Способ определения реактивности клеток крови к биогенным моноаминам

",РО Ор 1 ИСАИ БРЕТЕН проблем СевераТерещенкоО.П., Тихомиров. ие аспекты аккевере, - Л.: Ме(5 Н.ИЯ РЕАКТИВ ННЫМ МОНО к медицинодам исслед медицине, втодам исслеОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ РИ ГКНТ СССР ВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЪСТВУ(71) Институт медицинскихСО АМН СССР(56) Бобров Н.И., ЛомовВ.П. Физиологогигиеничеслиматизации человека на Сдицина, 1979, с. 58. 4) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНОСТИ КЛЕТОК К БИОГЕ МИНАМ57) Изобретение относитс менно к биофизическим м Изобретение относится кчастности к биофизическим медования крови.Цель изобретения - снижение травматичности при проведении исследования, а также упрощение способа,В гепаринизированный капйлляр дли-: ной 15 см из пальца обследуемого производят забор крови, затем микрокапилляр отстаивают под углом в 45 в течение 30 мин, в результате чего происходит разделение клеток. Взвесь лейкоцитов или зритроцитов суспензируют в калий-фосфатном буфере (0,14 М рН 7,4). К 50 мкл суспензии добавляют 5 мкл адреналина (1 10 6 М) или серотонина (1,25 мкг, 0,0001 мл) и инкубируют в течение 1 ч при 25 С. Это опытнаяпроба,вания крови. Цель изобретения - у ние способа и снижение травмати Способ включает забор проб крови и в присутствии моноаминов. Из заб однократно крови готовят.опытнуа рольную пробы клеток крови путем зирования их в буферном растворе, в опытную пробу биогенный моноам кубируют обе пробы, добавляют фл центный зонд, регистрируют св зонда на микроскопе ЛЮМАМ, а тивности клеток крови к биогенным аминам судят по разности вел флюоресценции зонда в.опытной рольной пробах. В качестве флюоре ющего зонда используют 1-анилинолино-суд ьфонат. прощечности.анализ ранной и конт- суспенвводят ин, ин- уоресечение о.реак- моноичины и конт- сциру- нафтаВ контрольную пробу вместо раствора моноамина добавляютб мкл растворителя и также.инкубируют. Через 1 ч к пробам добавляют 8,33 мМ флюоресцирующего зонда АН С (1-анилино-нафталино-сульфат) 10 мкл и находя изменение флюоресценции зонда в 50 клетках под влиянием моноаминов, которое выражается либо в тушении флюоресценции зонда, либо в стимуляции этого параметра, Для возбуждения флюоресценции пробы подается свет с длиной волны 365 нм, свечение регистрируется при 470 нм на микроскопе ЛЮМАМ с помощью ФЭУ:, о реактивности клеток к биогенным мойоаминам судят по разности флюоресценции в опытной и контрольной пробах Разницей в величине флюоресценции выражается реактивность клетки к моноаминам.1727071 требуется минимальное количество кровииэ пальца обследуемого,Формула изобретения5 Составитель Р. Гуменюк Редактор Л, Пчолинская Техред ММоргентал Корректор Э. ЛонцаковаЗаказ 1276 Тираж Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж, Раушская наб 4/5 Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул, Гагарина, 101 П р и м е р 1. Флюоресценция опытной пробы с адреналином 0,650 мВ, флюоресценция контрольной пробы 0,430 мВ. Разница 0,220 мВ служит количественным выражением реактивности клеток в крови к адреналину.П р и м е р 2. Флюоресценция опытной пробы с серотонином 0,880 мВ, флюоресценция контрольной пробы 0,560 мВ. Разница 0,320 мВ служит количественным выражением реактивности клеток в крови к серотонину,Использование предлагаемого способа оценки реактивности клеток крови к биогенным моноаминам по сравнению с существующими обеспечивает следующие преимущества: исключается введение в организм обследуемого моноаминов, что , важно для исключения побочных нежелательных реакций; для определения реактивности клеток к биогенным моноаминам Способ определения реактивности клеток крови к биогенным моноаминам, включающий забор крови, выделение клеток крови и их анализ в присутствии биогенно гомоноамина,отличающийся тем,что,с целью устранения побочных реакций у пациентов и снижения травматичности, забор крови проводят однократно, затем выделенную взвесь лейкоцитов или эритроцитов 15 суспензируют в буферном растворе, вносятбиогенный амин в опытную пробу, инкубируют в течение 1 ч при 25 ОС, далее добавляют 1-анилино-нафталино-сульфонат, а реактивность клеток определяют флуори метрически по разнице величины флуоресценции опытной и контрольной проб.