Способ диагностики пищевой аллергии

СОЮ СОВЕТСКИХ СОЦИЛЛИСТИЧЕСКИХ РЕСПУБЛИК,А,Низо ЕВОЙ ицине, Ф зобретек медицине, в ллергологии, яется повышем определения ГОСУДЛРСТВЕ ННЫЙ КОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМПРИ ГКНТ СССР К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТ(56) Авторское свидетельство ССМ 1197640, 15.08.85.(54) СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ ПАЛЛЕРГИИ(57) Изобретение относится к мчастности к аллергологии, Целью Изобретение относитсяЧаСтНОСТИ К 11 Л 1 МУНОЛ 01 ИИ 11Целью изобретения явние точности способа путетипа аллергии. Способ осуществляется следующим образом. Лимфоциты периферической крови больного выделяют на фиколлверографиноеом градиенте плотностью 1,077, затем дважды отмывают средой 199. Для получения Е-РОК 0,1 мл взвеси содержа цей 2 10 лимфоцитов, сл 1 еш.1 вают с 0,1 мл 0.5%-ной взвеси зритроцитов барана и выдерживают 5 мин при 37 С и 60 мин при 4-8 С, Для получения ЕАС.РСК взвесь лилфоцитов смеш 1 вают с эритроцитами барана, нагруженными антителали и комплементом. Розетки фиксируют глутаровым альдггидом в конечной концентрации 0,6%, Обычным.,Ж 1704089 А 1 ния является повышение точности способа эа счет определения типа аллергии. Цель достигается путем постановки реакции спонтанного роэеткообраэования с выявлением Т- и В-лимфоцитов с последующим определением коэффициента синтетической активностидля Т- и В-лимфоцитов при окрашивании фиксированных клеток акридиновым оранжевым. И при ат больше 0.28 аллергию определяют как протекающую преимущественно по замедленному типу, а при а больше 0,33 - преимущественно по немедленному типу. способом на стекле приготавливают мазки, которые красят акридиновым оранжевым по Карнаухову В.Н. (1978);10 мин - фиксатор Карнуа, 3 мин - 96%-ный этиловый спирт, 3 мин - 70%-ный этиловый спирт, 1,5 мин - 30%-ный этиловый спирт. 4 мин цитратно-фосфатный буфер (рН 4,2), 10 мин - акридиновый оранжевый 0.003%-ной концентрации, 2 мин - дистиллированная вода. Мазки просматривают с водной иммерсией в люминесцентном цитофлуориметре с последующей регистрацией фототока на цифровом вольтметре с каждого лимфоцита в красном (640 нм) и зегеном (530 нм) спектрах (всего 100 лимфоцитое в МаЭКЕ). ЭтаЛОНЫ О КРаСНОМ И ЭЕЛЕНОл 1 СПЕК- трах вводят по регистрации тока фотолюминесценции с эталонного уранового стекла согласно инструкции пользования люминесцентным микроскопом. Коэффициент синтетической активности а рассчоты1704089 Соста вител ь Р. Гуме нюкТехред М.Моргентал Корректор С.Шевкун Редактор Н,Бобкова экаэ 60 Тираж Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035. Москва. Ж. Раушская наб., 4/5 Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул.Гагарина. 101 вают по соотношению показаний красной люминесценции к зеленой для каждого мазка. И при повышении а Т-лимфоцитов больше 0,28 считают, что пищевая аллергия протекает по замедленному типу, а при а В-лимфоцитов более О,ЗЗ - преимущественно по немедленному типу. что является существенным при выборе адекватного лечения.П р и м е р 1. Больная Н 34 года. Диагноз, пищевая аллергия по типу бронхоспазма, вазомоторного ринита, Хронический гастрит с сохраненной секрецией. После приема 50 г земляничного варенья через 10 мин сердцебиение, головная боль, через 20 мин одышка, эаложенность носа, Через сутки Т-лимфоциты 527 ь, В-лимфоциты 34 ф 6, ат,28, ав -0,65,д ЕМЕ. В соответствии с определением типа аллергии была назначена терапия, подавляющая аллергические реакции немедленного типа, После лечения состояние улучшилось, бронхоспазм исчез, эаложенность носа уменьшилась, Т-лимфоциты 527 ь, В-лимфоциты 287 ь,а, -0,28, а,-0,22.дЕ - ЗООМЕ. Клинико-лабораторные данные - снижение а, в три раза, эффект от лечения - у больной пищевая аллергия протекает по немедленному типу.П р и м е р 2. Больная В. 62 года, Диагноз: пищевая аллергия по типу аллергического дерматита. Хронический колит, Состояние удовлетворительное, на коже рук, лица, передней брюшной стенки папулеэные высыпания, Т-лимфоциты 597 ь, В- лимфоциты 15, ат -0,99, ав,44,9 Е 150 МЕ, После лечения эллюминационная диета, курс иглорефлексотерапии, которое более эффективно при аллергических реакци.ях замедленного типа, высыпания на кожезначительно уменьшились и побледнели.5 Т-лимфоциты 577 ь, В-лимфоциты 147 ь, аг 0,48, ав -0,43, 1 д ЕМЕ. Клинико-лабораторные данные - уменьшение а в двараза, эффект от соответствующей терапии -пищевая аллергия протекает по замедлен 10 номутипу,Таким образом предлагаемый способпозволяет за короткий периоддиагностировать тип пищевой аллергии, что важно приназначении адекватного лечения. Способ15 прост в исполнении и не требует сложнойаппаратуры.Формула изобретенияСпособ диагностики пищевой аллергии путем цитометрии лимфоцитов с20 помощью флуоресцентного красителя.о т л и ч а ю щ и й с я тем, что, с цельюповышения точности способа путем определения типа аллергии, перед цитометривй осуществляют дифференцирование25 Т- и В-лимфоцитов в реакции роэеткообраэования, при этом розетки фиксируют глуторовым альдегидом, а окрашиваютакридиновым оранжевым в концентрации0,003, измеряют флуоресценцию в зелеЗО ном и красном спектрах, считают коэффициент а синтетической активности какотношение показаний красной и зеленойфлуоресценции отдельно для Т- и В-лимфоцитов и при а 1 больше 0,28 диагностируютпищевую аллергию. протекающую по замедленному типу, а при ае больше 0.33 -по немедленному типу,