих прибрежны зонах морей наблюдается процесс эвтро икации, для первой стадии которой ха актерно бурное размножение собственЖ 1792424 А(57) Использование: медицинская (санитарная) микробиология, бактериологический контроль морской воды, Сущность изобретения: предлагаемая среда состоит иэ следующих компонентов: пептон 10,0 г; глюкоза 20,0 г; полимиксин 200000 ЕД, водопроводная вода до 1 л, Использование среды накопления позволяет определить стафилококки в морской воде в индексах, близких к фактическому обсеменению. Среда значительно повышает эффективность санитарно-бактериологического контроля морской воды в зоне рекреации в летний, период, что необходимо для своевременного проведения профилактических мероприятий по оздоровлению моря, 2 табл,ной аутофлоры моря, При использовании в этих условиях вышеуказанной среды или других сред, содержащих хлорид натрия, для индикации стафилококков возникает ряд методических затруднений, Это обусловлено тем, что на солевых средах активноразмножается обширная группа галотолерэнтной микрофлоры моря, большая часть которой представлена галофильными виб-рионами,Количество галотолерантной микрофлоры, по нашим данным, в,июле - августе месяцах в зонах рекреации Черного и Азовского морей достигало 10 10 и более в 1 дм воды, что значительно превышает возможное количество стафилококков в воде пляжей (10 - 10). Кроме того, многие из представителей этой микрофлоры обладают как и стафилококки лецитовителлээной активностью и имею- близкие к ним морфологические и культургльные свойства. В связис этим определение индекса стэфилококков в морской воде при обильном развитии галотолерантной аутофлоры моря становится практически невозможным,Целью изобретения явилась разработка питательной среды накопления, пригодной для выделения и учета количества стафилококков в воде моря в летний период года,Для этого предварительно в экспериментальных условиях изучения сравнительные свойства стафилококков (Я, аогецэ М 208, 1426 а, М. 4266, йг 716) и галофильных микроорганизмов (табл,1), Группа последних состоялэ из восьми часто встречающихся видов, которые отличались по характеру роста на МЖСА(молочно-желточно-солевом агаре), пигментообразаванию и морфологическим признакам. Среди них были идентифицированы 2 вида; Ч.рагапаещоубсцэ, Ч,а 9 поУ 1 сцэ.Приведенные в табл,1 результаты исследований показали, что существенным дифференциальным признаком стафилококков и галофильных микроорганизмов явился лишь рост в пептонной воде без хлорида натрия. Это и было положено в основу разработки среды накопления для определения индекса стафилококков в морской воде.В сравнительном аспекте изучена интенсивность размножения указанных штаммов галофильных микроорганизмов и стафилококков в официальной и разработанной видах питательных сред, Морскую воду в объеме 100 см контаминировали смесью штаммов галофильных микроорганизмов и одним из штаммов стэфилококков. Концентрация гэлофилав в десятки и сотни раз превышала концентрацию стафилококков, Индексы микроорганизмов определяли методом разбавлений с использованием указанных вариантов сред накопления и последующим высевом из них микроорганизмов на подтверждающие элективные среды: для стафилококков - МЖСА с бойаО, гэлофильных микроорганизмов - среда Лифензон.В табл,2 приведены результаты, полученные при посеве опытных образцов морской воды в разработанную среду и общепринятую солевую среду. - 1 опептонную воду с 10 МаО, рН 7,2 - 7,4, которая вошла в научно-техническую документацию. Прежде всего, обращают на себя внимание низкие индексы аутохтонных галофильных микроорганизмов при посеве воды в разработанную среду по сравнению со стандартной средой (12,4 = 4,8-11,22), Тем самым создавались благоприятные условия для развития стафилококков и все изученные штаммы стафилококков интенсивноразмножались в разработанной среде. В10 официальной среде активно размножаласьгэлофильная микрофлора, в то время как дваштамма стафилакокков вообще не удалосьобнаружить, а два других размножалисьзначительна менее активно, чем в разрабо 15 тан ной среде (т 1,4 = 6,79 и 6,3),Чувствительность предлагаемой средыдостигает десятков клеток в 1 дм морскойводы в условиях ее обсеменения галофильной микрофлорой до 10 - 10 в том же объе 5 620 ме, чта является вполне достаточным сучетом существующего допустимого норматива содержания лецитиназоположительных стафилококков - 100 микробных тел в1 дм воды.25 Использование предлагаемой средынакопления позволило определить стафилококки в морской воде в индексах, близких кфактическому обсеменению. Среда значительно повышает эффективность санитар 30 но-бактериологического контроля морскойводы в зонах рекреации в летний период,что необходимо для своевременного проведения профилактических мероприятий пооздоровлению моря.35 Приготовление среды. 10 г ферментативного пептона, 20 г глюкозы растворяютпри нагревании в 1 дм стерильной дистиллированной воды, После растворения ингредиентов устанавливают рН 7,4 - 7,6,40 Разливают в стерильную посуду. Стерилизуют в автоклаве при 112 С 12 мин. Передупотреблением в среду вносят полимиксиниз расчета 200 ЕД на 1 см и уэзливают встерильные пробиркиро 10 см .45 Формула изобретенияПитательная среда для определения индекса стафилококков в морской воде, включающая пептон и водопроводную воду, о тл и ч а ю щ а я с я тем. что, с целью повыше 50 ния элективных свойств среды, она дополнительно содержит глюкозу и полимиксинпри следующем соотношении компонентов:пептон 10,0 г; глюкоза 20,0 г; полимиксин200000 ЕД, водопроводная вода до 1 л,1792424 Таблица 1 Сравнительная характеристика свойств группыгалофильных микроорганизмов и стафилококков Призн вные обозначен МЖСА-среда ЛибензоТаблицмов ндексы стафилококков и галофильных микроорганиэРост на пептонной водбез МаСс 3% МаСс 10% МаСНаличие лецитовителлПигментообразованиеРрст на соедах с 30 %Редукция ТТХОбразование сероводоЮерментзцияглюкозалактозамэльтозаманнитсахарозаР ст при рН 4,0-8,2У тойчивость к полимипенициллинамзритромицинлинкомицинуристомицинулевомицетинутетрациклинустрептомицину+ - положительная реакция у более половины изученных штаммов - отрицательная реакция филлококков с 6 % йаС, галофильных микроорганизмказ 169ВНИИПИ Тираж арственного комит 113035, МосквПодписноепо изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР